S-Adenosyl methionine (S-Adenosyl methionine, SAM), vücutta sentez etkisi altında metionin adenosiltransferazda adenozin trifosfat ve metioninden oluşan metil transfer reaksiyonunda yer alan bir yardımcı substrattır. SAM, 10 mM HCl, %10 Etanol ve 25℃'de pH 4'lük bir çözeltide hazırlanır. Bu ürün GMP proses gereksinimlerine göre üretilir ve sıvı formda sağlanır.

Özellikler

• Doğrulanmış, ürüne özgü süreçler ve analitik yöntemler
• Ürüne özgü stabilite
• Belgeler geçerli GMP yönergelerini takip eder
• AOF üretim süreci ve hammaddeler (TSE & BSE)
• Nitrozamin beyanı
• Düzenleyici destek belgeleri mevcuttur
• Büyük ölçekli üretim

Uygulamalar

• mRNA aşıları ve terapötikleri için enzimatik kapatma işlemi
• Biyopolimerlerin enzimatik metilasyonları

Özellikler

CAS Numarası	485-80-3
Formül	C15H23N6O5S+
Moleküler Ağırlık	399,44 gr/moL
Saflık (HPLC)	＞ %90
İçerik	32 mM ± 2 mM
Kompozisyon (1X)	10 mM HCl, %10 Etanol pH 4, 25℃
Yapı

Bileşenler

Nakliye ve Depolama

Ürün kuru buzla gönderilmekte olup -15℃ ~ -25℃ arasında bir yıl saklanabilmektedir.

Rakamlar

• Saflık Değerlendirmesi

Şekil 1. SAM ürününün saflığı (HPLC) %98'in üzerinde olabilir (Şekil 1A) ve (S, S) -SAM izoformunun optik saflığı (ee, %) her zaman yaklaşık %70 olabilir (Şekil 1B).

• Enzim Kalıntısı Tespiti

Şekil 2. Agar jel elektroforezi ile enzim kalıntısı saptanmadı.

λDNA'nın 500 ng Hind III sindirimi ve 2 µl S-adenosilmetionin (SAM) içeren tamponda 20 µl'lik bir reaksiyon, 37ºC'de 4 saat inkübe edildiğinde, agar jel elektroforezi ile kontrol (reaksiyon sisteminde SAM serbest) ile karşılaştırıldığında hiçbir fark göstermedi (Şekil 2A).500 ng pUC19 plazmidi ve 2 µl S-adenosilmetionin (SAM) içeren tamponda 20 µl'lik bir reaksiyon, 37ºC'de 4 saat inkübe edildiğinde, agar jel elektroforezi ile kontrol (reaksiyon sisteminde SAM serbest) ile karşılaştırıldığında hiçbir fark göstermedi (Şekil 2B).

• Fonksiyonel Test ve Doğrulama

Şekil 3 YEASEN transkripsiyon sonrası kapama reaksiyonunun kapama etkinliği %99'a yakın olabilir.

1 µg λDNA, 1 ünite M. SssI (CpG Metiltransferaz) ve 160 µM S-adenosilmetionin (SAM) içeren tamponda 20 µl'lik bir reaksiyon 37°C'de 1 saat inkübe edilir. Elde edilen DNA, agar jel elektroforezi ile belirlendiği üzere BstUI ile sindirime dirençlidir (Şekil 3A). 10 µg RNA'lar, kapatmadan önce 5 dakika boyunca 65°C'de inkübasyonla denatüre edildi. 20 µL'lik transkripsiyon sonrası kapatma reaksiyonu kuruldu ve bir PCR makinesinde 37°C'de 2 saat inkübe edildi. Transkriptler manyetik boncuklarla (Cat#12602) saflaştırıldı. Daha sonra kapatma verimliliği LC-MS ile tespit edildi (Şekil 3B).