LZCap AU (3'Acm) bir cap1 analogudur. Ürün, 5'AU3' başlangıç ​​dizisi ile transkripsiyon için kullanılır ve doğal cap1 yapısı Cap1 transkripsiyon kaplanması ile üretilir. Geleneksel kaplanma yöntemi ile üretilen Cap0 ile karşılaştırıldığında, CapAU (3'Acm) tarafından üretilen cap1 yapısı, SaRNA'nın in vivo daha yüksek aktiviteye ve translasyon verimliliğine sahip olmasını sağlar.

ABD patenti onaylandı.

Bileşenler

Ürün Detayları

LZ Başlığı^® DNA Şablon Tasarımı

LZ Başlığı^®AU(3'Acm) AG başlatılan diziler için uygundur. Aşağıdaki şekilde gösterildiği gibi, AG dizisinin izlediği T7 promotörü (altı çizili) transkripsiyonu etkili bir şekilde başlatabilir.

Protokol

1. Deney için gerekli bileşenleri buz üzerinde çözün.

2. Transkripsyon sistemini oda sıcaklığında yapılandırmak için aşağıdaki reaksiyon sistemine bakın.

Değiştirilmiş N1-Me-pUTP, vahşi tip UTP yerine kullanılabilir. Değiştirilmiş N1-Me-pUTP, mRNA'nın immünogenitesini azaltır. Henovcom ayrıca modifiye edilmiş nükleotid N1-Me-pUTP'yi (Kat. No.: HN1002) de sağlayabilir.

Notlar:

1)     LZ Başlığı^®AU(3'Acm), vektör oluşturulurken dikkate alınması gereken 5 'AU 3' başlatılmış diziye sahip T7 promotör transkripsiyon vektörü için uygundur.

2)     Deneyde kullanılan reaktifler, sarf malzemeleri ve kaplar RNase kontaminasyonundan aridir.

3)     Transkripsiyon için doğrusallaştırılmış DNA şablonunun kullanılması önerilir.

4)     Doğal tip nükleotidler yerine modifiye nükleotidler kullanıldığında, reaksiyonun son konsantrasyonu değişmedi.

5)     PCR ürününün transkripsiyon başlatma DNA şablonu olarak kullanılması durumunda DNA şablonu miktarı yarı yarıya azaltılabilmektedir.

3． Hazırlanan reaksiyon solüsyonunu karıştırın, kısa bir süre santrifüj edin ve 37°C'de 2-3 saat inkübe edin. Transkript uzunluğu 100 nt'den azsa, reaksiyon süresini 4-8 saate çıkarın.

Genel Güvenlik Profili

Depolamak

Bu ürün -25~-15 ℃'de iki yıl saklanabilir.

Önlemler

1. Kendi güvenliğiniz ve sağlığınız için, bu ürünle çalışırken lütfen laboratuvar önlüğü ve tek kullanımlık eldiven gibi kişisel koruyucu ekipman (KKE) kullanın.
2. Sadece araştırma amaçlıdır.
   

Sıkça Sorulan Sorular

1. LZCap nasıl tasarlanıyor?

Enzimler substratları nispeten "özgül" bir şekilde tanır. Bu nedenle, yeni bir başlık yapısı tasarlarken, bir yandan patent amaçları için yeni yapısal değişikliklere ihtiyaç duyarız, ancak diğer yandan, mümkün olduğunca doğal/bilinen yapılarla benzerliği korumaya çalışırız. Doğal yapı, modifiye edilebilen (örneğin, metilasyon) bir riboz 3' OH'ye sahiptir. Bu düşünceye dayanarak, patent yeniliği için 3' pozisyonuna bir karbon, ardından OH'nin hidrojen bağını taklit etmek için bir NH ve ardından NH'nin bazikliğini azaltmak ve hidrojen bağ yeteneğini artırmak için bir asetil grubu eklemeyi seçtik. LzKapak metilattan daha iyidired doğal kapak, muhtemelen artan hidrojen bağı nedeniyle. Metil ve metoksi gruplarıyla karşılaştırıldığında, asetil amino grubu ayrıca substrat (kapak) ve başlatıcı faktör (enzim) arasındaki van der Waals etkileşimlerini de artırabilir.

2. Asetil amino grubu stabil midir?

Asetil amino grubu zaten yeterince kararlıdır. Başlığın en az kararlı kısımları olan 7-metillenmiş pozisyon ve fosfodiester bağından çok daha kararlıdır.

LZCap lisanslaması hakkında daha detaylı bilgi için lütfen bizimle iletişime geçiniz.