Hieff Clone™ Universal II One Step Cloning Kit, yeni geliştirilmiş bir klonlama kitidir.

Dikkatle optimize edilmiş 2. nesil 2× Hieff Clone™ Universal II Enzim Premiksi, rekombinant enzimi ve rekombinant reaksiyon için gerekli tamponu, benzersiz bir rekombinant güçlendirici ilavesiyle birleştirerek rekombinant klonlamanın verimliliğini önemli ölçüde artırır.

Kit, PCR ürünlerini herhangi bir vektörün herhangi bir bölgesine klonlamak için yönlendirilebilir, saflaştırılmamış PCR ürünleriyle uyumludur, doğrudan geri kazanılmış PCR ürünleri, düşük konsantrasyonda kauçuk geri kazanılmış ürünler, bu ürün eklem parçasının %30-%70'lik homolog kol GC içeriğini yeniden birleştirebilir. Vektör tamamen doğrusallaştırıldı ve doğrusallaştırılmış vektörün 15-25 bp'lik ucunun homolog dizileri, eklenen parçanın pozitif ve ters PCR primerlerinin 5' ucuna sokuldu, böylece eklenen parçanın PCR ürünlerinin 5' ve 3' uçları, doğrusallaştırılmış vektörün iki ucuna karşılık gelen tam olarak aynı diziye sahipti. Rekombinant enzimin etkisi altında, PCR ürünü ve doğrusallaştırılmış vektörün rekombinant reaksiyonu 50℃'de sadece 5 dakikada tamamlanabilir. Pozitif klonlama oranı %95'in üzerine çıkabilir.

Özellikler

Basit: Tek bir reaksiyonda altı DNA parçasına kadar klonlama yapın.

Esnek: Tasarım yönergeleri, seçtiğiniz herhangi bir vektöre montaj yapmanıza olanak tanır.

Verimli: Bir ila yedi parçanın bağlanmasında verimli.

Uygulamalar

Ani Klonlama: Birden fazla örtüşen DNA parçasının tek adımda, 5-50 dakikalık izotermal bir reaksiyonla sorunsuz bir şekilde birbirine bağlanmasını sağlar.

Yönlendirilmiş Klonlama; Bölgeye Yönelik Mutagenezi.

Özellikler

Bileşenler

Depolamak

Bu ürün -25~-15℃'de 1 gün saklanmalıdır. Yıllar.

Rakamlar

Fşekil 1. 6μL küçük sistemin resüsitasyona ihtiyaç duymayan alıcı durumunda 10 ng düşük girişli tek parçalar bağlandı. Sonuçlar, 10923ES'nin yüksek bağlantı verimliliği, daha fazla koloni ve %100 pozitif oranıyla rakip ürünlerden daha iyi performansa sahip olduğunu gösterdi. AB: Kloni plakası. Taşıyıcının (10 kb) ekleme parçasına (1 kb) molar oranı 1:2 idi. C: Ekleme parçası PCR ile tanımlanan elektroforez haritası, M: YEASEN 10505ES.

Şekil 2. Altı parça (toplam uzunluk 7,6 kb) 11,6 kb'lik bir plazmite klonlandı. Sonuçlar 10923ES'in daha fazla koloni ve %100 pozitif oranıyla rakip ürünlerden daha iyi performans gösterdiğini gösterdi. AB: Koloni plakası. Taşıyıcının (11,6 kb) ekleme parçalarına molar oranı 1:2 idi. C: Ekleme parçasının elektroforez analizi, M: YEASEN 10505ES. Plazmit girişi：200 ng/20 μL, 50°C, 50 dakika.

İlgili Alıntılar ve Referanslar:

[1] Zhang H, Shao S, Zeng Y, ve diğerleri. Isı şoku sırasında akut transkripsiyonel yanıt için HSF1'in geri dönüşümlü faz ayrımı gereklidir. Nat Hücre Biyolojisi. 2022;24(3):340-352. (EĞER:28.824)

[2] Xu Y, Yu Q, Wang P, ve diğerleri. Seçici Küçük Moleküllü c-Myc Parçalayıcı, Ölümcül c-Myc Aşırı İfade Eden Tümörleri Güçlü Bir Şekilde Geriletir. İleri Bilim (Weinh). 2022;9(8):e2104344. (EĞER:16.806)

[3] Guan B, Jiang YT, Lin DL, Lin WH, Xue HW. Fosfatidik asit, GAPC (gliseraldehit-3-fosfat dehidrogenaz) ve PGK (fosfogliserat kinaz) proteinlerine bağlanarak rekabetçi inhibisyon yoluyla otofajiyi baskılar [baskıdan önce çevrimiçi olarak yayınlanmıştır, 15 Mart 2022]. Otofaji. 2022;1-15. (EĞER:16.016)

[4] He X, Li Y, Chen Q ve diğerleri. SIRT7'nin O-GlcNAcylation'ı ve stabilizasyonu, SIRT7-REGγ etkileşimini bloke ederek pankreas kanserinin ilerlemesini teşvik eder [baskıdan önce çevrimiçi olarak yayınlanmıştır, 14 Nisan 2022]. Hücre Ölümü Farklılığı. 2022;10.1038/s41418-022-00984-3.(EĞER:15.828)

[5] Zhou T, Zhu X, Ye Z, ve diğerleri. Lupus güçlendirici risk varyantı, kooperatif lncRNA ve DNA metilasyon mekanizması aracılığıyla IRF8'in düzensizliğine neden olur. Ulusal Topluluk. 2022;13(1):1855. 6 Nisan 2022'de yayımlandı. (EĞER:14.919)

[6] Li T, Chen X, Qian Y, ve diğerleri. Farelerde glikoz homeostazını sağlayan pulsatil transgen ekspresyonu için sentetik bir BRET tabanlı optogenetik cihaz. Ulusal Topluluk. 2021;12(1):615. 27 Ocak 2021'de yayımlandı. (EĞER:14.919)

[7] Wu P, Zhang T, Liu B, ve diğerleri. Peptit-MHC Sınıf I Konformasyonlarının Mekano-Düzenlenmesi TCR Antijen Tanımasını Belirler. Mol Hücresi. 2019;73(5):1015-1027.e7. (EĞER:14.548)

[8] Xiong L, Liu S, Chen S, ve diğerleri. Arkelerde yeni bir tür DNA fosforotioasyona dayalı antiviral sistem. Ulusal Topluluk. 2019;10(1):1688. 11 Nisan 2019'da yayımlandı. (EĞER:11.878)

[9] Jiang L, Wang Y, Xia A, ve diğerleri. Sülfit redüktazdaki doğal bir tek nükleotid polimorfizm varyantı mısırda kükürt asimilasyonunu etkiler. Yeni Fitol. 2021;232(2):692-704. (EĞER:10.152)