Tanım
Hifair™ Advanced One Step RT-qPCR Kit, SYBR Green I boyasına dayalı floresan kantifikasyonu için bir kittir. Gen-spesifik primerler kullanılarak ters transkripsiyon ve qPCR reaksiyonları tek bir tüpte tamamlanır, tekrarlanan kapak açma ve pipetleme işlemlerine olan ihtiyaç ortadan kalkar, analiz verimliliği büyük ölçüde iyileştirilir ve kontaminasyon riski azaltılır. RNA örnekleri için kit, ısıya dayanıklı Hifair kullanır™ Verimli cDNA sentezi ve UNICON için V Ters Transkriptaz™ Nicel amplifikasyon için HotStart Taq DNA Polimerazı. Optimize edilmiş tampon sistemi altında, kitin duyarlılığı yüksek ifadeli hedefler için 0,1 pg kadar yüksek ve orta derecede ifadeli hedefler için 1 pg kadar yüksek olabilir ve kit ayrıca DNA örneklerinin amplifikasyonu ve kantifikasyonu için de uygundur. Kit, DNA örneklerinin amplifikasyonu ve kantifikasyonu için uygundur. Farklı bitki ve hayvan örneklerinden, hücrelerden ve mikroorganizmalardan nükleik asitlerin hassas bir şekilde tespit edilmesini ve kantifikasyonunu sağlar.
Özellikler
Kat.No. | 11175ES20 / 11175ES70 |
Boyut | 20 T/200 T |
Bileşenler
Bileşenler No. | İsim | 11175ES20 | 11175ES70 |
11175-A | 2× Hifair™ Gelişmiş SG Arabellek | 250 μL | 2×1,25 ml |
11175-B | Hifair™ Gelişmiş UH Enzim Karışımı | 20 μL | 200 μL |
11175-C | RNaz Serbest H2O | 250 μL | 2×1,25 ml |
Depolamak
Bu ürün -25~-15℃'de saklanmalıdır uzak itibaren ışık için 1 yıl.
Talimatlar
- Tepki sistem yapılandırma*****
Bileşenler | Hacim (μL)**** | Hacim (μL) | Son konsantrasyon |
2× Hifair™ Gelişmiş SG Arabellek* | 12.5 | 25 | 1× |
Hifair™ Gelişmiş UH Enzim Karışımı | 1 | 2 | - |
İleri Primer (10 μmol/L)** | 0.5 | 1 | 0,2 μmol/L |
Ters Primer (10 μmol/L)** | 0,5 | 1 | 0,2 μmol/L |
RNA*** | X | X | - |
RNaz Serbest H2O | 25'e kadar | ile 50 | - |
* Düşük Rox modelleri ve Rox düzeltmesi olmayan modeller doğrudan yukarıdaki reaksiyon sistemine göre hazırlanır. Yüksek Rox modeli kullanıldığında, 1:250 v/v'de 2 x Hifair™ Advanced SG Tamponuna Hieff™ SP High Rox ekleyin, iyice karıştırın ve santrifüjleyin. 2× Hifair™ Hieff™ SP High Rox özellikli Gelişmiş SG Tamponu, Düşük Rox ve Rox Olmayan düzeltme modellerinin kullanımını etkilemez.
** Son primer konsantrasyonu 0,2 μmol/L olup, uygun şekilde 0,1 ile 1 μmol/L arasında da ayarlanabiliyordu.
*** Reaktif son derece hassastır, Toplam RNA 1 pg-1 μg aralığındadır ve insan örneklerinin test edilmesi, uygun şekilde 15-30 aralığında bir genel Ct değeri kontrol edilerek, 1 pg-100 ng'lik optimum bir girdi göstermiştir.
**** Hedef gen amplifikasyonunun geçerliliğini ve tekrarlanabilirliğini garantilemek için 20 μL veya 50 μL kullanılması önerilir.
***** Lütfen ultra temiz tezgahta hazırlanın ve nükleaz kalıntısı olmayan uçlar ve reaksiyon tüpleri kullanın; filtre kartuşlu uçlar önerilir. Çapraz kontaminasyondan ve aerosol kontaminasyonundan kaçının.
2) Reaksiyon programı
Döngü adım | Sıcaklık. | Zaman | Döngüler |
Ters transkripsiyon | 50℃* | 6 dakika | 1 |
İlk denatürasyon | 95℃ | 5 dakika | 1 |
Amplifikasyon reaksiyonu | 95℃ | 15 saniye | 40 |
60℃** | 30 saniye | ||
Erime eğrisi aşaması | Enstrüman Varsayılanları | 1 |
*Ters transkripsiyon sıcaklığı deneysel ihtiyaçlara göre 50-55°C arasında seçilebilir. DNA örnekleri için ters transkripsiyon işlemi atlanabilir.
** Özel durumlarda tavlama/uzatma sıcaklığı primer Tm değerine göre ayarlanabilir, 60°C önerilir.
3)Uygulanabilir Model
Rox kalibrasyonu gerektirmeyen enstrüman modelleri:
Biyo-Rad: CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, MiniOpticon, Opticon, Opticon 2, Chromo4;
Eppendorf: Mastercycler ep realplex, realplex 2 s;
Qiagen: Corbett Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000;
Roche Uygulamalı Bilim: LightCycler 480, LightCycler2.0, Işık Döngüsü 96;
Thermo Scientific: PikoReal Cycler; Cepheid: SmartCycler; Illumina: Eco qPCR;
Düşük Rox uygulanabilir modeller:
ABI 7500, 7500 Fast, ViiA7, QuantStudio 3 ve 5, QuantStudio 6, 7, 12k Flex;
Stratagene MX3000P, MX3005P, MX4000P;
Yüksek Rox uygulanabilir modeller*:
ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne, StepOne Plus.
* High Rox modelleri için Hieff™ SP High Rox'un 2 x Hifair'e orantılı olarak eklenmesi gerektiğini unutmayın.™ Kullanmadan önce Advanced SG Buffer'ı kullanın.
Notlar
- Bu ürün yalnızca araştırma amaçlıdır.
- Lütfen güvenliğiniz için laboratuvar önlüğü ve tek kullanımlık eldivenlerle çalışın.
Belgeler:
Güvenlik Bilgi Formu
Kılavuzlar
Ödeme ve Güvenlik
Ödeme bilgileriniz güvenli bir şekilde işlenir. Kredi kartı ayrıntılarını saklamıyoruz veya kredi kartı bilgilerinize erişimimiz yok.
Sorgu
Ayrıca sevebilirsiniz
SSS
Ürün yalnızca araştırma amaçlıdır ve insanlarda veya hayvanlarda terapötik veya teşhis amaçlı kullanım için tasarlanmamıştır. Ürünler ve içerikler, Yeasen Biotechnology'nin sahip olduğu patentler, ticari markalar ve telif haklarıyla korunmaktadır. Ticari marka sembolleri, tüm bölgelerde tescilli olmayıp, menşe ülkesini gösterir.
Bazı uygulamalar üçüncü tarafların ek fikri mülkiyet haklarına ihtiyaç duyabilir.
Yeasen, araştırmalarımızın güvenlik ve etik standartları sağlarken kritik soruları ele alması gerektiğine inanarak etik bilime kendini adamıştır.