Ateş böceği lüsiferaz, ATP, magnezyum iyonları ve oksijen varlığında lüsiferinin oksilüsiferine oksidasyonunu katalize edebilen yaklaşık 61 kDa moleküler ağırlığa sahip bir proteindir. Yaklaşık 560 nm dalga boyunda biyolüminesans yayar. Renilla lüsiferaz, oksijen varlığında koelenterazinin koelenteramide oksidasyonunu katalize edebilen yaklaşık 36 kDa moleküler ağırlığa sahip bir proteindir ve oksidasyon süreci sırasında 480 nm dalga boyunda yayar. biyolüminesans hakkında. Her iki biyolüminesans da kemilüminesans ile ölçülebilir. Algılama prensibi şekil 1'de gösterilmiştir:

Şekil 1: Firefly ve Renilla lüsiferaz deneyi şeması

Genellikle, hedef genin 5'UTR'si veya promotörü Firefly Luciferase'ın yukarı akışında klonlanır veya 3'UTR Firefly Luciferase'ın aşağı akışında klonlanır ve promotörün veya düzenleyici elementin transkripsiyonel düzenleme etkisi firefly luciferase miktarının saptanmasıyla saptanır. Renilla Luciferase, hücre sayısı, transfeksiyon verimliliği vb.'deki farklılıkları ortadan kaldırmak için dahili kontrol olarak kullanıldı. Dual Luciferase Reporter Gen Assay Kit, firefly luciferase reporter geninin aktivitesini saptamak için substrat olarak luciferin kullanır ve ardından floresan reaksiyonunu söndürürken Renilla luciferine'i saptamak için substrat olarak koelenterazin kullanır. Enzim reporter gen aktivitesi. Kit, yüksek hassasiyet özelliklerine sahiptir.

Özellikler

Gelişmiş Lizis Yeteneği: Hücre tiplerinin büyük çoğunluğunu tamamen lize edebilme yeteneğine sahiptir.

Daha Güçlü Sinyal: Zayıf promotör ifadesinin hassas tespiti.

Yüksek Hassasiyet: Lüsiferaz moleküllerinin 10-20 pikomol seviyesine kadar tespit edilebilir.

Daha Geniş Doğrusal Aralık: Doğrusal tespit aralığı, enzim konsantrasyonunun 8 büyüklük sırasını aşar.

Uygulamalar

Hedef gen 3'UTR'leri ile miRNA etkileşimlerinin doğrulanması

LncRNA-miRNA etkileşimlerinin doğrulanması

Promoter bölgesinde transkripsiyon faktörü düzenlemesinin doğrulanması

Sinyal yolu analizi

SNP aktivite analizi

Özellikler

Bileşenler

Nakliye ve Depolama

Dual Luciferase Reporter Gen Testi Kiti ürünleri -15℃'de saklanmalıdır. ~ -25℃ için 1 yıl.

Rakamlar

Şekil 1. EVET (Kedi#: 11402) Brand P'ninkine benzer bir floresan yoğunluğuna sahiptir.

Figür2. SenKOLAYLAŞTIRMAK (Kedi#: 11402) tespit reaktifleri, optimum lüminesans yoğunluğuna ulaşmak için lüsiferaz ile etkileşime girer. Renilla lüsiferaz substratının eklenmesinden sonra, ateş böceği lüsiferazının biyolüminesansı söndürülür: esasen tamamen söndürülebilir.

Belgeler:

Güvenlik Bilgi Formu

11402 MSDS HB220209 TR.PDF

Kılavuzlar

11402 Kılavuz HB241230 TR.pdf

Alıntılar ve Referanslar:

[1] Wang H, Yang J, Cai Y, Zhao Y. Makrofajlar, IFN aracılı hücreler arası kendi kendini uyaran devre aracılığıyla fibroblastların kardiyak yeniden programlanmasını in vivo bastırır [yayınlanmış düzeltme Protein Cell'de yer almaktadır. 2024 Aralık 2;15(12):938. doi: 10.1093/procel/pwae038]. (EĞER=21.1)

[2] Zhao L, Zhu Y, Tao H, ve diğerleri. Ailanthone, JUN'a bağlı MEOX1 aktivasyonunu baskılayarak akciğer fibrozunu iyileştirir. Acta Pharm Sin B. 2024;14(8):3543-3560. doi:10.1016/j.apsb.2024.04.013(EĞER=14,5)

[3] Wu X, Chen S, Zhang Z, ve diğerleri. Viral küçük müdahaleci RNA-konak bitki mRNA yolu, otofajiyi artırarak virüs kaynaklı kuraklık toleransını düzenler. Bitki Hücresi. 2024;36(9):3219-3236. doi:10.1093/plcell/koae158(EĞER=12.6)

[4] Xuan H, Li Y, Liu Y, ve diğerleri. H1/H5 alanı, pirinç gelişimi sırasında OsTRBF2 faz ayrımına ve gen baskılanmasına katkıda bulunur. Bitki Hücresi. 2024;36(9):3787-3808. doi:10.1093/plcell/koae199(EĞER=12)

[5] Han Y, Hu Q, Gong N, ve diğerleri. MORE GRAINS 1'deki doğal değişim pirinçteki tane sayısını ve tane ağırlığını düzenler. J Integr Plant Biol. 2024;66(7):1440-1458. doi:10.1111/jipb.13674(EĞER=11.4)

[6] Pan M, Luo M, Liu L, ve diğerleri. EGR1, PFKL'yi transkripsiyonel olarak aşağı düzenleyerek HCC büyümesini ve aerobik glikolizi baskılar. J Exp Clin Cancer Res. 2024;43(1):35. 29 Ocak 2024'te yayımlandı. doi:10.1186/s13046-024-02957-5(EĞER=11.3)

[7] Hao X, Wang S, Fu Y ve diğerleri. WRKY46-MYC2 modülü, flavonoid birikimini teşvik ederek E-2-heksenal kaynaklı anti-otçul tepkilerinde kritik bir rol oynar. Plant Commun. 2024;5(2):100734. doi:10.1016/j.xplc.2023.100734(EĞER=10.5)

[8] Wu J, Li P, Li M, ve diğerleri. Isı stresi, domateste BR-SlCRCa kaskadını etkileyerek çiçek meristeminin sonlanmasını ve meyve gelişimini bozar. Plant Commun. 2024;5(4):100790. doi:10.1016/j.xplc.2023.100790(EĞER=10.5)

[9] Chen L, Xia S, Wang F, ve diğerleri. m6A metilasyon kaynaklı NR1D1 ablasyonu HSC sirkadiyen saatini bozar ve hepatik fibrozu teşvik eder. Pharmacol Res. 2023;189:106704. doi:10.1016/j.phrs.2023.106704(EĞER=10.33)

[10] Niu MX, Feng CH, He F, ve diğerleri. miR6445-NAC029 modülü, Populus'ta glutatyon S-transferaz U23 ve reaktif oksijen türlerinin süpürülmesini düzenleyerek kuraklık toleransını düzenler. New Phytol. 2024;242(5):2043-2058. doi:10.1111/nph.19703(EĞER=9.4)

[11]Huang T, You Q, Huang D, ve diğerleri.PDIA3P1 ve OCT4 arasındaki pozitif geri bildirim, özofageal skuamöz hücreli karsinomunun kanser kök hücre özelliklerini destekler. Hücre İletişim Sinyali. 2024;22(1):60. 22 Ocak 2024'te yayımlandı. doi:10.1186/s12964-024-01475-3(EĞER=8.4)

[12]Wang S, Liu Y, Hao X, Chen Y, Wang Z, Shen Y. Çöl çalılığında bitki defensinlerini artırma: AnWRKY29'un düzenleyici yolunu keşfetme. Int J Biol Macromol. 2024;270(Pt 1):132259. doi:10.1016/j.ijbiomac.2024.132259(EĞER=8.2)