Tanım
Hieff™ Çok Yönlülük T4 DNA Ligaz, T4 DNA Ligaz'ın bir çeşididir. Bu enzim, kohesif veya künt uçlu moleküller arasındaki ligasyon reaksiyonunu katalize etmek için uygundur. Yeni nesil dizilemede (NGS) kütüphane hazırlama süreci sırasında DNA parçalarını ve adaptörleri bağlamak için tasarlanmış tek enzimli bir üründür. Hieff® Çok Yönlülük T4 DNA Ligaz, yüksek verimli dizileme yoluyla kapsamlı bir şekilde doğrulanmıştır ve olağanüstü kalite sergilemektedir.
Özellik
- Yüksek sadakat
- Sıcaklık toleranslı
Çok yönlü T4 DNA ligaz gelişimi hakkında daha fazla bilgi edinin
Özellikler
| Kaynak | Rekombinant E.coli |
| Depolama Arabellek | 50 mM Tris-HC1,100 mM KC1,0.1 mM EDTA,1 mM DTT,%50Gliserol,pH 7.5Kız0,2 @25℃ |
| Birim Tanımı | 20 μL'lik bir ligasyon reaksiyon sisteminde, 6 μg λDNA-Hind III'ün 16°C'de 30 dakika reaksiyona sokulmasıyla, DNA parçalarının %50'sinden fazlasının ligasyonunu katalize etmek için gereken enzim miktarı, 1 aktivite birimi (U) olarak tanımlanır. |
Bileşenler
| Bileşenler | İsim | 12996ES60 60KU | 12996ES62 600KU |
| 12996-A | Hieff® Çok Yönlü T4 DNA Ligaz (600 U/µL) | 100 μL | 1000 μL |
| 12996-B | 10×T4 DNA Ligaz Tamponu | 500 μL | 3×1500 μL |
Depolamak
Bu ürün -25~-15℃'de 2 gün saklanmalıdır. Yıllar.
Figür
Bu enzimin diğer üst düzey termostabil ve konvansiyonel T4 DNA ligazları ile performans karşılaştırma verileri hakkında bilgi almak için lütfen bir mesaj bırakın.
Notlar
1. Lütfen laboratuvar önlükleri ve tek kullanımlık eldivenlerle çalışın.，Güvenliğiniz için.
2. Tamponda az miktarda çökelme meydana gelirse, bu normal bir durumdur. Lütfen kullanmadan önce tamponu ters çevirin ve iyice karıştırın.
3. Bu ürün yalnızca araştırma amaçlıdır.
Protokol
1. Ligasyona dayalı yöntemi kullanan mevcut ana akım DNA kütüphane hazırlama kitleri genellikle uç onarımı ve A-kuyruklama sonrasında saflaştırma adımları gerektirmez. DNA parçaları saflaştırma olmaksızın doğrudan adaptör ligasyonuna tabi tutulur. Bu kit ana akımla uyumludur Kusursuz adaptör ligasyonu için ticari olarak temin edilebilen uç onarım ve A-kuyruk sistemleri.
Aşağıdaki reaksiyonu buz üzerindeki bir mikro santrifüj tüpüne koyun, pipetleme veya çalkalama yoluyla hafifçe karıştırın, kısa bir süre santrifüjleyin ve 20°C'de 15 dakika boyunca ısıyla inaktive edin.
Tablo 1. Adaptör Ligasyonu için Reaksiyon Sistemi
| Bileşen | Hacim（μL） | Son konsantrasyon |
| dA kuyruklu DNA | 60 | 1× |
| 10×T4 DNA Ligaz Tamponu | 10 | 0,1 μM-0.5 μM |
| %50 PEG6000 | 12* | 1 ng-400 ng |
| DNA Adaptörü | 5** |
|
| 3~5*** |
| |
| Nükleaz içermeyen su | yukarı 100'e kadar | - |
【Not】*%50 PEG6000 solüsyonu kitte sağlanmamıştır, bunu kendiniz hazırlamanız gerekecektir
**Lütfen Tabloya bakınız 2 için adaptör miktarı.
***İhtiyaca göre 3-5 μL T4 DNA Ligaz eklenebilir.
2. Adaptörün konsantrasyonu, ligasyon verimliliğini ve kütüphane verimini doğrudan etkiler. Adaptörlerin aşırı kullanımı, içinde daha fazla adaptör dimerleri, düşük kullanım bağlantı verimliliğini ve kütüphane üretimini etkileyebilir. Tablo 2 Farklı miktarlardaki giriş DNA'sı için önerilen adaptör miktarını listeler.
Tablo 2. 100 pg-1 μg Giriş DNA'sı için önerilen adaptör miktarı
| Giriş DNA'sı | Konsantrasyon |
| 0,1 ng | |
| 1 ng | 0,5 μM |
| 10 ng | 1 μM |
| 25 ng | 2 μM |
| 100 ng~1000 ng | 10 μM |
【Not】：Adaptor miktarı Yukarıdaki tabloda yer alan gereksinimlere göre ayarlanabilir.
Ödeme ve Güvenlik
Ödeme bilgileriniz güvenli bir şekilde işlenir. Kredi kartı ayrıntılarını saklamıyoruz veya kredi kartı bilgilerinize erişimimiz yok.
Sorgu
Ayrıca sevebilirsiniz
SSS
Ürün yalnızca araştırma amaçlıdır ve insanlarda veya hayvanlarda terapötik veya teşhis amaçlı kullanım için tasarlanmamıştır. Ürünler ve içerikler, Yeasen Biotechnology'nin sahip olduğu patentler, ticari markalar ve telif haklarıyla korunmaktadır. Ticari marka sembolleri, tüm bölgelerde tescilli olmayıp, menşe ülkesini gösterir.
Bazı uygulamalar üçüncü tarafların ek fikri mülkiyet haklarına ihtiyaç duyabilir.
Yeasen, araştırmalarımızın güvenlik ve etik standartları sağlarken kritik soruları ele alması gerektiğine inanarak etik bilime kendini adamıştır.