Tanım
Tth DNA Polimeraz, termofilik bakteriden keşfedilen ısıya dayanıklı bir DNA polimerazdır Termos termofilus HB8. Mg²⁺ varlığında, bu enzim 5′-3′ DNA polimeraz aktivitesi ve 5′-3′ ekzonükleaz aktivitesi gösterir, ancak 3′-5′ ekzonükleaz aktivitesinden yoksundur, bu da onu PCR amplifikasyon reaksiyonları için yaygın olarak uygulanabilir hale getirir. Mn²⁺ varlığında, enzim 55-70°C sıcaklıklarda güçlü ters transkriptaz aktivitesi gösterir, bu da onu tek adımlı RT-PCR reaksiyonları için uygun hale getirir.
Şartname
Birim Tanımı: Bir birim (U) aktivite, şablon/primer olarak aktive edilmiş somon sperm DNA'sı kullanılarak, 74°C'de 30 dakikada toplam 10 nmol nükleotidi asitte çözünmeyen bir ürüne dahil eden enzim miktarı olarak tanımlanır.
Bileşen
HAYIR. | İsim | Boyut | |
14607ES72 (250 Kişi) | 14607ES80 (1250 Sen) | ||
14607-A | Tth DNA Polimerazı (5 U/μL) | 50 μL | 250 μL |
14607-B | 5×T. RT-PCR Tampon | 1 ml | 4×1,25 ml |
14607-C | 10×Tth PCR Tampon (Mg2+ ile) | 500 μL | 2×1,25 ml |
14607-D | 50mM Mg(OAc)2 | 250 μL | 1.25 ml |
14607-E | dNTP Karışımı (her biri 10 mM) | 150 μL | 750 μL |
Nakliye ve Depolama
Nakliyekuru buzla. Mağaza de -20°C'de, 2 yıl raf ömrüne sahiptir.
Önlemler
1) Çözülme sırasında tamponda az miktarda çökelti belirirse, bu normal bir durumdur. Lütfen kullanmadan önce ters çevirin ve iyice karıştırın.
2) Kendi güvenliğiniz ve sağlığınız için çalışma esnasında mutlaka laboratuvar önlüğü ve tek kullanımlık eldiven giyin.
3) Bu ürün sadece araştırma amaçlıdır!
Talimatlar
Önerilen PCR Reaksiyon Prosedürü:
1.Reaksiyon Sisteminin Hazırlanması
İsim | Hacim (μL) |
10×Tth PCR Tampon (Mg2+ ile) | 5 |
Tth DNA Polimerazı (5 U/μL) | 0,5 |
dNTP Karışımı (her biri 10 mM) | 1 |
Yukarı akış Astar 10μM | 2 |
Aşağı akış Astar 10μM | 2 |
Şablon DNA | 50 sayfa- 1μg |
gdH2O | ile 50 |
[Not]: Tth DNA Polimeraz, yukarı ve aşağı akış primerleri ve dNTP Karışımı miktarları, özel deneysel ihtiyaçlara göre ayarlanabilir.
2. Döngü Kurulumu
Adımlar | Sıcaklık(ºC) | Zaman | Döngüler |
Ön denatürasyon | 94 | 30 sn-5 dk | 1 |
Denatürasyon | 94 | 30 saniye |
35
|
Tavlama | 50-70 | 30 saniye | |
Eklenti | 72 | 60 sn/kb | |
Son Uzatma | 72 | 10 dk | 1 |
[Not]: Reaksiyon koşulları, özel deneysel gereksinimlere göre ayarlanabilir.
Önerilen RT-PCR Reaksiyon Prosedürü:
1. Reaksiyon Sisteminin Hazırlanması
İsim | Hacim (μL) |
5×T. RT-PCR Tampon | 10 |
Tth DNA Polimerazı (5 U/μL) | 1.5 |
50mM Mg(OAc)2 | 2.5 |
dNTP Karışımı (her biri 10 mM) | 1.5 |
Yukarı akış Astar 10μM | 2 |
Aşağı akış Astar 10μM | 2 |
Şablon RNA | 50 sayfa- 1μg |
ddH2O | ile 50 |
[Not]: Tth DNA Polimeraz, yukarı ve aşağı akış primerleri ve dNTP Karışımı miktarları, özel deneysel ihtiyaçlara göre ayarlanabilir.
2.Döngü Kurulumu
Adımlar | Sıcaklık (ºC) | Zaman | Döngüler |
Ters transkripsiyon | 55-70 | 30 dk | 1 |
Ön-denatürasyon | 94 | 30 sn-5 dk | 1 |
Denatürasyon | 94 | 30 saniye |
35
|
Tavlama | 50-70 | 30 saniye | |
Eklenti | 72 | 60 sn/kb | |
Son Uzatma | 72 | 10 dk | 1 |
[Not]: Reaksiyon koşulları, özel deneysel gereksinimlere göre ayarlanabilir.
Ödeme ve Güvenlik
Ödeme bilgileriniz güvenli bir şekilde işlenir. Kredi kartı ayrıntılarını saklamıyoruz veya kredi kartı bilgilerinize erişimimiz yok.
Sorgu
Ayrıca sevebilirsiniz
SSS
Ürün yalnızca araştırma amaçlıdır ve insanlarda veya hayvanlarda terapötik veya teşhis amaçlı kullanım için tasarlanmamıştır. Ürünler ve içerikler, Yeasen Biotechnology'nin sahip olduğu patentler, ticari markalar ve telif haklarıyla korunmaktadır. Ticari marka sembolleri, tüm bölgelerde tescilli olmayıp, menşe ülkesini gösterir.
Bazı uygulamalar üçüncü tarafların ek fikri mülkiyet haklarına ihtiyaç duyabilir.
Yeasen, araştırmalarımızın güvenlik ve etik standartları sağlarken kritik soruları ele alması gerektiğine inanarak etik bilime kendini adamıştır.