Tanım
Hifair™ Süper Ters Transkriptaz, yeni nesil bir ters transkriptazdır, Hangi e idiNişlenmiş M-MLV'den. Bu enzim RNase H aktivitesinden yoksundur ve 70°C'ye kadar reaksiyon sıcaklıklarına tolerans göstererek önemli ölçüde iyileştirilmiş termal stabilite sergiler. Karmaşık ikincil yapılara sahip RNA şablonlarının etkili ters transkripsiyonu için oldukça uygundur.
Uygulamalar
Bu ürün RT-PCR, RT-qPCR, RT-LAMP, RNA-seq ve cDNA sentezi deneyleri için uygundur. Ters transkripsiyon reaksiyon sıcaklığı 70°C'ye kadar ulaşabilir.
Birim Tanımı
Bir birim (U) enzim aktivitesi, 37°C'de 10 dakika içinde asitte çözünmeyen malzemeye 1 nmol dTTP'yi dahil etmek için gereken enzim miktarı olarak tanımlanır ve şablon primer olarak Poly(A).Oligo(dT) kullanılır.
Bileşen
| Bileşen | İsim | 14612ES92 | 14612ES93 |
| 14612 | Hifair™ Süper Ters Transkriptaz (200 U/μL) | 50 μL | 250 μL |
Depolama Koşulları
-25˚C ile -15˚C arasında 18 aya kadar saklayabilirsiniz.
Kullanım Talimatları
Birinci Zincir cDNA Sentezi Prosedürü
1. RNA Denatürasyonu (İsteğe Bağlı Adım)
1. RNA denatürasyonu sekonder yapıların açılmasına yardımcı olarak birinci zincir cDNA verimini önemli ölçüde artırır.
| Bileşen | Hacim |
| RNaz içermeyen ddH2O | 13 μL'ye kadar |
| Oligo(dT)18 (50 μM) veya Rastgele Primerler (50 μM) veya Gen Spesifik Primerler (2 μM) | 1 μL |
| Şablon RNA | Toplam RNA: 10 pg - 5 μg veya mRNA: 10 pg - 500 ng |
· 65°C'de 5 dakika ısıtın, ardından hemen 2 dakika buz üzerinde soğutun.
· Reaksiyon sıvısını toplamak için kısa bir santrifüj yapın ve aşağıda gösterildiği gibi ters transkripsiyon reaksiyon karışımını ekleyin.
2. Ters Transkripsiyon Reaksiyonu Kurulumu (20 μL Sistemi)
| Bileşen | Hacim |
| Önceki adımdan gelen reaksiyon karışımı | 13 μL |
| 5× Reaksiyon Tamponu | 4 μL |
| dNTP Karışımı (10 mM) | 1 μL |
| Hifair® Süper Ters Transkriptaz (200 U/μL) | 1 μL |
| RNaz İnhibitörü (40 U/μL) | 1 μL |
3. Ters Transkripsiyon Programı Ayarları
| Sıcaklık | Zaman |
| 25°C* | 5 dk |
| 50-70°C | 15-30 dk |
| 85°C** | 5 dk |
*Rastgele Primerler kullanıldığında, 25°C'de 5 dakika inkübe edin. Oligo(dT)18 veya Gen Spesifik Primerler kullanılıyorsa, bu adım atlanabilir.
85°C'de 5 dakika ısıtma ters transkriptazı inaktive eder ve ihtiyaç halinde ayarlanabilir.
Ters transkripsiyon ürünü, daha sonraki PCR veya qPCR reaksiyonları için hemen kullanılabilir, -20°C'de kısa süreli olarak saklanabilir veya dondurma-çözme döngülerinden kaçınmak için alikotlamadan sonra -80°C'de uzun süreli olarak saklanabilir.
Önlemler
1. Temiz bir laboratuvar ortamı sağlayın; temiz eldivenler ve maskeler takın. Kontaminasyonu önlemek için tüm deneysel sarf malzemelerinin RNase içermediğinden emin olun.
2. RNA bozulmasını önlemek için tüm işlemleri buz üzerinde gerçekleştirin.
3. Verimli ters transkripsiyonu garantilemek için yüksek kaliteli RNA örnekleri kullanın.
4. Bu ürün yalnızca araştırma amaçlıdır.
5. Kendi güvenliğiniz ve sağlığınız için ürünü kullanırken laboratuvar önlüğü ve tek kullanımlık eldiven giyin.
Belgeler:
Ödeme ve Güvenlik
Ödeme bilgileriniz güvenli bir şekilde işlenir. Kredi kartı ayrıntılarını saklamıyoruz veya kredi kartı bilgilerinize erişimimiz yok.
Sorgu
Ayrıca sevebilirsiniz
SSS
Ürün yalnızca araştırma amaçlıdır ve insanlarda veya hayvanlarda terapötik veya teşhis amaçlı kullanım için tasarlanmamıştır. Ürünler ve içerikler, Yeasen Biotechnology'nin sahip olduğu patentler, ticari markalar ve telif haklarıyla korunmaktadır. Ticari marka sembolleri, tüm bölgelerde tescilli olmayıp, menşe ülkesini gösterir.
Bazı uygulamalar üçüncü tarafların ek fikri mülkiyet haklarına ihtiyaç duyabilir.
Yeasen, araştırmalarımızın güvenlik ve etik standartları sağlarken kritik soruları ele alması gerektiğine inanarak etik bilime kendini adamıştır.