Tanım
CRISPR sisteminden türetilen ArCas12a Agathobacter rectalis bakteri ve ayrıca Cpf1 olarak da bilinir, 1263 amino asitten oluşan monomerik bir proteindir. CRISPR/Cas sisteminin bir sınıf II (tip V) üyesi olarak, ArCas12a yalnızca tek bir efektör protein aracılığıyla işlev görür ve T açısından zengin motifleri hedefleme, trans-aktifleştirici crRNA gerektirmeme, DNA çift sarmallı kırılmalarda yapışkan uçlar üretme, RNA işlemeye katılma ve DNA nükleaz aktivitesine sahip olma gibi Cas9'dan önemli farklılıklar gösterir.
ArCas12a, HNH alanından yoksundur ve hedef nükleik asidin 5' ucundaki timin (T) açısından zengin PAM bölgesini CRISPR RNA (crRNA) rehberliğinde tanımak için RuvC alanını bağımsız olarak kullanabilir ve hedef DNA'nın kesilmesini başlatabilir. Birçok memeli ve bitkide genom düzenleme için başarıyla kullanılmıştır. Ek olarak, ArCas12a, reaksiyon sisteminde hedef olmayan tek zincirli DNA'yı (ssDNA) ayrım gözetmeksizin kesebilen trans-kesme aktivitesi gösterir.
Diğer LbCas12a/AsCas12a ile karşılaştırıldığında, ArCas12a daha yüksek sıcaklık uyumluluğu (25-55) göstermektedir.OC), genom düzenleme ve nükleik asit tespiti uygulamaları için uygun hale getirir.
Özellikler
Geniş reaksiyon sıcaklığı aralığı: 25-55°C sıcaklık aralığında bölünme aktivitesi gösterirOC
Düşük nükleaz kalıntısı: Artık ekzonükleaz, nikaz veya RNaz yok
Cis-ayrılma aktivitesi: Vitro'da Çift Zincirli DNA'nın Son Derece Etkili Kesilmesi
Trans-bölünme aktivitesi: Yüksek trans-kesilme aktivitesi, nükleik asit tespiti için uygundur
Uygulamalar
CRISPR/Cas gen düzenleme
CRISPR/Cas sistemine dayalı tanı ve tespit
İzotermal nükleik asit amplifikasyon teknolojileri (RPA ve LAMP) ile birleştirilmiş diğer tespit uygulamaları vb.
Özellikler
| Kaynak | Cpf1 geni Agathobacter rectalis rekombinant ifade yoluyla ifade edilir E. coli bakterisi |
| Moleküler ağırlık | 149 KDa |
| PAM dizisi | TTTN veya TTTV |
| Tepkime koşulları | 50 mM NaCl, 10 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, pH 7.9 @25OC |
| Konsantrasyon | 10 µM |
| Saflık | >%95 (SDS-SAYFA) |
| İnaktivasyon koşulları | 85OC, 5-10 dk |
Bileşenler
| Bileşenler HAYIR. | İsim | 14702ES65 | 14702ES80 |
| 14702-A | ArCas12a Nükleaz (10 mikronM) | 100 μL | |
| 14702-B | 10×ArCas12a Reaksiyon Tamponu | 1 ml | 1 ml |
Nakliye ve Depolama
Bu ürün -25 ~ -15 derecede saklanmalıdır.OC 2 yıl boyunca.
Rakamlar
Figür 1. ArCas12a cis-kesme aktivitesinin testi: M: İşaretleyici; C: Şablon çift sarmallı DNA (dsDNA)
Not: crRNA'nın rehberliğinde, iki parça (200 bp + 400 bp) üretmek için dsDNA'yı (600 bp) verimli bir şekilde kesebilir.
Figür 2. ArCas12a Trans-bölünme Aktivitesi Test Sonuçları
Not: Hedef olarak dsDNA kullanılarak, ArCas12a, crRNA ve bir ssDNA muhabir probu (floresan bir muhabir grubu içeren) in vitro kesme için eklendi. ArCas12a, crRNA ve hedef DNA ile bir kompleks oluşturduğunda, trans-kesme aktivitesini aktive eder, ssDNA muhabir probunu keser ve böylece floresans yayar.
Belgeler:
Güvenlik Bilgi Formu
14702_Malzeme Güvenlik Bilgi Formu_Sürüm EN20241205.pdf
Kılavuzlar
Ödeme ve Güvenlik
Ödeme bilgileriniz güvenli bir şekilde işlenir. Kredi kartı ayrıntılarını saklamıyoruz veya kredi kartı bilgilerinize erişimimiz yok.
Sorgu
Ayrıca sevebilirsiniz
SSS
Ürün yalnızca araştırma amaçlıdır ve insanlarda veya hayvanlarda terapötik veya teşhis amaçlı kullanım için tasarlanmamıştır. Ürünler ve içerikler, Yeasen Biotechnology'nin sahip olduğu patentler, ticari markalar ve telif haklarıyla korunmaktadır. Ticari marka sembolleri, tüm bölgelerde tescilli olmayıp, menşe ülkesini gösterir.
Bazı uygulamalar üçüncü tarafların ek fikri mülkiyet haklarına ihtiyaç duyabilir.
Yeasen, araştırmalarımızın güvenlik ve etik standartları sağlarken kritik soruları ele alması gerektiğine inanarak etik bilime kendini adamıştır.