Tanım
AapCas12b nükleazı (C2c1 olarak da bilinir), termofilik bakteriden türetilen tracrRNA:crRNA (veya sgRNA) tarafından aracılık edilen bir DNA endonükleazıdır. Alisiklobasil asidofilus. Hedef çift sarmallı DNA'da (dsDNA) bir PAM (TTN) dizisinin varlığında, hedef dsDNA'yı özel olarak keser, çift sarmallı kırılmalara neden olur ve yapışkan uçlar oluşturur. AapCas12b, PAM dizisinden bağımsız olarak tek sarmallı DNA hedeflerini özel olarak kesebilir. Hem çift sarmallı hem de tek sarmallı DNA hedefleri, AapCas12b'nin trans-kesme aktivitesini aktive edebilir. AapCas12b enzimi, sgRNA ve hedef DNA ile üçlü bir kompleks oluşturduğunda, sistemdeki herhangi bir ssDNA dizisini keserek, spesifik olmayan ssDNA trans-kesme aktivitesi için aktive olur. AapCas12b için optimum kesme reaksiyonu sıcaklığı 60OCBu da onu AacCas12b'den daha ısıya dayanıklı hale getirir ve izotermal amplifikasyon/CRISPR-Cas algılama sistemleri geliştirmek için LAMP ile birlikte kullanılmaya daha uygundur.
Özellikler
Geniş reaksiyon sıcaklığı aralığı: 37°C sıcaklık aralığında bölünme aktivitesi gösterir~65OC
Düşük nükleaz kalıntısı: Artık ekzonükleaz, nikaz veya RNaz yok
Cis-ayrılma aktivitesi: Vitro'da Çift Zincirli DNA'nın Son Derece Etkili Kesilmesi
Trans-bölünme aktivitesi: Yüksek trans-kesilme aktivitesi, nükleik asit tespiti için uygundur
Uygulamalar
CRISPR/Cas gen düzenleme
CRISPR/Cas sistemine dayalı tanı ve tespit
İzotermal nükleik asit amplifikasyon teknolojileri (RPA ve LAMP) ile birleştirilmiş diğer tespit uygulamaları vb.
Özellikler
| Moleküler ağırlık | 130 KDa |
| Konsantrasyon | 10 µM |
| Saflık | >%95 (SDS-SAYFA) |
| Birim Tanımı | 60 μg'de 1 dakika içinde 1 pmol ssDNA probunu kesmek için gereken Cas12b enzim miktarıOC toplam 20 reaksiyon hacminde μL, 1 içeren×reaksiyon tamponu, 1 U olarak tanımlanır |
Bileşenler
| Bileşenler HAYIR. | İsim | 14808ES65 | 14808ES80 |
| 14808-A | AapCas12b Nükleaz (10 mikronM) | 100 μL | |
| 14808-B | 10×Reaksiyon tamponu | 1 ml | 1 ml |
Gemiping ve Depolama
Bu ürün -25 ~ -15 derecede saklanmalıdır.OC 2 yıl boyunca.
Rakamlar
Figür 1. AapCas12b Nükleazının Cis-kesme Aktivitesinin Doğrulanması
Not: 20'de μPAM dizisi, sgRNA, Cas12b ve 1 içeren Hedef dsDNA'yı içeren L reaksiyon sistemi×reaksiyon tamponu, karışım 60 °C'de inkübe edildiOC 30 dakika boyunca ve ardından 85'te devre dışı bırakıldıOC 5 dakika boyunca. Agaroz jel elektroforezi sonuçları, üç parti AapCas12b Nükleazının dsDNA'yı etkili bir şekilde kesebildiğini ve kesme verimliliğinin ithal marka T* ile karşılaştırılabilir olduğunu gösterdi.
Figür 2. AapCas12b Nükleaz Trans-kesme Aktivitesi Test Sonuçları
Not: 20'de μPAM dizisi, sgRNA, Cas12b, Rapor ssDNA floresan probu ve 1 içeren Hedef dsDNA içeren L reaksiyon sistemi×reaksiyon tamponu, karışım 60 °C'de inkübe edildiOC 1 saat boyunca ve floresan sinyali her 30 saniyede bir toplandı. Sonuçlar, Hedef DNA, sgRNA ve Cas12b'nin birlikte varlığında, Report ssDNA floresan probunun kesilebileceğini ve böylece floresan sinyalinin serbest bırakılabileceğini gösterdi.
Belgeler:
Güvenlik Bilgi Formu
14808_Malzeme Güvenlik Bilgi Formu_Sürüm EN20241209.pdf
Kılavuzlar
Ödeme ve Güvenlik
Ödeme bilgileriniz güvenli bir şekilde işlenir. Kredi kartı ayrıntılarını saklamıyoruz veya kredi kartı bilgilerinize erişimimiz yok.
Sorgu
Ayrıca sevebilirsiniz
SSS
Ürün yalnızca araştırma amaçlıdır ve insanlarda veya hayvanlarda terapötik veya teşhis amaçlı kullanım için tasarlanmamıştır. Ürünler ve içerikler, Yeasen Biotechnology'nin sahip olduğu patentler, ticari markalar ve telif haklarıyla korunmaktadır. Ticari marka sembolleri, tüm bölgelerde tescilli olmayıp, menşe ülkesini gösterir.
Bazı uygulamalar üçüncü tarafların ek fikri mülkiyet haklarına ihtiyaç duyabilir.
Yeasen, araştırmalarımızın güvenlik ve etik standartları sağlarken kritik soruları ele alması gerektiğine inanarak etik bilime kendini adamıştır.