Tanım
HifairT.M. Lyo-Hazır BEN Multiplex Tek Adımlı RT-qPCR Kiti（UDG artı) şablon olarak RNA'ya dayalı bir multipleks kantitatif PCR kitidir. Deney sürecinde ters transkripsiyon ve kantitatif PCR aynı tüpte gerçekleştirildi, bu da deneysel işlemi basitleştirdi ve kontaminasyon riskini azalttı.The Benzersiz Tampon ve enzim tasarımı, tek adımlı RT-qPCR liyofilize reaksiyon sistemlerinin hazırlanmasında ve ürün tasarımında kullanılabilmesini sağlar.
Bu kitte, ilk iplik cDNA'sı ısıya dayanıklı Hifair ile verimli bir şekilde sentezlendiT.M. Ters Transkriptaz ve Unicon tarafından kantitatif olarak çoğaltıldıT.M. HotStart Taq DNA Polimerazı. Kit esas olarak optimize edilmiş benyofilize edilebilir tampon, enzim karışımı vb. Ek olarak, spesifik olmayan PCR amplifikasyonunu etkili bir şekilde inhibe edebilen ve çoklu qPCR reaksiyonlarının amplifikasyon verimliliğini artırabilen faktörler eklenir, bu da amplifikasyon verimliliğini sağlayabilir ve çoklu amplifikasyon reaksiyonlarını gerçekleştirebilir.
Bu kit şunlarla donatılmıştır: benyoprotektan liyofilizasyon için kullanılabilen.
Özellikler
| Bileşenler No. | 16645Türkçe60 / 16645Türkçe80 / 16645ES92 |
| Boyut | 100 T / 1000 T / 10000 Ton |
Bileşenler
| İsim | 16645ES60 (100T) | 16645ES80 (1.000T) | 16645ES92 (10.000T) | |
| 16645-A | 4×HifairT.M. Lyo-Tampon | 600 μL | 6 ml | 60 ml |
| 16645-B | HifairT.M. Lyo-Enzim Karışımı | 100 μL | 1 ml | 10 ml |
| 16645-C | Liyoprotektan | 800 μL | 8 ml | 80 ml |
Depolamak
The ürün -25℃ ~ -15℃'de 1 yıl saklanmalıdır. Tekrar tekrar dondurulup çözülmemelidir.
Talimatlar
1. Reaksiyon Kompozisyonu:
| Bileşenler | Hacim ((milimetre) | Son Konsantrasyon |
| 4×HifairT.M. Lyo-Tampon | 6 | 1× |
| HifairT.M. Lyo-Enzim Karışımı | 1 | - |
| Liyoprotektan | 8 | - |
| Primer Karışımı (10 μM) | 1 | |
| Prob Karışımı (10 μM) | 0,5 | 0,05-0,5 μM |
| Şablon RNA | 5 | - |
| DEPC H2O | 25'e kadar | - |
Not：Kullanmadan önce iyice karıştırdığınızdan emin olun, şiddetli titreşimlerden kaynaklanan aşırı kabarcıklardan kaçının.
2. Optimize Edilmiş Döngü Protokolü
(1) Standart amplifikasyon prosedürü
| Tepki aşaması | Sıcaklık | Zaman | Döngü | |
| 1 | Ters transkripsiyon | 50°CA | 1 | |
| 2 | İlk denatürasyon | 95°C | 5 dakika | 1 |
| 3 | Amplifikasyon reaksiyonu | 95°C |
| 45 döngü |
| 60°CB | 30 saniyeC |
(2) Hızlı amplifikasyon programı
|
| Tepki aşaması | Sıcaklık | Zaman | Döngü |
| 1 | Ters transkripsiyon | 50°CA | 2 dakika | 1 |
| 2 | İlk denatürasyon | 95°C | 2 saniye | 1 |
| 3 | Amplifikasyon reaksiyonu | 95°C |
| 45 döngü |
| 60°CB | 13 saniyeC |
Not:
a) Ters transkripsiyon: Sıcaklık 42°C veya 50°C'yi seçebilir 10-15 dakika boyunca.
b) Amplifikasyon reaksiyonu: Tasarlanan primerlerin Tm değerine göre sıcaklık ayarlanır.
c) Floresan sinyal edinimi: Deneysel prosedürü cihaz kılavuzunun gerekliliklerine göre ayarlayın.
3. Başvuru teçhizat
Rox ile ekipman：ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Hızlı, StepOne™, StepOne Plus™
Düşük Rox'lu Ekipmanlar：ABI 7500, 7500 Hızlı, ViiA™7, QuantStudio™ 3 ve 5, QuantStudio™ 6,7,12k Esnek
Stratagene MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™
Rox'suz ekipman：
Biyo-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon® 2, Chromo4™
Ependorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s; Qiagen Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000
Roche Uygulamalı Bilim LightCycler® 480, LightCycler® 2.0, Lightcycler® 96
Termo Bilimsel PikoReal Döngüleyici; Sefeid AkıllıBisiklet®; Aydınlanma Eko qPCR
Notlar
Sağlığınızı ve güvenliğinizi sağlamak için lütfen laboratuvar önlüğü ve eldiven gibi gerekli KKD'yi giyin！
Lütfen RNasefree sarf malzemelerini kullanın için deney.
Bu ürün içindir araştırma sadece kullan！
Liyofilizasyon prosedürü
Bu kit doğrudan liyofilizasyon için kullanılabilir veya bu temelde farklı primerler için yardımcı maddeleri daha fazla araştırabilirsiniz.Bu reaktifin standart liyofilizasyon prosedürü aşağıdaki gibidir:
| İşlem | sıcaklık | zaman ayarla | süre | Vakum mbar |
| ön liyofilizasyon | -45℃ | 10 dk | 60 dk | —— |
| İlk dondurarak kurutma aşaması | -45 ℃ | 10dk | 60dk | 0,01mbar |
| -40 ℃ | 10dk | 900dakika | 0,01mbar | |
| -35 ℃ | 10dk | 60dk | 0,01mbar | |
| -30 ℃ | 20dk | 60dk | 0,01mbar | |
| -20 ℃ | 20dk | 60dk | 0,01mbar | |
| 0 ℃ | 20dk | 60dk | 0.01mbar | |
| basınç oluşturma testi | ||||
| Analitik kurutma aşaması | 5 ℃ | 10dk | 20dk | 0,01mbar |
| 10 ℃ | 10dk | 20dk | 0,01mbar | |
| 15 ℃ | 10dk | 20dk | 0,01mbar | |
| 20 ℃ | 10dk | 20dk | 0,01mbar | |
| 25 ℃ | 10dk | 240dk | 0,01mbar | |
| basınç oluşturma testi | ||||
Ödeme ve Güvenlik
Ödeme bilgileriniz güvenli bir şekilde işlenir. Kredi kartı ayrıntılarını saklamıyoruz veya kredi kartı bilgilerinize erişimimiz yok.
Sorgu
Ayrıca sevebilirsiniz
SSS
Ürün yalnızca araştırma amaçlıdır ve insanlarda veya hayvanlarda terapötik veya teşhis amaçlı kullanım için tasarlanmamıştır. Ürünler ve içerikler, Yeasen Biotechnology'nin sahip olduğu patentler, ticari markalar ve telif haklarıyla korunmaktadır. Ticari marka sembolleri, tüm bölgelerde tescilli olmayıp, menşe ülkesini gösterir.
Bazı uygulamalar üçüncü tarafların ek fikri mülkiyet haklarına ihtiyaç duyabilir.
Yeasen, araştırmalarımızın güvenlik ve etik standartları sağlarken kritik soruları ele alması gerektiğine inanarak etik bilime kendini adamıştır.