Tanım
Hifair™ Superior Universal Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus), şablon olarak RNA'ya dayalı bir multipleks kantitatif PCR kitidir. Deney sürecinde, ters transkripsiyon ve kantitatif PCR aynı tüpte gerçekleştirildi, bu da deneysel işlemi basitleştirdi ve kontaminasyon riskini azalttı.
Bu kitte, ilk iplik cDNA'sı ısıya dayanıklı Hifair™ ile verimli bir şekilde sentezlendi Ters Transkriptaz ve UNICON™ tarafından kantitatif olarak çoğaltıldı HotStart Taq DNA Polimerazı. Kit esas olarak optimize edilmiş MP tamponu, enzim karışımı içerir. Tampon çözeltisi zaten Mg içerir2+ ve dNTP Karışımı. Ek olarak, spesifik olmayan PCR amplifikasyonunu etkili bir şekilde engelleyebilen ve çoklu qPCR reaksiyonlarının amplifikasyon verimliliğini artırabilen faktörler eklenir, bu da amplifikasyon verimliliğini garanti edebilir ve çoklu amplifikasyon reaksiyonlarına kadar gerçekleştirilebilir. Aerosol kontaminasyonu riskini etkili bir şekilde önlemek için dUTP/UDG sistemi eklendi.
Özellik
Özellikler
1. Gçok yönlülük: Patojenik mikroorganizmaların, insan genomlarının, bitkilerin ve diğer türlerin nükleik asitlerinin qPCR amplifikasyonu ve tespiti için uygundur.
2. Yüksek hassasiyet: Dikkatlice optimize edilmiş tampon sistemi, düşük konsantrasyonlu şablonların tespit hassasiyetini 250 kopya/mL'ye kadar artırır.
3. dUP/UDG sistemi: dUTP/Isıya duyarlı UDG kirlilik önleme sistemi, ürünlerin aerosol kirliliğini etkili bir şekilde azaltmak, yanlış pozitifleri azaltmak ve otantik sonuçları garantilemek için tanıtıldı.
4. Destekinmek hızlı program: 40 dakikalık hızlı programla uyumlu.
5. Süper stabilite: istikrarlıve 37℃'de 14 gün boyunca bekletildi, 10 kez dondurulup çözüldü.
Özellikler
| Bileşenler No. | 16901Türkçe60 / 16901Türkçe80 / 16901ES92 |
| Boyut | 100 T / 1000 T / 10000 Ton |
Bileşenler
| İsim | 16901ES60 (100T) | 16901ES80 (1.000T) | 16901ES92 (10.000T) | |
| 16901-A | 500 μL | 5 ml | 50 ml | |
| 16901-B | Hifair™ Enzim Karışımı | 100 μL | 1 ml | 10 ml |
Not: 1) 5×Hifair™ MP Buffer, Hifair™'in kısaltmasıdır dNTP'ler, dUTP, Mg içeren Superior Multiplex One Step RT-qPCR Prob Tamponu2+, dengeleyiciler ve daha fazlası.
2) Hifair™ Enzim Karışımı esas olarak içerir Hifair™ ters transkriptaz, UNICON™ HotStart Taq DNA polimerleri, RNase inhibitörü, Ve UDGase vb.
Depolamak
Ürün -25℃ ~ -15℃'de 1 yıl saklanmalıdır. Tekrar tekrar dondurulup çözülmemelidir.
Talimatlar
| Hacim ((milimetre) | Son Konsantrasyon | |
| 5×Hifair™ MP Arabellek | 5 | 1× |
| Hifair™ Enzim Karışımı | 1 | - |
| Primer Karışımı (10 μM) | Her biri 0,4 | 0,16 μM |
| Prob Karışımı (10 μM) | Her biri 0.2 | 0.08 μM |
| 1-5 | - | |
| RNaz Serbest H2O | 25'e kadar | - |
1. Reaksiyon Kompozisyonu:
Not：Kullanmadan önce iyice karıştırdığınızdan emin olun, şiddetli titreşimlerden kaynaklanan aşırı kabarcıklardan kaçının.
A) Primer konsantrasyonu: Astar multipleks primer içeren karışım, Duruma bağlı olarak optimum primer konsantrasyonu 0,1 ile 1,0 μM arasında olabilir.
B) Prob konsantrasyonu: Multipleks prob etiketleme farkı floresan grubunu içeren prob karışımı, duruma bağlı olarak optimum prob konsantrasyonu 0,05 ile 0,05 arasında olabilir.5 μM.
C) Şablon seyreltmesi: qPCR oldukça hassastır ve şablonun seyreltilmesi önerilir. Kontrol Ct değeri 20 ile 35 arasında uygundur.
D) Sistem hazırlığı: Filtre elemanlı un başlığı. Çapraz kontaminasyon ve aerosol kontaminasyonundan kaçının.
2. Optimize Edilmiş Döngü Protokolü
(1) Standart amplifikasyon prosedürü
| Tepki aşaması | Sıcaklık | Zaman | Döngü | |
| 1 | Ters transkripsiyon | 50°CA | 1 | |
| 2 | İlk denatürasyon | 95°C | 5 dakika | 1 |
| 3 | Amplifikasyon reaksiyonu | 95°C | 15 saniye | 45 döngü |
| 60°CB | 30 saniyeC |
Not：
a) Ters transkripsiyon: Sıcaklık seçilebilir 50°C veya 55°C 10-15 dakika boyunca.
b) Amplifikasyon reaksiyonu: Tasarlanan primerlerin Tm değerine göre sıcaklık ayarlanır.
c) Floresan sinyal edinimi: Lütfen deneysel prosedürü, aşağıdaki gereksinimlere göre ayarlayın: enstrüman manuel.
(2) Hızlı amplifikasyon programı
|
| Tepki aşaması | Sıcaklık | Zaman | Döngü |
| 1 | Ters transkripsiyon | 50°C | 5 dakika | 1 |
| 2 | İlk denatürasyon | 95°C | 30 saniye | 1 |
| 3 | Amplifikasyon reaksiyonu | 95°C | 5 saniye | 45 döngü |
| 60°C | 20 saniye |
Not：Gerçek qPCR dedektörü hızlı amplifikasyonu destekliyorsa, lütfen onaylamak için bir ön test gerçekleştirin.
3. Uygulama ekipmanı
ABİ 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Hızlı, StepOne™, StepOne Plus™，ABI 7500, 7500 Hızlı, ViiA™7, QuantStudio™ 3 ve 5, QuantStudio™ 6,7,12k Esnek；
Stratejik MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™；
Biyo-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon® 2, Chromo4™；
Ependorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s;
Qiagen Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000；
Roche Uygulamalı Bilim LightCycler® 480, LightCycler® 2.0; Lightcycler® 96；
Termo Bilimsel PikoReal Döngüleyici; Sefeid Akıllı Döngüleyici®; Aydınlanma Eko qPCR; SLAN 96S, 96P.
Notlar
Sağlığınızı ve güvenliğinizi sağlamak için lütfen laboratuvar önlüğü ve eldiven gibi gerekli KKD'yi giyin.！
Lütfen RNasefree sarf malzemelerini kullanın için deney.
Bu ürün içindir araştırma sadece kullan！
Ödeme ve Güvenlik
Ödeme bilgileriniz güvenli bir şekilde işlenir. Kredi kartı ayrıntılarını saklamıyoruz veya kredi kartı bilgilerinize erişimimiz yok.
Sorgu
Ayrıca sevebilirsiniz
SSS
Ürün yalnızca araştırma amaçlıdır ve insanlarda veya hayvanlarda terapötik veya teşhis amaçlı kullanım için tasarlanmamıştır. Ürünler ve içerikler, Yeasen Biotechnology'nin sahip olduğu patentler, ticari markalar ve telif haklarıyla korunmaktadır. Ticari marka sembolleri, tüm bölgelerde tescilli olmayıp, menşe ülkesini gösterir.
Bazı uygulamalar üçüncü tarafların ek fikri mülkiyet haklarına ihtiyaç duyabilir.
Yeasen, araştırmalarımızın güvenlik ve etik standartları sağlarken kritik soruları ele alması gerektiğine inanarak etik bilime kendini adamıştır.