MolSaf^T.M. Manyetik Evrensel Viral DNA / RNA Kiti tam kandan veya hücresiz vücut sıvısı örneklerinden (serum, plazma, beyin omurilik sıvısı, burun/yutak sürüntüsü, alveolar lavaj sıvısı vb.) viral nükleik asidi çıkarmak için uygundur. Bu yöntem, toksik fenol kloroform ekstraksiyonu olmadan, güvenli, toksik olmayan ve hızlı manyetik boncuk saflaştırma teknolojisini benimser. Elde edilen ürünler doğrudan PCR, qPCR, ikinci nesil dizileme ve diğer deneyler için kullanılabilir. Manyetik boncuk yönteminin otomatik ekstraksiyon cihazı ile nükleik asidin yüksek verimli ekstraksiyonu gerçekleştirilebilir.

Ürün Ibilgi

Bileşenler

Botlu Sürüm

Önceden paketlenmiş Vaşınma

Depolamak

Bölüm I: Oda sıcaklığında saklayınız, oda sıcaklığında taşıyınız, raf ömrü 1 yıldır.

Bölüm II: Bileşen 18521-G (Proteaz K) için 2~8℃'de saklayın, oda sıcaklığında taşıyın.

Notlar

1.Bu kitteki çeşitli tamponlar guanidinyum tuzları içerir. Güvenliğiniz ve sağlığınız için lütfen bir laboratuvar önlüğü giyin

ve çalışırken tek kullanımlık eldivenler kullanın. Cilt, gözler ve mukoza zarlarıyla teması önlemek için standart güvenlik önlemlerine göre kullanın. Temas halinde, derhal suyla iyice yıkayın ve tıbbi yardım alın.

2.Çözeltide çökelti oluşursa, çökelti oluşana kadar 30°C'lik bir su banyosunda ısıtılmalıdır.

Kullanımdan önce tamamen çözülmelidir.

3．Manyetik boncuk süspansiyonu donmuşsa kullanmayın.

4．Bu kitteki çeşitli tamponlar guanidinyum tuzları içerir. Oksitleyici dezenfektanlarla işlem yapmayın.

sodyum hipoklorit gibi, çünkü bu zehirli gazlar salabilir. Tıbbi atık olarak ele alınmalıdırlar.

5．Elüsyon sırasında, kalıntı manyetik boncuklar olabilir. Örnekleri aspire ederken, solumaktan kaçının

manyetik boncuklar.

Talimatlar

1. Uygulanabilir numune tipleri: tam kan, serum, plazma, beyin-omurilik sıvısı, burun/farenks sürüntüleri,

bronkoalveolar lavaj sıvısı ve diğer örnekler.

2. Örnek saklama ve taşıma: Örnekler test için hemen kullanılabilir veya -70°C'de saklanabilir veya

6 aylık raf ömrüyle gelecekteki testler için daha düşük. Tekrarlanan dondurma ve çözme işlemlerinden kaçının. Numuneler soğuk zincir lojistiği kullanılarak taşınmalıdır.

3. Dondurma ve çözme gereksinimleri: Tekrarlanan döngülerden kaçınmak için hızlı dondurma ve hızlı çözme yapın.

İşlem Adımları

Deneylerden önce çözeltide çökelme olup olmadığı ve manyetik boncukların tekrar süspanse edilip edilemeyeceği kontrol edildi.

Manuel Eekstraksiyon

1. 200-300 μL numuneyi 1,5 mL santrifüj tüpüne aktarın, 600 μL lizis bağlayıcı sıvı ekleyin,

20μL proteaz K ve 20μL manyetik boncuk süspansiyonu, ardından yüksek hızda 30 saniye boyunca vorteksleyin. 50°C'de 5-7 dakika çalkalayarak inkübe edin; inkübatörün çalkalama fonksiyonu yoksa, inkübasyon sırasında her biri 15 saniye olmak üzere üç kez vorteksleyin.

2. Çözelti berrak ve şeffaf oluncaya kadar manyetik ayırma için 1,5 mL'lik manyetik standa aktarın, ardından çözeltiyi aspire edin ve atın.

3. 700 μL yıkama solüsyonu A ekleyin, manyetik boncukları dağıtmak için 10 saniye boyunca karıştırın, ardından solüsyon berraklaşana kadar manyetik ayırma için manyetik standa aktarın ve solüsyonu aspire edin ve atın.

4. 700 μL yıkama solüsyonu B ekleyin, manyetik boncukları dağıtmak için 10 saniye boyunca karıştırın, ardından solüsyon berraklaşana kadar manyetik ayırma için manyetik standa aktarın ve solüsyonu aspire edin ve atın.

5. 4. adımı 700 μL daha yıkama solüsyonu B ile tekrarlayın.

6. Tüp duvarındaki damlacıkları toplamak için kısa bir süre santrifüj edin, berraklaşana kadar manyetik standa aktarın, kalan sıvıyı aspire edin ve atın. 3-5 dakika hava ile kurutun.

Not: Etanol kalıntısı sonraki enzimatik reaksiyonları engelleyebilir, bu nedenle kurutma sırasında etanolün tamamen buharlaştığından emin olun. Sonraki elüsyonu etkilememek için çok uzun süre kurutmayın.

7. 50-100 μL elüsyon sıvısı ekleyin, manyetik boncukları dağıtmak için 2-3 dakika yüksek hızda vorteksleyin. 5 dakika 60°C'de inkübe edin, ardından 60 saniye yüksek hızda vorteksleyin.

8. Tüp kapağındaki damlacıkları tüpe toplamak için kısa bir santrifüj yapın, manyetik boncuklar tamamen adsorbe olana kadar manyetik standa aktarın, ardından sıvıyı dikkatlice yeni bir santrifüj tüpüne aktararak nükleik asit çözeltisini elde edin.

9. Nükleik asit çözeltisi kısa süreli -20°C'de, uzun süreli -80°C'de saklanabilir.

Otomatik Eekstraksiyon

Yeasen AP-96N otomatik nükleik asit çıkarma ve saflaştırma cihazı (daha fazla cihaz türü için lütfen teknik destek ile iletişime geçin)

1. Deneyden önce, önceden paketleyin sızdırmazlık membranında sıvı kalıntısı olmaması için kuvvet salınımı ile derin delikli plaka birkaç kez. Çözelti çökelme açısından kontrol edildi ve manyetik boncukların tekrar süspanse edilip edilemeyeceği kontrol edildi.

2. Her 96-kuyulu plakayı sırayla nükleik asit ekstraksiyon cihazına yerleştirin ve 96-derin delikli manyetik çubuk kılıfını yerleştirin.

Pozisyon 1: Bağlayıcı plakayı ayırın

Pozisyon 2: durulama tahtası

Pozisyon 3: yıkama + manyetik boncuk plakası

Pozisyon 4: tabak yıkama

Pozisyon 6: elüsyon plakası

3. Lizis bağlama plakası kuyularına 200-300 µL örnek ve 20 µL proteaz K ekleyin.

4. Aşağıdaki prosedürü çalıştırın. Prosedürden sonra, elüatı elüsyon plakasından yeni bir santrifüj tüpüne aktarın. Çözelti kısa süreli depolama için -20℃'ye ve uzun süreli depolama için -80℃'ye yerleştirilebilir.

AP-96N Kanal Nükleik Asit Ekstraksiyon Cihazı Programı