Poliakrilamid jel (PAGE jel) genellikle protein elektroforezi için protein ayrımını gerçekleştirmek için kullanılır. Bu tür jel genellikle konsantre jel ve ayırma jelinden oluşur. Birincisi protein örneklerini konsantre etme rolünü üstlenirken, ikincisi jelde kullanılan akrilamid monomer ve N,N-metilenbisakrilamid (metilenakrilamid) çapraz bağlayıcı maddenin konsantrasyonuna göre farklı boyutlardaki proteinleri ayırır.

Bu kit, PAGE jelinin hızlı hazırlanması için gereken çeşitli reaktifleri sağlar. Kullanıcıların jel hazırlamak için yalnızca kendi jel hazırlama ekipmanlarını hazırlamaları gerekir; bu da jel hazırlama sürecini büyük ölçüde basitleştirir. Bu kit tarafından hazırlanan jel yalnızca PAGE jel elektroforezini denatüre etmek için kullanılabilir. Bu spesifikasyon yaklaşık 125 adet mini jel hazırlayabilir (0,75 mm kalınlığındaki jel ile hesaplanır).

Özellikler

Bileşenler

Nakliye ve Depolama

Ürün buz torbasıyla birlikte gönderilmekte olup 2 derecede saklanabilir.℃~8℃ 1 yıl boyunca.

Talimatlar: Üst solüsyonun çok geç eklenmesini önlemek için aynı anda çok fazla jel parçasının yapılandırılmaması önerilir (en fazla 2-3 parça önerilir)

1.Hedef proteinin moleküler ağırlığına göre uygun jel konsantrasyonunu seçin (tablo 1'e bakın)

2. Jel yapım süreci (örnek olarak 0,75/1,0/1,5 mm'lik bir Mini jel parçası alın)

2.1 Eşit hacimlerde ayırma jel tamponu ve ayırma jel çözeltisi alın ve karıştırın; yani iki çözeltiden sırasıyla 2,0 / 2,7 / 4,0 mL alın.

2.2 0,1 g amonyum persülfatı tartın ve 1 mL deiyonize suda çözün. Müşterinin amonyum persülfatı kendisi satın alması gerekir.

2.3 1. adımda karıştırılmış çözeltiye 35/45/70 μL APS ekleyin (katılaşma çok hızlı olursa kullanılan APS miktarı yarıya kadar azaltılabilir) ve tamamen karıştırın.

2.4 Adım 2'deki solüsyonu jel yapım cam plakasına enjekte edin. Yoğunlaştırılmış jelin, ayırma jeli eklendikten sonra 2 dakika içinde jel kalıbına enjekte edilmesi gerektiğini ve yoğunlaştırılmış jelin dökülmesinin, yoğunlaştırılmış jel ile ayırma jelinin karışmasını önlemek için yavaş olması gerektiğini unutmayın. Kişi yapılandırmayı zor bulursa, etanol ile kapatıldıktan sonra yoğunlaştırılmış jel yapılandırmak için de uyarlanabilir.

2.5 Konsantre jelin hazırlanması: Eşit hacimlerde konsantre jel tamponu ve konsantre jel çözeltisi alın, yani iki çözeltiden sırasıyla 0,5/0,75/1,0 mL alın ve ardından 10/13/18 μL APS ekleyin ve iyice karıştırın.

2.6 Jel yapıcı cam plakaya enjekte edin ve tarak dişlerini yerleştirin (tarak dişlerini nazikçe yerleştirmek için aşırı güç kullanmayın).

2.7 Konsantre jel 15 dakika katılaştırıldıktan sonra tarak dişleri çıkarılabilir ve elektroforez için kullanılabilir. Not: Lütfen taze hazırlanmış elektroforez tamponu kullanmaya çalışın.

Notlar

1. Elektroforez sırasında voltajın 100-120 V arasında olması önerilir. Elektroforez hızının artırılması gerekirse 150 V'a kadar çıkarılabilir.

2. Jeli doldurmadan önce, jel solüsyonunu oda sıcaklığına dengelediğinizden (örneğin, birkaç dakika bekletin) emin olun; böylece jelde kabarcık oluşumu etkili bir şekilde önlenir.

3. Müşterinin amonyum persülfatı kendisi satın alması gerekir. Sigma'dan Cat#A3678'li ürünü kullanmanızı öneririz.

4. Amonyum persülfat çözeltisinin miktarı yalnızca referans amaçlıdır ve gerçek miktar kişisel deneysel alışkanlıklara ve deneyime göre artırılabilir veya azaltılabilir. Daha fazla amonyum persülfat eklemek jel hızını artırabilir ve bunun tersi de geçerlidir. PAGE jelinin pıhtılaşma oranı sıcaklık ve amonyum persülfat miktarıyla yakından ilişkilidir.

5. Bu ürüne uygun miktarda TEMED ikamesi eklenmiştir. Jel hızını daha da hızlandırmak gerekirse, dağıtımdan önce gerektiği kadar uygun miktarda TEMED eklenebilir.

6. Jel katılaşması ile sıcaklık arasında önemli bir pozitif korelasyon vardır. Aynı koşullar altında, sıcaklık ne kadar yüksekse, katılaşma hızı o kadar hızlıdır.

7.Renk yoğunlaştırılmış jel, depolama sırasında az miktarda çökelti üretebilir, bu normal bir durumdur. Lütfen kullanmaktan çekinmeyin.

8. APS -20 derecede saklandı℃Kolaylık olması açısından, açılmış ve kullanımda olan APS 4℃.

9. Sağlığınızı ve güvenliğinizi sağlamak için lütfen laboratuvar önlüğü ve eldiven gibi gerekli KKD'yi giyin.！

10. Sadece araştırma amaçlıdır!

Tablo 1 Farklı konsantrasyona sahip SDS-PAGE jelinin referans ayırma aralığı

Belgeler:

Güvenlik Bilgi Formu

20324-A-MSDS-CN20250110

20324-B-MSDS-CN20250110

20324-C-MSDS-CN20250110

20324-D-MSDS-CN20250110

Kılavuzlar

20324_Manual_HB230113_TR

Alıntılar ve Referanslar:

[1] Chen X, Zhang D, Su N, ve diğerleri. Parlak ve kararlı floresan RNA'larla canlı hücrelerdeki RNA dinamiklerinin görselleştirilmesi. Nat Biotechnol. 2019;37(11):1287-1293. doi:10.1038/s41587-019-0249-1(IF:31.864)