Escherichia coli'de rekombinant ekspresyon, bazı proteinleri ve plazmid DNA'sını üretmenin nispeten basit ve uygun maliyetli bir yoludur. Escherichia coli kullanılarak ürün üretim süreci sırasında, Escherichia coli'den konak hücre proteinlerinin (HCP'ler) kontaminasyon olasılığı yüksektir, bu da terapötik ilaçların etkinliğini azaltabilir ve olumsuz toksisiteye veya bağışıklık tepkilerine neden olabilir. Bu nedenle, insanlar veya hayvanlar için terapötik ilaçların üretimi ve saflaştırılması sırasında, bu kirliliğin içeriğini mümkün olduğunca en aza indirmek gerekir.

ELISA, HCP'leri tespit etmek için basit, oldukça hassas ve objektif bir yöntemdir. Bu kit, E.coli HCP'nin kalan miktarını tespit etmek için çift antikorlu sandviç enzim bağlı immünoassay (ELISA) deneysel prensibini kullanır. E.coli HCP kalıntılarını tespit etmek için, E.coli HCP standardını ve test edilecek örneği anti-E.coli HCP antikor plakasıyla (36712-A) önceden kaplanmış enzim etiketine ekleyin. Daha sonra seyreltilmiş biyotin etiketli E.coli HCP tespit antikoru (36712-C) ekleyin ve son olarak antikor + antijen + antikor ‐Biotin + SA‐HRP kompleksi oluşturmak için Streptavidin-HRP (SA-HRP) (36712-D) ekleyin. Plakayı yıkadıktan sonra, renk geliştirmek için TMB renk geliştirme solüsyonu (36712-G) ekleyin. TMB, HRP enziminin katalizlemesi altında renksizden maviye dönüştü ve son olarak durdurma solüsyonunun (36712-H) etkisi altında sarıya dönüştü. Sarı tonu, numunede tespit edilen E.coli HCP miktarıyla pozitif olarak ilişkilidir. Bu kit, biyolojik ürünlerin saflaştırma sürecini optimize etmek, ara süreçteki safsızlıkları kontrol etmek ve son ürünlerin salınımını tespit etmek için kullanılabilir.

Bileşenler