(1) S: DNA transfeksiyonu ile siRNA transfeksiyonu arasındaki fark nedir?

A: 1. Sadece 20 baz çifti olduğu için siRNA, binlerce hatta 10.000'den fazla baz çiftine sahip DNA'dan çok daha küçüktür.

2. DNA transfeksiyonunda kullanılan transfeksiyon reaktifleri ve yöntemleri siRNA transfeksiyonu için uygun değildir.

3. siRNA transfeksiyonu, DNA transfeksiyonuna kıyasla transfeksiyon reaktiflerinin sitotoksisitesi konusunda daha sıkı gerekliliklere sahiptir.

(2) S: Transfeksiyondan sonra transfeksiyon reaktifinin değiştirilmesi gerekiyor mu?

A: Ortam değişikliği için iki durum ayırt edilebilir:

1. Transfeksiyondan önce ortam değişimi yapılmamışsa hücre büyümesi için gerekli besin maddelerinin sağlanması amacıyla transfeksiyondan yaklaşık 6 saat sonra ortam değiştirilmelidir;

2. Transfeksiyondan önce değişim varsa Besin maddesi eksikliği varsa, besiyeri her zamanki gibi değiştirilebilir.

(3) S: siRNA ve plazmidin transfekte edilmesinde PEI transfeksiyon reaktifinin etkinliği nedir?

C: Bu PEI transfeksiyon reaktifi özellikle siRNA için geliştirilmiştir ve plazmid transfeksiyonu önerilmemektedir.

(4) S: Transfeksiyon reaktifi dondurulabilir mi?

A: Dondurmayın, çünkü transfeksiyon reaktifi bir PEI katyonik transfeksiyon reaktifidir. Düşük sıcaklıkta dondurmak PEI transfeksiyon reaktifinin aktivitesini yok edecektir. Bu nedenle, en iyi transfeksiyon verimliliğini korumak için 4 derecede saklamak en iyisidir.

(5) S: Transfeksiyon verimliliği nasıl artırılabilir?

A: a: Transfeksiyon anında hücre yoğunluğu %30-%50.

b: Transfeksiyon sırasında siRNA ve lipozom dilüsyonu için Opti-MEM serumsuz besiyeri kullanılmalıdır.

c: Transfeksiyondan 4-6 saat sonra ortam değiştirilebilir.

[1] Zhang Y, Hu R, Xi B, Nie D, Xu H, Liu A. Nöroblastoma Hücrelerinde Kemoterapi ile Tetiklenen Senesansla İlgili NKG2D Ligandlarının Salınımı ve Bağışıklık Sisteminden Kaçışın Mekanizmaları. Front Cell Dev Biol. 2022;10:829404. 2022 Mar 2 tarihinde yayımlandı. doi:10.3389/fcell.2022.829404(IF:6.684)

[2] Cui B, Wang Y, Jin J, ve diğerleri. Resveratrol, Anti-MMP Ekspresyonu ile UVB'nin Neden Olduğu Fotoyaşlanmayı, Anti-İnflamatuvar, Antioksidan ve Antiapoptotik Özelliklerle Tedavi Eder ve VEGF-B Ekspresyonunu Arttırarak Fotoyaşlanmayı Tedavi Eder. Oxid Med Cell Longev. 2022;2022:6037303. 4 Ocak 2022'de yayımlandı. doi:10.1155/2022/6037303(IF:6.543)

[3] Liu Y, Zeng Y, Si HB, Tang L, Xie HQ, Shen B. miR-140-5p'yi Aşırı Eksprese Eden İnsan İdrarından Türetilen Kök Hücrelerden Türetilen Ekzosomlar, Bir Sıçan Modelinde VEGFA'nın Aşağı Düzenlenmesiyle Diz Osteoartritini Hafifletir. Am J Sports Med. 2022;50(4):1088-1105. doi:10.1177/03635465221073991(IF:6.203)

[4] Zhang ZD, Wen B, Li DJ ve diğerleri. AKT serin/treonin kinaz 2 aracılı fascin treonin 403 fosforilasyonu özofageal kanser ilerlemesini düzenler. Int J Biochem Cell Biol. 2022;145:106188. doi:10.1016/j.biocel.2022.106188(IF:5.085)

[5] Tan S, Zhou Y, Zhao H, ve diğerleri. Hipotalamusun kapsamlı transkriptom analizi, domuzlarda cinsiyet gelişimi bozukluklarıyla ilişkili genleri ortaya koyuyor. J Steroid Biochem Mol Biol. 2021;210:105875. doi:10.1016/j.jsbmb.2021.105875(IF:4.294)

[6] Niu M, Yi M, Dong B, Luo S, Wu K. STAT1-CCL5 ekseninin yukarı düzenlenmesi, kolon kanseri biyobelirtecidir ve kolon kanseri hücrelerinin çoğalmasını teşvik eder. Ann Transl Med. 2020;8(15):951. doi:10.21037/atm-20-4428(IF:3.297)