使用葡聚糖硫酸钠(DSS)建立溃疡性结肠炎仔猪模型的方案
肠道通透性增加是 IBD 的病因之一,因此可用作评估小肠和大肠损伤严重程度的生物标志物。D-甘露醇是一种惰性小碳水化合物分子,可沿整个隐窝绒毛轴吸收,用于评估体内肠道通透性[1]。
图 1. 仔猪
1. 模型建立
2. 结果
3. 本资源的链接
4. 建模成功案例
5. 产品订单
6. 使用我们的试剂发表的文章
7. 关注阅读
1. 模型建立
1.1 动物模型
4-5日龄约克夏仔猪
1.2 材料
决策支持系统(
1.3 协议
a)约克夏猪仔单独饲养在金属地板围栏内,地板为橡胶地板,饲养室内有12小时明暗循环控制,室温保持在26℃,并配有取暖灯;
b)每天三次给仔猪喂食商业代乳品配方奶粉,与其自由采食量相似;
c) 通过手术为动物安装胃内导管,导管固定在硅胶贴片(约 8×12 毫米)上,硅胶贴片进一步缝合在胃壁上,插入胃腔内约 30 毫米。每只动物都穿着定制背心,背心带有一个背部口袋,用于临时存放导管的外部部分;
d) 将动物分为阳性对照组(Pos)、阴性对照组(Neg)、实验组(Trp);
e)阳性对照组(Pos):灌注DSS(5天)+生理盐水(5天);阴性对照组(Neg):灌注生理盐水(10天);实验组(Trp):灌注DSS(5天)+治疗药物(5天);
f) DSS剂量:1.25g/kg,口服5天;
g) 在终点时,通过吸入麻醉剂异氟烷对动物进行镇静,并通过心内注射 0.3 ml/kg·体重 (BW) 的乙醇 (戊巴比妥) 来实施安乐死。
h) 立即将结肠组织放入含有 0.1 mM 苯甲基磺酰氟 (PMSF) 的冷盐水溶液 (154 mM, pH7.4) 中冲洗,然后取样进行组织学分析或在液氮中快速冷冻以进行后续分析。
2. 结果
2.1 肠道通透性分析
图2. DSS诱导仔猪体内D-甘露醇浓度高于对照组
DSS诱导仔猪体内D-甘露醇浓度升高,肠道屏障遭到破坏。
2.2 H&E病理染色切片
图3. H&E病理染色切片(A:阴性组;B:阳性组)
通过炎症评分和组织学测量来评估结肠炎症的严重程度。DSS治疗的Pos组隐窝结构破坏,炎性细胞浸润至黏膜及黏膜下层,隐窝脓肿,隐窝炎症。
2.3 炎症因子检测
图4. 炎症因子检测
接受DSS治疗的Pos组两种细胞因子的浓度增加[1]。
3. 本资源的链接
[1]Connie J. Kim 等。营养生物化学杂志 21 (2010) 468–475。
4. 建模成功案例 Yeasen 决策支持系统
表1 DSS不同类型肠炎模型的构建
模型 | 建模示例 | 造型方案 | 建模结果 | 使用评估 |
急性结肠炎 | BALB/c小鼠,雌性,6-8周,25克 | 3%-5% DSS连续7天自由饮用 | 第五天出现 结肠长度缩短,HE染色,炎症明显 | 成型速度快,时间短,符合急性结肠炎模型的特点 |
C57BL/6小鼠,雄性,8周,20克 | 3%-5% DSS管饲,持续给药 | 第 5 天出现,结肠缩短,体重减轻,便血,腹泻 | 发霉率高,持续时间短,符合急性结肠炎模型特点 | |
慢性结肠炎 | C57BL/6小鼠,雄性,8周,22克 | 1-2% DSS 管饲法,持续给药 | Day40出现,结肠缩短,体重下降,便血,腹泻 | 成型率高,符合慢性结肠炎模型特点 |
结肠癌 | C57BL/6小鼠,雄性,8周,21克 | 1%-2% DSS 自由采食 5 天,持续 3 周 | 14周结肠长度缩短,体重减轻,HE染色,炎症明显 | 成型率高,符合结肠癌模型特征 |
5.产品订单
热销产品同等功效仅需M*三分之一的价格,且库存充足。
表 2. 产品订单
产品名称 | 货号 | 尺寸 |
葡聚糖硫酸钠用于模拟结肠炎 分子量:36000~50000 | 60316ES25 | 25克 |
60316ES60 | 100 克 | |
60316ES76 | 500 克 | |
60316ES80 | 1 公斤 |
6. 使用我们的试剂发表的文章
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[3]Li, Y., Dong, J., Xiao, H., Zhang, S., Wang, B., Cui, M., & Fan, S. Gut commensal derived-valeric acid protects against radiation injury. Gut Microbes,.2020 .1–18.IF=10.245
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