使用葡聚糖硫酸钠(DSS)建立溃疡性结肠炎仔猪模型的方案

肠道通透性增加是 IBD 的病因之一,因此可用作评估小肠和大肠损伤严重程度的生物标志物。D-甘露醇是一种惰性小碳水化合物分子,可沿整个隐窝绒毛轴吸收,用于评估体内肠道通透性[1]

Figure 1. Piglet

图 1. 仔猪

1. 模型建立

2. 结果

3. 本资源的链接

4. 建模成功案例 Yeasen 决策支持系统

5. 产品订单

6. 使用我们的试剂发表的文章

7. 关注阅读

1. 模型建立

1.1 动物模型

4-5日龄约克夏仔猪

1.2 材料

决策支持系统(Yeasen#60316ES,男W36000-50000)

1.3 协议

a)约克夏猪仔单独饲养在金属地板围栏内,地板为橡胶地板,饲养室内有12小时明暗循环控制,室温保持在26℃,并配有取暖灯;
b)每天三次给仔猪喂食商业代乳品配方奶粉,与其自由采食量相似;
c) 通过手术为动物安装胃内导管,导管固定在硅胶贴片(约 8×12 毫米)上,硅胶贴片进一步缝合在胃壁上,插入胃腔内约 30 毫米。每只动物都穿着定制背心,背心带有一个背部口袋,用于临时存放导管的外部部分;
d) 将动物分为阳性对照组(Pos)、阴性对照组(Neg)、实验组(Trp);
e)阳性对照组(Pos):灌注DSS(5天)+生理盐水(5天);阴性对照组(Neg):灌注生理盐水(10天);实验组(Trp):灌注DSS(5天)+治疗药物(5天);
f) DSS剂量:1.25g/kg,口服5天;
g) 在终点时,通过吸入麻醉剂异氟烷对动物进行镇静,并通过心内注射 0.3 ml/kg·体重 (BW) 的乙醇 (戊巴比妥) 来实施安乐死。
h) 立即将结肠组织放入含有 0.1 mM 苯甲基磺酰氟 (PMSF) 的冷盐水溶液 (154 mM, pH7.4) 中冲洗,然后取样进行组织学分析或在液氮中快速冷冻以进行后续分析。

2. 结果

2.1 肠道通透性分析

Figure 2. DSS-induced D-mannitol concentration in piglets was higher than that in the control group

图2. DSS诱导仔猪体内D-甘露醇浓度高于对照组

DSS诱导仔猪体内D-甘露醇浓度升高,肠道屏障遭到破坏。

2.2 H&E病理染色切片

Figure 3. H&E pathological staining section (A: Neg group; B: Pos group)

图3. H&E病理染色切片(A:阴性组;B:阳性组)

通过炎症评分和组织学测量来评估结肠炎症的严重程度。DSS治疗的Pos组隐窝结构破坏,炎性细胞浸润至黏膜及黏膜下层,隐窝脓肿,隐窝炎症。

2.3 炎症因子检测

Figure 4. Detection of inflammatory factors

图4. 炎症因子检测

接受DSS治疗的Pos组两种细胞因子的浓度增加[1]

3. 本资源的链接

[1]Connie J. Kim 等。营养生物化学杂志 21 (2010) 468–475。

4. 建模成功案例 Yeasen 决策支持系统

Yeasen 提供高品质 决策支持系统 (Cat#60316ES):纯度(98%),硫含量17-19%,游离硫<0.2%,有大量文献数据支持。

表1 DSS不同类型肠炎模型的构建

模型

建模示例

造型方案

建模结果

使用评估

急性结肠炎

BALB/c小鼠,雌性,6-8周,25克

3%-5% DSS连续7天自由饮用

第五天出现 结肠长度缩短,HE染色,炎症明显

成型速度快,时间短,符合急性结肠炎模型的特点

C57BL/6小鼠,雄性,8周,20克

3%-5% DSS管饲,持续给药

第 5 天出现,结肠缩短,体重减轻,便血,腹泻

发霉率高,持续时间短,符合急性结肠炎模型特点

慢性结肠炎

C57BL/6小鼠,雄性,8周,22克

1-2% DSS 管饲法,持续给药

Day40出现,结肠缩短,体重下降,便血,腹泻

成型率高,符合慢性结肠炎模型特点

结肠癌

C57BL/6小鼠,雄性,8周,21克

1%-2% DSS 自由采食 5 天,持续 3 周

14周结肠长度缩短,体重减轻,HE染色,炎症明显

成型率高,符合结肠癌模型特征

5.产品订单

热销产品同等功效仅需M*三分之一的价格,且库存充足。

表 2. 产品订单

产品名称 货号 尺寸
葡聚糖硫酸钠用于模拟结肠炎 分子量:36000~50000 60316ES25 25克
60316ES60 100 克
60316ES76 500 克
60316ES80 1 公斤

6. 使用我们的试剂发表的文章

[1]赵莉,王飞,蔡正伟,等.注射型黏膜黏附水凝胶改善溃疡性结肠炎药物利用平台[J].化学工程学报.424(2021)130464.IF=16.744
[2]佟灵君,郝海宁,张哲等.牛奶来源的细胞外囊泡通过调节肠道免疫和重塑肠道菌群缓解溃疡性结肠炎[J].治疗诊断学.2021; 11(17): 8570-8586 如果=11.556
[3]Li, Y., Dong, J., Xiao, H., Zhang, S., Wang, B., Cui, M., & Fan, S. Gut commensal derived-valeric acid protects against radiation injury. Gut Microbes,.2020 .1–18.IF=10.245
[4]甘晶晶,刘玉晓,孙玲玉等.口服微流控核苷酸递送颗粒用于炎症性肠病治疗[J].应用材料今日.2021年12月;25:101231 如果=10.041
[5]徐萌萌,孔颖,陈楠楠等.活动性溃疡性结肠炎免疫相关基因特征的鉴定及CeRNA网络的预测[J].免疫学前沿.2022;13:855645。 如果=7.561
[6]JialiDong, YuanLi, HuiwenXiao, et al.口腔微生物群对小鼠结直肠癌放疗疗效及预后的影响[J].Cell reports.2021, 109886.IF=9.423
[7]郝 H,  张 十,  佟 L,  刘 Q 等。植物乳杆菌来自细胞外囊泡的作用 Q7对小鼠肠道菌群及溃疡性结肠炎的影响[J].免疫学前沿.2021.777147 .IF=7.561
[8]范耀华,范艳群,刘昆峰等.燕窝通过恢复Th17/Treg细胞平衡改善C57BL/6J小鼠葡聚糖硫酸钠诱发的溃疡性结肠炎[J].药理学前沿.2021.632602.IF=7.561
[9]黄家荣,王胜特,魏孟宁等.荜茇碱减轻小鼠结肠炎及结肠炎相关结直肠癌[J].药理学前沿.2020.586885. 如果=7.561
[10]Gao X, Fan W, Tan L, et al. 大豆异黄酮通过靶向 ERα/NLRP3 炎症小体通路改善实验性结肠炎[J]. The Journal of Nutritional Biochemistry, 2020, 83.IF=6.048
[11] 幸璐娟,付丽娟,曹松敏,等.牛骨明胶衍生肽对LPS诱发的类风湿性关节炎的抗炎作用W264.7 巨噬细胞与葡聚糖硫酸钠诱导的C57BL/6小鼠[J]. 营养素2022, 14, 1479. 如果=5.717
[12] 王 年代,  黄 J,  谭 堪萨斯州, 等。异甜菊醇钠通过调节代谢谱、巨噬细胞极化和NF-B通路改善葡聚糖硫酸钠诱发的慢性结肠炎[J]。氧化医学与细胞长寿。2022,4636618。 如果=5.076

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