恒温核酸扩增技术根据扩增原理不同可分为很多种,其中最常见、应用最广泛的是2000年由日本学者Notomi等开发的环介导恒温扩增(LAMP)技术,该技术的特点是针对目标基因的6个区域设计4条引物,利用链置换型Bst DNA聚合酶在60~65℃恒温条件下进行扩增反应,可实现109-101015至60分钟内扩增一倍。
Bst DNA聚合酶是LAMP恒温扩增技术的核心酶,具有很强的热稳定性、链置换活性和聚合酶活性,能够在恒温条件下快速、高效、特异性地扩增模板。与PCR需要热变性循环才能扩增不同,整个LAMP实验可以在1小时内完成,无需热变性循环。
产品优势
不含甘油的酶,适合冻干
常温运输,降低成本
强链置换活性,灵敏、稳定
快速补液,操作简便
业绩亮点
01 荧光染料法应用
1、灵敏度高、特异性好
在RT-LAMP荧光染料扩增体系中,冻干粉饼14405ES与液体Bst酶(含甘油及不含甘油)的扩增性能一致,在灵敏度50拷贝/T时均可100%检测出来,特异性较好,在48个NTC(阴性模板对照)孔中未检出。

2、良好的热加速稳定性
在RT-LAMP荧光染料扩增体系中,冻干粉分别经过45℃保存7天、45℃保存15天、室温保存19天的保存处理,热加速后产品性能与液态无甘油Bst酶保持一致,在NTC(Negative Template Control,阴性模板对照)中未观察到峰的出现。
3、支持加速后重新冻结
在RT-LAMP荧光染料扩增体系中,冻干粉分别进行45℃7天和45℃15天的储存处理,热加速处理后的冻干粉再进行第二次冻干(包括单酶和RT-LAMP试剂)。实验表明,经过加速处理和第二次冻干后,产品性能与无甘油Bst酶的液态版本保持一致,在NTC(Negative Template Control)中未见峰。产品稳定性好,支持二次冻干及二次冻干后加速。
02 pH比色法应用
1、灵敏度高、特异性好
在RT-LAMP pH比色扩增体系中,冻干粉饼14405ES的扩增灵敏度可达50拷贝/T(100%检出率),且特异性良好,在24个NTC(阴性模板对照)孔中均未检出。
2、良好的热加速稳定性
在RT-LAMP pH比色放大体系中考察了冻干粉14405ES在45℃下15天的热加速稳定性、加速后二次冻干的稳定性(45℃加速后复水7天)、复水后储存稳定性(复水后-20℃保存7天)。实验表明14405ES产品稳定性好,热加速后对产品性能无影响,支持加速后二次冻干。
特色产品推荐
产品类型 | 产品功能 | 产品名称 | 产品编号 |
RT-LAMP 混合 | 荧光染料 | RT-LAMP 染料 测定 套件(UDG) 加) | 13762ES |
pH 指示剂 | RT-LAMP pH 敏感的 染料 成套工具 | 13906ES | |
可冻干pH指示剂 | RT-LAMP pH 敏感的 染料 显色法 版本 可冷冻干燥 成套工具 | 13920ES | |
Bst 酶 | 甘油 | 希夫 布施 加 脱氧核糖核酸 聚合酶 (40 单位/微升) | 14402ES |
不含甘油 | 冻干 布施 加 脱氧核糖核酸 聚合酶 (60 U/μL,无甘油) | 14405ES | |
缓冲 | 基础缓冲液(不含染料等) | 10× 希夫 布施 加 脱氧核糖核酸 聚合酶 缓冲 | 15441ES |