恒温核酸扩增技术根据扩增原理不同可分为很多种,其中最常见、应用最广泛的是2000年由日本学者Notomi等开发的环介导恒温扩增(LAMP)技术,该技术的特点是针对目标基因的6个区域设计4条引物,利用链置换型Bst DNA聚合酶在60~65℃恒温条件下进行扩增反应,可实现109-101015至60分钟内扩增一倍。

Bst DNA聚合酶是LAMP恒温扩增技术的核心酶,具有很强的热稳定性、链置换活性和聚合酶活性,能够在恒温条件下快速、高效、特异性地扩增模板。与PCR需要热变性循环才能扩增不同,整个LAMP实验可以在1小时内完成,无需热变性循环。

产品优势

不含甘油的酶,适合冻干
常温运输,降低成本
强链置换活性,灵敏、稳定
快速补液,操作简便

业绩亮点

01 荧光染料法应用

1、灵敏度高、特异性好

在RT-LAMP荧光染料扩增体系中,冻干粉饼14405ES与液体Bst酶(含甘油及不含甘油)的扩增性能一致,在灵敏度50拷贝/T时均可100%检测出来,特异性较好,在48个NTC(阴性模板对照)孔中未检出。

2、良好的热加速稳定性

在RT-LAMP荧光染料扩增体系中,冻干粉分别经过45℃保存7天、45℃保存15天、室温保存19天的保存处理,热加速后产品性能与液态无甘油Bst酶保持一致,在NTC(Negative Template Control,阴性模板对照)中未观察到峰的出现。

3、支持加速后重新冻结

在RT-LAMP荧光染料扩增体系中,冻干粉分别进行45℃7天和45℃15天的储存处理,热加速处理后的冻干粉再进行第二次冻干(包括单酶和RT-LAMP试剂)。实验表明,经过加速处理和第二次冻干后,产品性能与无甘油Bst酶的液态版本保持一致,在NTC(Negative Template Control)中未见峰。产品稳定性好,支持二次冻干及二次冻干后加速。

02 pH比色法应用

1、灵敏度高、特异性好

在RT-LAMP pH比色扩增体系中,冻干粉饼14405ES的扩增灵敏度可达50拷贝/T(100%检出率),且特异性良好,在24个NTC(阴性模板对照)孔中均未检出。

2、良好的热加速稳定性

在RT-LAMP pH比色放大体系中考察了冻干粉14405ES在45℃下15天的热加速稳定性、加速后二次冻干的稳定性(45℃加速后复水7天)、复水后储存稳定性(复水后-20℃保存7天)。实验表明14405ES产品稳定性好,热加速后对产品性能无影响,支持加速后二次冻干。

特色产品推荐

产品类型

产品功能

产品名称

产品编号

RT-LAMP 混合

荧光染料

RT-LAMP 染料 测定 套件(UDG) 加)

13762ES

pH 指示剂

RT-LAMP pH 敏感的 染料 成套工具

13906ES

可冻干pH指示剂

RT-LAMP pH 敏感的 染料 显色法 版本 可冷冻干燥 成套工具

13920ES

Bst 酶

甘油

希夫 布施 加 脱氧核糖核酸 聚合酶 (40 单位/微升)

14402ES

不含甘油

冻干 布施 加 脱氧核糖核酸 聚合酶 (60 U/μL,无甘油)

14405ES

缓冲

基础缓冲液(不含染料等)

10× 希夫 布施 加 脱氧核糖核酸 聚合酶 缓冲

15441ES

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