----背景清晰,条带形态稳定,尺寸精确
DNA Marker 是不同分子量的 DNA 片段的组合。其主要用途是在琼脂糖凝胶电泳中与样本 DNA 一起迁移以分离 DNA 分子。通过比较样本条带的大小和亮度与 DNA Marker 的条带,可以粗略估计溶液中样本 DNA 的分子量和浓度。
产品特性
- 稳定性强,常温下可保存3-6个月;
- 背景清晰、条带形态稳定、尺寸精确;
- 含有已知浓度的参考带,方便定位和半定量分析;
- 含有上样缓冲液,可直接电泳,方便快捷;
- 配有5×上样缓冲液,用于上样。
电泳图

注意事项
- 储存方法:室温下稳定储存3至6个月;更长时间,则储存在4°C或-20°C下。
- DNA Marker 适用于分析琼脂糖凝胶电泳中的 DNA 带,不建议用于聚丙烯酰胺凝胶电泳。
- 凝胶浓度及缓冲溶液的选择:
琼脂糖浓度 | 有效分离范围 (bp) | 推荐缓冲液 |
0.5% | 2,000-50,000 | 1×TAE |
0.8% | 800-10,000 | 1×TAE |
1.0% | 400-8,000 | 1×TAE |
1.2% | 300-7,000 | 1×TAE |
1.5% | 200-3,000 | 1×TAE/0.5×TBE |
2.0% | 100-2,000 | 1×TAE/0.5×TBE |
3.0% | 25-1,000 | 0.5×TBE |
【注】:对于大片段,选择低浓度凝胶并使用TAE缓冲体系进行电泳;对于小片段,选择高浓度凝胶并使用TBE缓冲体系进行电泳。
- 核酸染料的选择:
EB(溴化乙锭)是一种高灵敏度的荧光染料,最大激发波长为 302 nm,可用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的核酸。EB 会插入核酸中的碱基,并且具有毒性。
YeaRed(Cat#10202ES76)和YeaGreen(Cat#10204ES76)是新型无毒核酸染料,具有独特的油性分子结构,不能穿透细胞膜进入细胞,不易挥发和升华,因而不会被人体吸入,保证了实验者的安全。Ames试验结果还显示,YeaRed和YeaGreen在凝胶染色浓度下均无致癌性,是高致癌性EB的安全无毒替代品。此外,YeaRed具有与EB相同的光谱特性,因此可以在不改变现有成像系统的情况下完美替代EB。
问答
Q1: 为什么DNA Marker的高分子量条带会拖沓,分离不好?
A1:核酸染料与DNA Marker结合不够充分,由于高分子量条带需要的核酸染料较多,如果染料未饱和,高分子量条带容易发生迁移,导致拖带、分离不好。建议减少DNA Marker用量(可用水稀释5倍后上样8-10μL)或增加核酸染料浓度。
Q2:为什么 DNA 没有条带或条带很弱?
答案2:
- DNA上样量不足,增加上样量;
- DNA 带已从凝胶中流出;
- DNA 带被示踪染料遮蔽;
- 凝胶中未添加核酸染料;
- 琼脂糖凝胶放置时间过长,建议立即制备并使用。
Q3: 为什么DNA Marker带是弥散的?
答案3:
- DNA部分降解,检查储存条件是否过热;
- 电泳时电压过低,导致DNA条带扩散。建议在110V-130V下跑胶 五 超过45分钟;
- 琼脂糖凝胶浓度不合适,按说明书推荐凝胶浓度进行制备;
- 琼脂糖凝胶质量差,建议重新制备琼脂糖凝胶。
问题 4:为什么样本条带与 DNA Marker 条带相比大小不同?
A4:
- DNA迁移不仅与实际大小有关,还与是否与蛋白质结合、离子状态、DNA结构、凝胶等因素有关。核酸的电泳迁移率与DNA/染料的比例有关,当核酸染料的量不足时,会导致较大的迁移率误差;
- 如果样品中含有高浓度的盐离子,也会造成明显的迁移误差;
- 如果上样样本的量与 DNA Marker 带的数量有显著差异或者体积有显著差异,也会导致更大的迁移误差。
订购信息
产品定位 | 产品名称 | 产品编号 | 规格 |
DNA 标记 | GoldBand DL2000 DNA 标记 | 10501ES60/80 | 100 吨/10×100吨 |
GoldBand DL5000 DNA 标记 | 10504ES60/80 | 100 吨/10×100吨 | |
GoldBand 100bp DNA 梯状图 | 10507ES60/80 | 100 吨/10×100吨 | |
GoldBand 1 kb DNA 梯状图 | 10510ES60/80 | 100 吨/10×100吨 |