----背景清晰,条带形态稳定,尺寸精确

DNA Marker 是不同分子量的 DNA 片段的组合。其主要用途是在琼脂糖凝胶电泳中与样本 DNA 一起迁移以分离 DNA 分子。通过比较样本条带的大小和亮度与 DNA Marker 的条带,可以粗略估计溶液中样本 DNA 的分子量和浓度。 Yeasen DNA Marker的分子量范围从100 bp到15 kb,可以满足大多数实验的需求。

产品特性

  1. 稳定性强,常温下可保存3-6个月;
  2. 背景清晰、条带形态稳定、尺寸精确;
  3. 含有已知浓度的参考带,方便定位和半定量分析;
  4. 含有上样缓冲液,可直接电泳,方便快捷;
  5. 配有5×上样缓冲液,用于上样。

电泳图

注意事项

  1. 储存方法:室温下稳定储存3至6个月;更长时间,则储存在4°C或-20°C下。
  2. DNA Marker 适用于分析琼脂糖凝胶电泳中的 DNA 带,不建议用于聚丙烯酰胺凝胶电泳。
  3. 凝胶浓度及缓冲溶液的选择:

琼脂糖浓度

有效分离范围 (bp)

推荐缓冲液

0.5%

2,000-50,000

1×TAE

0.8%

800-10,000

1×TAE

1.0%

400-8,000

1×TAE

1.2%

300-7,000

1×TAE

1.5%

200-3,000

1×TAE/0.5×TBE

2.0%

100-2,000

1×TAE/0.5×TBE

3.0%

25-1,000

0.5×TBE

【注】:对于大片段,选择低浓度凝胶并使用TAE缓冲体系进行电泳;对于小片段,选择高浓度凝胶并使用TBE缓冲体系进行电泳。

  1. 核酸染料的选择:

EB(溴化乙锭)是一种高灵敏度的荧光染料,最大激发波长为 302 nm,可用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的核酸。EB 会插入核酸中的碱基,并且具有毒性。

YeaRed(Cat#10202ES76)和YeaGreen(Cat#10204ES76)是新型无毒核酸染料,具有独特的油性分子结构,不能穿透细胞膜进入细胞,不易挥发和升华,因而不会被人体吸入,保证了实验者的安全。Ames试验结果还显示,YeaRed和YeaGreen在凝胶染色浓度下均无致癌性,是高致癌性EB的安全无毒替代品。此外,YeaRed具有与EB相同的光谱特性,因此可以在不改变现有成像系统的情况下完美替代EB。

问答

Q1: 为什么DNA Marker的高分子量条带会拖沓,分离不好?

A1:核酸染料与DNA Marker结合不够充分,由于高分子量条带需要的核酸染料较多,如果染料未饱和,高分子量条带容易发生迁移,导致拖带、分离不好。建议减少DNA Marker用量(可用水稀释5倍后上样8-10μL)或增加核酸染料浓度。

Q2:为什么 DNA 没有条带或条带很弱?

答案2:

  1. DNA上样量不足,增加上样量;
  2. DNA 带已从凝胶中流出;
  3. DNA 带被示踪染料遮蔽;
  4. 凝胶中未添加核酸染料;
  5. 琼脂糖凝胶放置时间过长,建议立即制备并使用。

Q3: 为什么DNA Marker带是弥散的?

答案3:

  1. DNA部分降解,检查储存条件是否过热;
  2. 电泳时电压过低,导致DNA条带扩散。建议在110V-130V下跑胶 五 超过45分钟;
  3. 琼脂糖凝胶浓度不合适,按说明书推荐凝胶浓度进行制备;
  4. 琼脂糖凝胶质量差,建议重新制备琼脂糖凝胶。

问题 4:为什么样本条带与 DNA Marker 条带相比大小不同?

A4:

  1. DNA迁移不仅与实际大小有关,还与是否与蛋白质结合、离子状态、DNA结构、凝胶等因素有关。核酸的电泳迁移率与DNA/染料的比例有关,当核酸染料的量不足时,会导致较大的迁移率误差;
  2. 如果样品中含有高浓度的盐离子,也会造成明显的迁移误差;
  3. 如果上样样本的量与 DNA Marker 带的数量有显著差异或者体积有显著差异,也会导致更大的迁移误差。

订购信息

产品定位

产品名称

产品编号

规格

DNA 标记

GoldBand DL2000 DNA 标记

10501ES60/80

100 吨/10×100吨

GoldBand DL5000 DNA 标记

10504ES60/80

100 吨/10×100吨

GoldBand 100bp DNA 梯状图

10507ES60/80

100 吨/10×100吨

GoldBand 1 kb DNA 梯状图

10510ES60/80

100 吨/10×100吨

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