蛋白质电泳是一种蛋白质分析技术。蛋白质在缓冲液中带负电或正电，在电场作用下向阳极移动，称为电泳。不同的蛋白质分子具有不同的电泳迁移率。蛋白质电泳中一个很重要的环节就是凝胶的制备。常规的凝胶制备往往需要几个小时的时间，而且还存在漏液、凝胶不均匀、产生气泡等问题。除了制备麻烦外，原料试剂也会有一定的毒性，对点胶人员的身体造成危害，而预制胶的出现可以解决这些烦恼。那么蛋白质电泳的基本原理是什么，预制胶的作用和原理又是什么呢？

1.蛋白质电泳的基本原理是什么？
2、预制胶的作用及原理是什么？
3. 提供的预制胶介绍 Yeasen
4. 常见问题
5. 产品详情

1.蛋白质电泳的基本原理是什么？

大多数生物大分子，如蛋白质、核酸等，都带有阳离子和阴离子基团，称为两性离子。将粒子分散在溶液中，以淀粉凝胶、琼脂或琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等为支持介质的区带电泳法称为凝胶电泳法。聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺凝胶为支持物的电泳法。认为控制聚丙烯酰胺凝胶的孔径大小进行聚合，通过类似分子筛的作用将蛋白质分离。

蛋白质电泳包括两种形式，天然聚丙烯酰胺凝胶电泳（Native-PAGE）和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）。Native-PAGE在电泳过程中保持蛋白质完整，并根据其分子量、形状和伴随电荷进行梯度分离。而SDS-PAGE则根据其亚基的分子量来分离蛋白质。SDS是一种阴离子去垢剂，作为变性剂和增溶剂，可以打断分子内和分子间的氢键，使分子折叠，破坏蛋白质分子的二级和三级结构。巯基乙醇、二硫苏糖醇作为强还原剂，可以打断半胱氨酸残基之间的二硫键。在样品和凝胶中加入还原剂和SDS后，分子解聚为多肽链，解聚的氨基酸侧链与SDS结合成蛋白质-SDS胶束。蛋白质-SDS胶束所带的负电荷超过蛋白质原有的电荷，消除了不同分子之间的电荷差异和结构差异，蛋白质的迁移率仅取决于蛋白质的分子量，通过与已知分子量的标准相比较即可测定蛋白质的分子量。

2、预制胶的作用及原理是什么？

与传统手工凝胶相比，预制蛋白凝胶 可避免接触大量有毒试剂，节省大量时间，有效解决手灌凝胶差异大的问题。

该凝胶由两层不同的胶层组成，上层为浓缩胶，下层为分离胶。浓缩胶又称浓缩胶。凝胶浓度较小，孔径较大，样品加入浓缩胶中，通过大孔径凝胶的迁移，浓缩在一个狭窄的区域。分离胶又称电泳胶，通常孔径较小，选择合适的凝胶浓度可以使样品成分得到很好的分离。

分离胶可分为固定胶和梯度胶，聚丙烯酰胺的浓度分别为8%、10%、12%、15%、4%～12%、4%～20%。前四种为固定浓度的预制胶，后两种为梯度胶。浓度代表分离蛋白质分子量的范围。凝胶梯度是用梯度搅拌器形成的，在玻璃板上加入高浓度的丙烯酰胺溶液，然后溶液浓度呈梯度减小，凝胶孔径上部较大，下部较小。固定胶只能在其分离范围内分离蛋白质，不能过大也不能过小。梯度胶没有这个限制，大分子分离在上部，小分子分离在下部。由于梯度胶的孔径逐渐变小，对蛋白质无法穿透的孔径附近的蛋白质有浓缩作用，所以电泳后会形成一个很窄的区域。分子量差异较小的蛋白质通常无法在固定凝胶上分离，但可以在梯度凝胶上分离。

3. 提供的预制胶介绍 Yeasen

Yeasen 预制蛋白加凝胶 包含 梯度浓度和固定浓度，多种不同浓度可满足不同蛋白电泳的需要，采用独特的凝胶制备工艺，电泳效果优异，与市面上各类电泳槽兼容（Bio-RAD、Tanon、Life等），具有适应性广、分辨率高、稳定性高、条带清晰均匀等优点。

3.1 Yeasen 预制蛋白加凝胶 升级为塑料板，品质更好！

使用方便：即用；撕掉塑料板底部的胶带

适用范围广：兼容变性蛋白质和天然蛋白质

清晰频段： 塑料板经过特殊处理，大大减少了蛋白质的吸附

节省时间： 实验最快18分钟即可完成

质量保证： 严格的批次间稳定性保证

保质期长：可在4℃保存 12个月

3.2 以下参数可帮助您选择合适的凝胶系列

电泳缓冲体系： 变性蛋白电泳缓冲液或天然蛋白电泳缓冲液

孔数及上样量：10或15孔，最大上样量分别为70 μL和40 μL

凝胶浓度：8%、10%、12%、15%、4%-12%、4%-20%

表 1.凝胶浓度和线性分离范围

3.3 数据显示

图1 数据显示

图2 数据显示

4. 常见问题

问题 1：预制件必须 凝胶 4℃下放置？室温下放置一段时间有关系吗？

一个： 建议4℃，可保存12个月。请勿低于0℃保存，可室温（25℃）保存30天。

Q2：梯度浓度和固定浓度如何选择？预制柱分离的蛋白质最小分子量是多少？ 凝胶？

答：蛋白质分离粒径大小由预制 凝胶 与其浓度有关，对应的分离范围如上图所示。

固定浓度预制 凝胶 具有较好的分辨率。梯度浓度预制 凝胶 具有更宽的分离范围和更广泛的应用范围；客户 应根据自己的需要选择合适的浓度。

我们的 4%-20% 梯度预制件 凝胶 （Cat#36250、Cat#36256）对低至 3.5kDa 的蛋白质具有很宽的分离范围。

图 3. 梯度预制 凝胶数据

问题 3：预制 凝胶 需要配备你们的专用缓冲器吗？你们能自己制作缓冲器吗？

一个： Yeasen 特殊缓冲液（Cat#36236、Cat#36237）和预制 凝胶适用性更好。请勿与其他缓冲液混合。缓冲液可以通过购买试剂来制备，但客户 需要使用我们的公式，可以在相关的预制件中找到 凝胶说明。

Q4：分离胶如何区分 和浓缩胶？需要分段电压电泳吗？

答：两种成分相同，但是浓度不一样，肉眼无法区分；浓缩胶的高度为1.5cm。

不是，建议在150V下进行电泳，完成实验需要30-40分钟。

Q5：您的预制件 凝胶适合于市场上各种电泳槽吗？

答：Yeasen，我们的预制件 凝胶 适用于市场上各种电泳槽，

Bio-rad Mini-Protean（II/3/Tetra System）和 Tanon VE180（注意密封条的反向组装）；

Life Technology Novex Mini-cell（与特殊挡板配合使用）；

另设凝胶板宽度在10 cm电泳槽内。

5. 产品详情

提供的产品 Yeasen 如下：

表 2.商品详情