随着糖蛋白质组学和抗体药物研究的快速发展，糖基化修饰也备受关注。细胞与细胞、细胞与病原体之间的接触主要通过糖与蛋白质的相互作用完成，而糖基化决定了糖复合物的黏附性质。在IgG中，Fc区Asn297处保守的N连接糖基化对其活性也至关重要。此外，一些抗体还具有额外的N-糖链，它们与Fc区Asn297处的保守位点一起影响抗体的识别、半衰期和免疫应答。
蛋白质糖基化是一种复杂的翻译后修饰，涉及蛋白质特定位点糖链的连接。根据糖链的类型，糖蛋白分为N连接糖蛋白、O连接糖蛋白等；此外，蛋白质糖基化还受宿主细胞类型和发酵条件（如培养基、pH值、温度等）的影响。因此，糖蛋白的糖基化模式通常具有异质性，包括糖基化位点、糖基化程度以及糖链的具体结构，使糖链分析和结构表征工作极具挑战性。为获得最大量的糖链结构信息，糖链分析的主要策略是先从蛋白质中释放出糖链，然后再进行详细的分析和表征。在这一策略中，高效、准确、稳定的去糖基化方法至关重要。
目前，酶法被广泛用于去糖基化。 对于N-连接聚糖，常用的酶包括PNGase F，Endo H，和Endo S。
产品介绍
PNG酶F 是去除几乎所有N-连接 糖蛋白中的寡糖，可切割由天冬酰胺连接的高甘露糖、混合糖、复合糖蛋白，特异性地去除N连接糖链。切割位点为：最内层的N-乙酰葡萄糖胺（GlcNAc）与天冬酰胺残基之间的酰胺键，同时将酶解后蛋白上的天冬酰胺转化为天冬氨酸。
当α1-6岩藻糖位于GlcNAc核心时，PNGase F也能切割；只有当α1-3岩藻糖位于GlcNAc核心（常见于植物和昆虫糖蛋白中）时，PNGase F才无法切割。
我们公司提供 传统的 PNGase F（目录号：20407ES），但常规PNGase F酶促反应需要数小时才能释放抗体的N-糖，且由于偏好性糖释放，去糖基化不完全可能导致结果出现偏差，所得到的糖分布可能不能代表治疗性抗体的正确组成。因此，尽快获得准确的N-糖谱对于抗体及抗体融合蛋白等生物治疗剂生产过程中的糖基化监测至关重要。
快速 PNGase F （编号：20406ES） 是一种优化的重组试剂，可在几分钟内快速彻底地对抗体、免疫球蛋白、融合蛋白和其他糖蛋白进行去糖基化。该酶可快速无偏好地去除所有N-糖，可直接用于下游色谱或质谱分析。
产品特性：
快速地： 几分钟内完成并快速去糖基化。
高纯度： 无蛋白酶、糖苷酶污染，纯度≥95%。
非选择性： 快速且无偏好地去除所有 N-聚糖。
良好的兼容性： 直接用于下游色谱或质谱分析。
远藤 是一种重组糖苷酶，可以裂解N-糖蛋白中的高甘露糖和一些混合型寡糖的壳二糖核心结构，去除糖蛋白中的N-连接的高甘露糖。
我公司目前提供酵母重组表达的Endo H(Cat#20414ES)。
Endo S 是一种高度特异性的糖苷酶，可以裂解野生型 IgG 重链的壳二糖核心结构之间的 N 连接糖。糖苷酶 S 的活性并不严格依赖于肽，因此 X 可以是蛋白质、肽、天冬酰胺或游离寡糖。无论底物上是否存在核心 alpha1-6 岩藻糖或二分 N-乙酰葡萄糖胺，糖苷酶 S 都是活性的。但是，它对三或四天线唾液酸化和脱唾液酸化的寡糖无活性。
我公司目前提供大肠杆菌重组表达的Endo S(Cat#20413ES)。
购买指南
| 产品编号 | 20406ES | 20407ES | 20414ES | 20413ES |
| 产品名称 | ||||
| 来源 | 酵母重组表达 | 酵母重组表达 | 酵母重组表达 | E.大肠杆菌 重组表达 |
| 具体活动 | 不适用 | 10万单位/毫升 | 100万单位/毫升 | 8000单位/毫克 |
| 切割位点 | 几乎所有的 N 连接聚糖 | 几乎所有的 N 连接聚糖 | N-连接高甘露糖聚糖 | 在 IgG 重链的核心二糖结构内进行切割 |
| 消化时间 | 10 分钟 | 1-3小时 | 1-3小时 | 1 小时 |
| 糖基化 | 合适的 | 合适的 | 合适的 | 合适的 |
| 蛋白质结构 | 合适的 | 合适的 | 合适的 | 合适的 |
测试数据
1.快速PNGase F 测试
1：蛋白质标记物Cat#20350ES) 2：竞争物 + 底物或抗体 3：竞争物 + 底物或抗体
4：
2.Endo H 测试
图 2. Endo H 酶切效应 （基材）
3.Endo S 测试
产品信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 |
| 20406ES20/50 | 20吨/50吨 | |
| 20407ES01/02 | 15000 单位 /75000 单位 | |
| 20414ES92/97 | 10000单位 /50000单位 | |
| 20413ES80/90 | 1000单位/5×1000单位 |