背景
转铁蛋白又称转铁蛋白(TRF,Tf),负责运送消化道吸收的铁和红细胞降解释放的铁,以三价铁复合物(Tf-Fe3+)形式进入骨髓,供成熟红细胞生成之用。转铁蛋白主要存在于血浆中,血浆中的转铁蛋白将铁供应至全身大部分组织,而在它无法到达的部位,则由这些组织自身合成的转铁蛋白在局部产生铁的转移。

图 1. 转铁蛋白的结构
人转铁蛋白主要在肝脏中合成,是一种单链糖蛋白,由位于同源N端和C端的两个叶组成,含678个氨基酸残基,等电点5.9,分子量为76kD,每分子转铁蛋白可携带2个三价铁离子(Fe3+). 转铁蛋白与 Fe 的相互作用3+ 取决于 pH。在 pH 7.4 时,转铁蛋白和 Fe3+ 有效结合,在酸性 pH 下两者分离。
存在
全转铁蛋白、部分饱和转铁蛋白、载脂蛋白转铁蛋白
功能机制
转铁蛋白(Tf)通过与其受体转铁蛋白受体1(TfR1)相互作用与铁结合。TfR1是一种表达在细胞表面的糖蛋白,由两个通过二硫键连接的同型二聚体亚基组成。在细胞表面,Tf与Fe3+相互作用形成全Tf,并与TfR1受体结合,在内吞作用下进入内体。在酸性内体环境下,Fe3+与Tf分离,STEAP3将Fe3+还原为Fe2+,通过二价金属离子转运蛋白1(DMT1)转运到细胞质中。然后,释放出Fe3+的Tf与TfR1形成Tf/TfR1复合物,并通过胞吐作用迁移回细胞表面。在细胞表面,转铁蛋白(Tf)与受体TfR1分离成为脱辅基Tf,然后与Fe3+重新结合参与铁循环。整个过程完成后,Tf和TfR1被回收并进入细胞铁吸收的下一个循环。

图2. 转铁蛋白循环机制图[1]
转铁蛋白的主要功能
- 避免自由基的产生,保护细胞生长。
- 抗菌、杀菌、解毒
- 维持细胞增殖和生长
- 促进细胞外铁的储存和运输
转铁蛋白的来源
来源 | 安全 | 批次差异 | |
天然提取的转铁蛋白 | 人类和牛血浆提取物 | 安全性较差,最终产品可能含有病原体 | 转铁蛋白是从不同批次的人血清或牛血清中提取的,其性能差异很大 |
重组转铁蛋白 | 从原核和真核细胞表达 | 安全性好,最终产品不含病原体 | 每批均采用同一细胞系表达,性能稳定 |
产品特性
安全性好: 产品经过多重质量检验和检测,避免了病原体的污染;
低毒性: 细胞毒性很低,对后续实验没有影响;
性能稳定: 每批均由同一细胞系表达,性能差异小,蛋白质纯度高
操作简便: 只需将产品添加到基料中;
广泛适用: 可用于培养不同类型的细胞。
常问问题
Q1:无血清培养基中是否应该添加提取的转铁蛋白或者重组转铁蛋白?
答:提取转铁蛋白存在安全性差、批次间差异大等缺陷,特别是提取转铁蛋白加入无血清培养基进行细胞培养时,可能会将人或动物病原体(如疯牛病病毒、克雅氏病毒等未知病原体)带入细胞,污染细胞。而重组转铁蛋白则完全避免了病原体污染的可能,因此重组转铁蛋白应加入无血清培养基中。
Q2:培养基中应该添加铁饱和(Holo)转铁蛋白还是载脂蛋白(Apo)转铁蛋白?
答:当培养基中不含铁或铁含量较低时,选择添加铁饱和的(Holo)转铁蛋白;当培养基中富含铁时,选择脱辅基转铁蛋白。
Q3:铁饱和(Holo)转铁蛋白和载脂蛋白(Apo)转铁蛋白哪个更好?
答:理论上无法推断两者的效果,需要实验测试。
Q4:无血清培养基中转铁蛋白的浓度是多少?
答:转铁蛋白的浓度和细胞种类有关,具体浓度和细胞状态、细胞浓度、实验目的有关。一般原代细胞:5-100mg/L;中国仓鼠卵巢细胞:10-50mg/L;杂交瘤、Vero细胞:5-20mg/L
订购信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 |
40102ES60/80 | 100 毫克 | |
牛转铁蛋白 (HOLO) | 40103ES60/80 | 100毫克/1克 |
人转铁蛋白(来源于人血浆) | 40133ES60/76/80 | 100 毫克/500 毫克/1 克 |
92288ES60/76/80 | 100 毫克/500 毫克/1 克 | |
92289ES60/76/80 | 100毫克/5 |