يُعد سرطان القولون المرتبط (CAC) ثالث أكثر الأورام الخبيثة شيوعًا في العالم، حيث يأتي في المرتبة الثانية من حيث معدل الإصابة والوفيات بعد سرطان المعدة والكبد[1]يمكن أن يزيد مرض التهاب الأمعاء (IBD) من احتمالية الإصابة بسرطان القولون والمستقيم. وقد اكتسب الجمع بين AOM وDSS شعبيةً واسعةً بفضل إمكانية تكرار نتائجه وفعاليته وانخفاض تكلفته وسهولة استخدامه. تُسلّط هذه المقالة الضوء على بروتوكول لإنشاء نموذج DSS-AOM لدراسة تكوّن الأورام في CACs.
نموذج حيواني
فئران BALB/c (ذكر، عمره 7 أسابيع)
مادة
نظام دعم القرار
تحضير الحلول
مياه الشرب المضاف إليها DSS: استخدم الماء المعقم لإعداد محلول DSS بنسبة 1-3%. يُحفظ في درجة حرارة 4 درجات مئوية حتى الاستخدام.
محلول AOM: أذب AOM في WFI للحصول على محلول مخزون بتركيز 10 ملغ/مل. تجمد عند -٢٠ درجة مئوية. تجنب دورات التجميد والذوبان المتكررة. في يوم الاستخدام، قم بإذابة جزء من المحلول ثم قم بتخفيفه بنسبة 1/10 باستخدام محلول ملحي معقم.
بروتوكول
- في اليوم الأول، قم بوزن الفئران ووضع علامة عليها. ثم قم بحقن الفئران داخل الصفاق بمحلول AOM بتركيز 10 ملجم/كجم.
- املأ خزان مياه الشرب في أقفاص الفئران بالماء. احسب ٧-١٠ مل من الماء لكل فأر يوميًا. التغذية لمدة أسبوع.
- استبدال مياه الشرب بمياه DSS بنسبة 2.5% لمدة أسبوع؛
- التغذية بمياه الشرب العادية لمدة أسبوعين؛
- كرر الخطوتين 3-4 لمدة 3 مرات.
الشكل 1. بروتوكول نمذجة سرطان القولون والمستقيم باستخدام AOM/DSS
نتائج نموذج CAC الناجح
فقدان الوزن مع علاج DSS
الشكل 2. التغير في وزن الجسم لدى الفئران
2. درجة الإسهال ودرجة النزيف
الشكل 3. الإسهال نتيجة ودرجة النزيف
3. تكوين الورم في قولون الفأر
الشكل 4. القولون الكامل التمثيلي وعدد سرطان القولون
الشكل 5. التعبير البروتيني عن COX-2 وIL-6 وβ-catenin والقواقع في نماذج الفئران المصابة بسرطان القولون والمستقيم الناجم عن التهاب القولون الحاد والأزوكسي ميثان (AOM)/DSS (أ) تم صبغ مقاطع القولون باستخدام H&E والأجسام المضادة المشار إليها (ب) تم فحص التعبير البروتيني عن طريق النقل الغربي باستخدام الأجسام المضادة المشار إليها بعد تحليل أنسجة القولون من فأرين من كل مجموعة، وتم استخدام β-tubulin كعنصر تحكم في التحميل[2].
روابط لهذا المورد
[1]Qun Wang، وآخرون. عديد السكاريد من نبات القرطم يثبط سرطان القولون والمستقيم لدى الفئران الناتج عن AOM/DSS من خلال تنظيم استقطاب الخلايا البلعمية [J].Frontiers in Pharmacology.2021.761641[2] جيا رونغ هوانغ وآخرون. بايبرلونجومين يخفف من حدة الفأر التهاب القولون والالتهابات المرتبطة به القولون والمستقيم السرطان[J].Frontiers in Pharmacology.2020.586885
حالة ناجحة للنمذجة مع
الجدول 1 بناء أنواع مختلفة من نماذج التهاب الأمعاء باستخدام DSS
| نموذج | نمذجة العينات | خطة النمذجة | نتائج النمذجة | تقييم الاستخدام |
| التهاب القولون الحاد | فئران BALB/c، أنثى، 6-8 أسابيع، 25 جم | 3%-5% DSS يشرب بحرية لمدة 7 أيام متتالية | ظهر اليوم الخامس، وكان طول القولون أقصر، وتصبغات HE، وكان الالتهاب واضحًا | سرعة التشكيل سريعة والوقت قصير. يتوافق مع خصائص نموذج التهاب القولون الحاد. |
| فئران C57BL/6، ذكر، 8 أسابيع، 20 جم | 3%-5% DSS عن طريق التغذية القسرية، الإدارة المستمرة | اليوم الخامس يحدث تقصير القولون، فقدان الوزن، وجود دم في البراز، الإسهال | معدل عفن مرتفع ومدة قصيرة. يتوافق مع خصائص نموذج التهاب القولون الحاد. | |
| التهاب القولون المزمن | فأر C57BL/6، ذكر، 8 أسابيع، 22 جم | 1-2% DSS عن طريق التغذية القسرية، الإدارة المستمرة | يظهر اليوم الأربعون، تقصير القولون، فقدان الوزن، وجود دم في البراز، الإسهال | معدل صب مرتفع. يتوافق مع خصائص نموذج التهاب القولون المزمن |
| سرطان القولون | فأر C57BL/6، ذكر، 8 أسابيع، 21 جم | 1%-2% DSS حسب الرغبة لمدة 5 أيام لمدة 3 أسابيع | 14 أسبوعًا مع تقصير طول القولون، وفقدان الوزن، وتلطيخ HE، والتهاب واضح | معدل صب مرتفع. يتوافق مع خصائص نموذج سرطان القولون. |
صطلب المنتج
المنتج الأكثر مبيعًا يحتاج فقط إلى 1/3 من سعره م* مع نفس الكفاءة، ونحن نحافظ على مخزون كبير.
| صالمنتج نأمي | أمقالة نبني مصفر | مواصفة |
| ملح كبريتات ديكستران الصوديوم (DSS) من ColitCare™، درجة التهاب القولون الوزن الجزيئي: 36000~50000 | 60316ES25/60/76/80 | 25 جم/100 جم/500 جم/1 كجم |
| أزوكسي ميثان (أوم) | 60751ES03/08/10 | 1 ملغ/5 ملغ/10 ملغ |
| مولبيور® مجموعة تحليل الحمض النووي للبراز | 18820ES08/50/70 | 5 ت/50 تي/200 ت |
| مولبيور® مجموعة الحمض النووي للتربة/البراز Mag48 FA | 18528ES48 | 48 طن |
| مولبيور®مجموعة الحمض النووي للتربة/البراز | 18526ES20/50/70 | 20 ت/50 تي/200 ت |
| مجموعة صبغ الهيماتوكسيلين والإيوزين | 60524ES60 | 2×100 مل |
| مجموعة اختبار الدم الخفي في البول والبراز | 60403ES60 | 100 طن |
| محلول تلطيخ حمض شيف الدوري الأزرق الألسياني (AB-PAS) | 60534ES50/60 | 6×50 مل/6×100 مل/ |
صالمقالات المنشورة باستخدام كواشفنا
[1] زونغ د، جين ك، وانغ ر، وآخرون. هيدروجيل قائم على الطحالب الدقيقة لعلاج التهاب الأمعاء والقلق والاكتئاب المصاحب له. مجلة المواد المتقدمة، 26 يناير 2024: e2312275. doi: 10.1002/adma.202312275. إذا = 29.4
[2] Zhang Y، Tu S، Ji X، Wu J، Meng J، Gao J، Shao X، Shi S، Wang G، Qiu J، Zhang Z، Hua C، Zhang Z، Chen S، Zhang L، Zhu SJ. Dubosiella newyorkensis تعدل تحمل المناعة في التهاب القولون عبر مسار AhR-IDO1-Kyn المنشط بـ L-lysine. Nat Commun. 13 فبراير 2024؛ 15(1):1333. doi: 10.1038/s41467-024-45636-x.إذا = 16.6
[3] لي تشاو، في وانج، تشنغوي كاي، وآخرون. تحسين منصة استخدام الأدوية باستخدام هلام مخاطي قابل للحقن لعلاج التهاب القولون التقرحي [J]. مجلة الهندسة الكيميائية. 424 (2021) 130464.إذا = 16.744
[4] لينغجون تونغ، هاينينغ هاو، تشي تشانغ، وآخرون. الحويصلات خارج الخلية المشتقة من الحليب تخفف التهاب القولون التقرحي عن طريق تنظيم مناعة الأمعاء وإعادة تشكيل ميكروبات الأمعاء [J].Theranostics.2021؛ 11(17): 8570-8586 إذا = 11.556
[5] لي، ي.، دونغ، ج.، شياو، هـ.، تشانغ، س.، وانغ، ب.، كوي، م.، وفان، س. حمض الفاليريك المشتق من البكتيريا المعوية يحمي من الإصابات الإشعاعية. ميكروبات الأمعاء، 2020، الصفحات 1-18.إذا = 10.245
[6] جينغجينج جان، يوشياو ليو، لينغيو صن، وآخرون. جزيئات توصيل النوكليوتيدات التي يتم تناولها عن طريق الفم من الموائع الدقيقة لعلاج مرض التهاب الأمعاء [J]. المواد التطبيقية اليوم. ديسمبر 2021؛ 25: 101231 إذا = 10.041
[7] Mengmeng Xu، Ying Kong، Nannan Chen، وآخرون. تحديد التوقيع الجيني المرتبط بالمناعة والتنبؤ بشبكة CeRNA في التهاب القولون التقرحي النشط [J]. Frontiers in Immunology. 2022؛ 13: 855-645.إذا = 7.561
[8] جيالي دونغ، يوان لي، هويوين شياو، وآخرون.تؤثر ميكروبات الفم على فعالية وتوقعات العلاج الإشعاعي لسرطان القولون والمستقيم في نماذج الفئران [J].Cell reports.2021, 109886.إذا = 9.423
[9] هاو هـ، تشانغ إكس، تونغ ل، ليو كيو وآخرون. لاكتوباسيلوس بلانتاروم تأثير الحويصلات خارج الخلية المشتقة من س7 حول ميكروبات الأمعاء والتهاب القولون التقرحي في الفئران [J].Frontiers in Immunology.2021.777147.إذا = 7.561
[10] ياوهوا فان، يانكون فان، كونفينج ليو، وآخرون. عش الطائر الصالح للأكل يخفف التهاب القولون التقرحي الناجم عن كبريتات دكسترين الصوديوم في فئران C57BL/6J عن طريق استعادة توازن خلايا Th17/Treg [J]. Frontiers in Pharmacology.2021.632602.إذا = 7.561
[11] جيا رونغ هوانغ، شنغ تي وانغ، مينغ نينغ وي، وآخرون. بايبرلونغومين يخفف التهاب القولون لدى الفئران وسرطان القولون والمستقيم المرتبط بالتهاب القولون [J]. Frontiers in Pharmacology.2020.586885.إذا = 7.561
[12]Gao X، Fan W، Tan L، وآخرون. تُحسّن أيزوفلافون الصويا من التهاب القولون التجريبي باستهداف مسارات الالتهاب ERα/NLRP3 [J]. مجلة الكيمياء الحيوية الغذائية، 2020، 83.إذا = 6.048
[13] لوجوان شينغ، ليجوان فو، سونغمين كاو، وآخرون. التأثير المضاد للالتهابات للببتيدات المشتقة من الجيلاتين العظمي البقري في التهاب المفاصل الروماتويدي الناجم عن السكاريد الشحميW264.7 خلايا البلاعم وفئران C57BL/6 المُستحثة بكبريتات دكسترين الصوديوم [مجلة]. المواد الغذائية 2022، 14، 1479. إذا = 5.717
[14] وانغ س، هوانغ ج، تان كيه إس وآخرون. إيزوستيفيول الصوديوم يخفف التهاب القولون المزمن الناتج عن كبريتات الصوديوم دكسترين من خلال تنظيم الملف الأيضي، واستقطاب الخلايا البلعمية، ومسار NF-B [مجلة]. الطب التأكسدي وطول عمر الخلايا. 2022، 4636618. إذا = 5.076