بروتوكول نمذجة التهاب القولون التقرحي لدى الخنازير باستخدام كبريتات الصوديوم دكسترين (DSS)

تعد زيادة نفاذية الأمعاء أحد العوامل المسببة لمرض التهاب الأمعاء، وبالتالي يمكن استخدامها كعلامة حيوية لتقييم شدة الضرر الذي يصيب الأمعاء الدقيقة والكبيرة. تم استخدام D-Mannitol، وهو جزيء كربوهيدرات صغير خامل يمكن امتصاصه على طول محور الزغابات المعوية بالكامل، لتقييم نفاذية الأمعاء في الجسم الحي[1].

Figure 1. Piglet

الشكل 1. خنزير صغير

1. بناء النموذج

2. النتائج

3. روابط لهذا المورد

4. حالة ناجحة للنمذجة باستخدام Yeasen DSS

5. طلب ​​المنتج

6. المقالات المنشورة باستخدام كواشفنا

7. الاهتمام بالقراءة

1. بناء النموذج

1.1 نموذج حيواني

خنازير يوركشاير الصغيرة في عمر 4-5 أيام

1.2 المواد

DSS(Yeasen#60316ES،MW36000-50000)

1.3 البروتوكول

أ) تم إيواء صغار خنازير يوركشاير بشكل فردي في أقلام أرضية معدنية ذات أرضيات مطاطية في غرفة ذات دورة ضوء/ظلام محكومة لمدة 12 ساعة. تم الحفاظ على درجة حرارة الغرفة عند 26 درجة مئوية وتم تزويدها بمصباح التدفئة؛
ب) تم تغذية الخنازير الصغيرة على نظام غذائي يحتوي على بديل الحليب التجاري ثلاث مرات في اليوم، على غرار مستوى تناولها حسب رغبتها؛
ج) تم تركيب قسطرة معدية جراحيًا للحيوانات، وتم تثبيت القسطرة على رقعة سيليكون (حوالي 8 × 12 مم)، والتي تم خياطتها بشكل أكبر على جدار المعدة مع إدخال حوالي 30 مم داخل تجويف المعدة. تم تجهيز كل حيوان بسترة مصنوعة خصيصًا مع جيب ظهري للتخزين المؤقت للجزء الخارجي من القسطرة؛
د) تم تقسيم الحيوانات إلى مجموعة تحكم إيجابية (Pos)، ومجموعة تحكم سلبية (Neg)، ومجموعة تجريبية (Trp)؛
هـ) مجموعة التحكم الإيجابية (Pos): حقن DSS (5 أيام) + محلول ملحي (5 أيام)؛ مجموعة التحكم السلبية (Neg): حقن بمحلول ملحي عادي (10 أيام)؛ المجموعة التجريبية (Trp): حقن DSS (5 أيام) + أدوية علاجية (5 أيام)؛
و) جرعة DSS: 1.25 جم/كجم، عن طريق الفم لمدة 5 أيام؛
ز) في نقطة النهاية، تم تخدير الحيوانات من خلال مخدر استنشاقي، أيزوفلوران، وتم إعدامها عن طريق الحقن داخل القلب بالإيثانول (بنتوباربيتال) بجرعة 0.3 مل / كجم · وزن الجسم (BW).
ح) تم غسل أنسجة القولون على الفور بمحلول ملحي بارد (154 مليمول، درجة حموضة 7.4) يحتوي على 0.1 مليمول من فلوريد فينيل ميثيل سلفونيل (PMSF) وتم أخذ عينات منها للفحص النسيجي أو تجميدها بسرعة في النيتروجين السائل للتحليل اللاحق.

2. النتائج

2.1 تحليل نفاذية الأمعاء

Figure 2. DSS-induced D-mannitol concentration in piglets was higher than that in the control group

الشكل 2. كان تركيز D-مانيتول المستحث بواسطة DSS في الخنازير الصغيرة أعلى من تركيزه في المجموعة الضابطة

أدى DSS إلى زيادة تركيز D-مانيتول في الخنازير الصغيرة وتدمير الحاجز المعوي.

2.2 قسم التلوين المرضي لـ H&E

Figure 3. H&E pathological staining section (A: Neg group; B: Pos group)

الشكل 3. مقطع الصبغة المرضية لـ H&E (أ: المجموعة السلبية؛ ب: المجموعة الإيجابية)

تم تقييم شدة الالتهاب القولوني عن طريق تسجيل الالتهاب والقياسات النسيجية.في المجموعة الإيجابية التي عولجت بـ DSS، كان هيكل التجويف مشوهًا، وتسللت الخلايا الالتهابية إلى الغشاء المخاطي وتحت المخاطي، وخراج التجويف، والتهاب التجويف.

2.3 الكشف عن العوامل الالتهابية

Figure 4. Detection of inflammatory factors

الشكل 4. الكشف عن العوامل الالتهابية

زاد تركيز اثنين من السيتوكينات في المجموعة Pos المعالجة بـ DSS[1].

3. روابط لهذا المورد

[1]Connie J. Kim، وآخرون. مجلة الكيمياء الحيوية الغذائية 21 (2010) 468-475.

4. حالة ناجحة للنمذجة باستخدام Yeasen DSS

تقدم شركة Yeasen منتجات عالية الجودة دي إس إس (رقم القطعة 60316ES): النقاء (98%)، محتوى الكبريت 17-19%، الكبريت الحر <0.2%، مدعومًا بعدد كبير من بيانات الأدبيات.

الجدول 1 بناء أنواع مختلفة من نماذج التهاب الأمعاء باستخدام DSS

نموذج

نماذج النمذجة

خطة النمذجة

نتائج النمذجة

تقييم الاستخدام

التهاب القولون الحاد

فئران BALB/c، أنثى، 6-8 أسابيع، 25 جم

3%-5% DSS اشرب بحرية لمدة 7 أيام متتالية

في اليوم الخامس ظهر تم تقصير طول القولون، وظهور بقع بيضاء على سطح القولون، وكان الالتهاب واضحًا

سرعة التشكيل سريعة والوقت قصير، وهو ما يتفق مع خصائص نموذج التهاب القولون الحاد

فئران C57BL/6، ذكر، 8 أسابيع، 20 جم

3%-5% DSS عن طريق التغذية المتواصلة

اليوم الخامس يحدث تقلص القولون، فقدان الوزن، وجود دم في البراز، الإسهال

معدل العفن مرتفع ومدة قصيرة، وهو ما يتفق مع خصائص نموذج التهاب القولون الحاد

التهاب القولون المزمن

فأر C57BL/6، ذكر، 8 أسابيع، 22 جرامًا

1-2% DSS عن طريق التغذية المتواصلة

يظهر اليوم الأربعون، تقلص القولون، فقدان الوزن، وجود دم في البراز، الإسهال

معدل تشكيل مرتفع. متوافق مع خصائص نموذج التهاب القولون المزمن

سرطان القولون

فأر C57BL/6، ذكر، 8 أسابيع، 21 جرامًا

1%-2% DSS حسب الرغبة لمدة 5 أيام لمدة 3 أسابيع

14 أسبوعًا مع تقصير طول القولون وفقدان الوزن وتلطيخ HE والتهاب واضح

معدل تشكيل مرتفع. متوافق مع خصائص نموذج سرطان القولون

5. طلب ​​المنتج

المنتج الأكثر مبيعًا يحتاج فقط إلى 1/3 من سعر M * بنفس الكفاءة، ونحن نحتفظ بمخزون كبير.

الجدول 2. ترتيب المنتج

اسم المنتج القط رقم مقاس
ملح كبريتات دكسترين الصوديوم لنمذجة التهاب القولون الوزن الجزيئي: 36000~50000 60316ES25 25 جرام
60316ES60 100 جرام
60316ES76 500 جرام
60316ES80 1 كجم

6. المقالات المنشورة باستخدام كواشفنا

[1] لي تشاو، في وانج، زينجوي كاي، وآخرون. تحسين منصة استخدام الأدوية باستخدام هلام مخاطي قابل للحقن لعلاج التهاب القولون التقرحي[J]. مجلة الهندسة الكيميائية.424(2021)130464.IF=16.744
[2] Lingjun Tong، Haining Hao، Zhe Zhang، وآخرون. تعمل الحويصلات خارج الخلية المشتقة من الحليب على تخفيف التهاب القولون التقرحي عن طريق تنظيم مناعة الأمعاء وإعادة تشكيل ميكروبات الأمعاء [J].Theranostics.2021؛ 11(17): 8570-8586 إذا = 11.556
[3] Li, Y., Dong, J., Xiao, H., Zhang, S., Wang, B., Cui, M., & Fan, S. حمض الفاليريك المشتق من البكتيريا المعوية يحمي من الإصابات الإشعاعية. ميكروبات الأمعاء، 2020.1–18.IF=10.245
[4] Jingjing Gan, Yuxiao Liu, Lingyu Sun, et al.جزيئات توصيل النوكليوتيدات التي يتم تناولها عن طريق الفم من الميكروفلويديك لعلاج مرض التهاب الأمعاء [J]. Applied Materials Today. 2021 ديسمبر؛ 25:101231 إذا = 10.041
[5] Mengmeng Xu، Ying Kong، Nannan Chen، وآخرون. تحديد التوقيع الجيني المرتبط بالمناعة والتنبؤ بشبكة CeRNA في التهاب القولون التقرحي النشط [J]. Frontiers in Immunology. 2022؛ 13: 855-645. إذا = 7.561
[6] JialiDong، YuanLi، HuiwenXiao، وآخرون. تؤثر ميكروبات الفم على فعالية وتوقعات العلاج الإشعاعي لسرطان القولون والمستقيم في نماذج الفئران [J].Cell reports.2021، 109886.IF=9.423
[7]هاو ح,  تشانغ إكس,  تونغ ل,  ليو Q، وآخرون. Lactobacillus plantarum تأثير الحويصلات خارج الخلية المشتقة من س7 عن ميكروبات الأمعاء والتهاب القولون التقرحي لدى الفئران[J].Frontiers in Immunology.2021.777147 .IF=7.561
[8] ياوهوا فان، يانكون فان، كونفينج ليو، وآخرون. عش الطائر الصالح للأكل يخفف من التهاب القولون التقرحي الناجم عن كبريتات دكسترين الصوديوم في فئران C57BL/6J عن طريق استعادة توازن خلايا Th17/Treg[J]. Frontiers in Pharmacology.2021.632602.IF=7.561
[9] جيا رونغ هوانغ، شينغ تي وانغ، مينغ نينغ وي، وآخرون. بايبرلونغومين يخفف من التهاب القولون لدى الفئران وسرطان القولون والمستقيم المرتبط بالتهاب القولون [J]. Frontiers in Pharmacology.2020.586885. إذا = 7.561
[10]Gao X, Fan W, Tan L, et al. Soy isoflavones ameliorate experimental colitis by target ERα/NLRP3 inflammasome routes[J]. مجلة الكيمياء الحيوية الغذائية، 2020، 83.IF=6.048
[11] لوجوان شينغ، ليجوان فو، سونغمين كاو، وآخرون. التأثير المضاد للالتهابات للببتيدات المشتقة من الجيلاتين العظمي البقري في التهاب المفاصل الروماتويدي الناجم عن السكاريد الشحميW264.7 خلايا البلاعم وفئران C57BL/6 المستحثة بكبريتات دكسترين الصوديوم [J]. المواد الغذائية 2022، 14، 1479. إذا = 5.717
[12] وانج س,  هوانغ ج,  تان كيه إس، وآخرون. أيزوستيفول الصوديوم يخفف من التهاب القولون المزمن الناجم عن كبريتات الصوديوم دكسترين من خلال تنظيم الملف الأيضي واستقطاب الخلايا البلعمية ومسار NF-B [J]. الطب التأكسدي وطول العمر الخلوي. 2022، 4636618. إذا = 5.076

7.قراءة محترمة

إنشاء نموذج دكسترين كبريتات الصوديوم (DSS) لالتهاب القولون التقرحي

إنشاء نموذج السرطان المرتبط بالتهاب القولون الناجم عن الأزوكسيميثان (AOM) وكبريتات دكسترين الصوديوم (DSS)

بروتوكول نمذجة التهاب القولون التقرحي لدى ذبابة الفاكهة باستخدام كبريتات الصوديوم دكسترين (DSS)

بروتوكول نمذجة سمكة الزرد المصابة بالتهاب القولون التقرحي باستخدام كبريتات الصوديوم ديكستران (DSS)

سؤال