---القضاء على التداخل البكتيري الخلفي وتلوث RNase
في الكشف عن مسببات الأمراض بضربة واحدة!
مثبط RNase (مثبط RNase، المختصر باسم RNasin) قادر على الارتباط بشكل خاص بـ RNase من خلال تفاعلات غير تساهمية لتكوين مركب، وبالتالي تعطيل RNase والحفاظ على سلامة RNA. يستخدم على نطاق واسع في طرق الكشف عن مسببات الأمراض مثل RT-qPCR وmNGS وtNGS. أثناء الكشف عن مسببات الأمراض، من الأهمية بمكان التحكم بشكل صارم في تلوث البكتيريا الخلفية للإنزيمات الجزيئية؛ إذا تداخلت البكتيريا الخلفية مع الإنزيمات الجزيئية، فقد تطغى على الأحماض النووية المستهدفة ذات الوفرة المنخفضة أو يتم اكتشافها معها، مما يؤثر على تفسير النتائج.
مثبط RNase منخفض للغاية من شركة Yeasen
مثبط RNase الفأري Yeasen UCF.ME® (رقم الفئة 14672ES/14673ES/14674ES) هو مثبط RNase مشتق من الفأر معاد التركيب، يتم التعبير عنه وتنقيته في شكل قابل للذوبان من E. coli. لديه القدرة على تثبيط أنواع مختلفة من RNases على نطاق واسع، بما في ذلك RNase A وB وC. تم اختبار هذا المنتج باستخدام RT-PCR وRT-qPCR ووجد أنه متوافق مع النسخ العكسي التقليدي ومجموعة متنوعة من بوليميرات الحمض النووي. بالمقارنة مع مثبطات RNase المشتقة من الإنسان، يفتقر مثبط RNase الفأري Yeasen UCF.ME® إلى بقايا السيستين شديدة الحساسية للأكسدة في البروتينات البشرية، وبالتالي يوفر نشاطًا مضادًا للأكسدة أعلى. إنه مناسب بشكل خاص للتجارب الحساسة لتركيزات DTT العالية، مثل qPCR.
علاوة على ذلك، بالمقارنة مع مثبطات RNase التقليدية (Cat#10603ES/10610ES/14671ES)، يظهر مثبط RNase الفأري Yeasen UCF.ME® مستويات متبقية أقل من الحمض النووي الجينومي للمضيف، مما يساعد في معالجة التداخل البكتيري الخلفي في الكشف عن مسببات الأمراض ويعزز دقة الكشف.
خصائص المنتج
- بقايا منخفضة للغاية: مستوى بقايا الحمض النووي لبكتيريا الإشريكية القولونية < 0.1 نسخة/100 وحدة، وهو مناسب للتطبيقات ذات المتطلبات البكتيرية الخلفية الأكثر صرامة.
- نشاط مثبط واسع النطاق لـ RNase: قادر على تثبيط RNases بما في ذلك RNase A، RNase B، RNase C، وغيرها.
- متوافق مع مجموعة واسعة من ظروف التفاعل: نشط في ظل ظروف الرقم الهيدروجيني من 5.0 إلى 9.0 ودرجات الحرارة من 25 درجة مئوية إلى 60 درجة مئوية، ومناسب للنسخ العكسي المحبة للحرارة.
- متوافق مع مجموعة واسعة من التجارب اللاحقة: لا يؤثر على النشاط الأنزيمي لبوليميرازات RNA SP6 أو T7 أو T3، وAMV، وM-MLV، وبوليميرازات Taq DNA.
- الاستقرار من دفعة إلى أخرى: تضمن منصة إنتاج الإنزيمات الجزيئية فائقة النظافة UCF.ME®، مع مراقبة الجودة الصارمة، التوحيد والاستقرار والتوريد في الوقت المناسب للمنتج.
أداء المنتج
1) لا يوجد إكسونوكلياز، إنزيم الشق وRNase بقايا
الشكل 1. الكشف عن النوكلياز، وإنزيم النيك، وبقايا RNase في مثبط RNase الفأري UCF.ME®.
ملاحظة: يمثل N التحكم السلبي؛ وتمثل 1 و2 و3 ثلاث مجموعات من التجارب المتوازية.
2) بقايا الحمض النووي الجينومي القولوني أقل من 0.1 نسخة / 100 وحدة، وهو أقل بكثير من الإصدار التقليدي.
عند إجراء الكشف عن بقايا الحمض النووي الجينومي للمضيف (E.coli) على دفعات مختلفة من مثبط RNase الفأري UCF.ME® ومقارنتها بمستويات بقايا المضيف لمثبطات RNase الفأرية التقليدية، تظهر النتائج أن بقايا الحمض النووي الجينومي للمضيف لمثبط RNase الفأري UCF.ME® أقل من 0.1 نسخة / 100 وحدة، وهو أقل بكثير من النسخة التقليدية.
الشكل 2: مقارنة نتائج الكشف عن بقايا جينوم الإشريكية القولونية بين UCF.التصوير بالرنين المغناطيسي ME® والتصوير بالرنين المغناطيسي التقليدي.
3) قدرة تثبيط RNase متفوقة بشكل كبير على العلامات التجارية المستوردة.
باستخدام Total RNA كقالب، تم إجراء تفاعل RT-qPCR باستخدام مجموعة اختبار Hifair® V Multiplex One Step RT-qPCR (UDG Plus) (رقم الصنف 13650ES) للتحقق من قدرة مثبط RNaseA UCF.ME® Murine RNase على هضم RNaseA. أشارت النتائج إلى أن التأثير المثبط لـ Yeasen UCF.ME® MRI على RNaseA يتفوق بشكل كبير على المنتجات التنافسية الدولية المماثلة.
الشكل 3: التحقق من صحة قدرة UCF.ME® MRI على تثبيط RNase
ملاحظة: Yeasen UCF MRI: 8 وحدات UCF.ME® MRI + 80 نانوجرام RNaseA؛ Yeasen MRI: 8 وحدات MRI + 80 نانوجرام RNaseA؛ منافس N*: 8 وحدات من منتج تنافسي مماثل + 80 نانوجرام RNaseA؛ التحكم: لا يوجد تصوير بالرنين المغناطيسي وRNaseA.
توصية المنتج
| يكتب | اسم | قطة |
| سلسلة إنزيمية أحادية فائقة النظافة من تفاعل البوليميراز المتسلسل مع بقايا مضيفة منخفضة للغاية | بوليميراز الحمض النووي Taq الحساس من Hieff UCF.ME® Hotstart (5 وحدة/ميكرولتر) | 14314ES |
| إنزيم النسخ العكسي Hifair UCF.ME® V (200 وحدة/ميكرولتر) | 14608ES | |
| UCF.ME® Uracil DNA Glycosylase(UDG/UNG)، قابل للتغير بالحرارة، 1 وحدة/ميكرولتر | 14466ES | |
| مثبط الريناز الفأري UCF.ME® (40 وحدة/ميكرولتر) | 14672ES | |
| سلسلة أحادية الإنزيم PCR عالية الأداء | بوليميراز الحمض النووي Hieff UNICON® Hotstart E-Taq، 5 وحدة/ميكرولتر | 10726ES |
| Hifair® V النسخ العكسي (200 وحدة/ميكرولتر) | 11300ES | |
| جليكوزيلات اليوراسيل DNA (UDG/UNG)، غير قابلة للتأثر بالحرارة، 1 وحدة/ميكرولتر | 10303ES | |
| مثبط RNase الفأري (40 وحدة / ميكرولتر) | 10603ES | |
| مزيج dNTP (25 مليمول لكل منهما) | 10125ES | |
| جاهز لليو سلسلة أحادي الإنزيم PCR | بوليميراز الحمض النووي Hieff UNICON® HotStart E-Taq، خالٍ من الجلسرين (5 وحدة/ميكرولتر) | 14316ES |
| Hifair® V Reverse Transcriptase، خالٍ من الجلسرين (600 وحدة/ميكرولتر) | 11301ES | |
| جليكوزيلات اليوراسيل DNA (UDG)، غير قابلة للتأثر بالحرارة (1 وحدة/ميكرولتر، خالية من الجلسرين) | 10707ES | |
| مثبط RNase الفأري (200 وحدة / ميكرولتر، خالٍ من الجلسرين) | 10703ES |