مخلفات QPCR ذات البقايا العالمية المذهلة للغاية: للكشف الدقيق للمرض في التطبيقات المتنوعة

الكلمات المفتاحية:

بقايا منخفضة، ممزوجة مسبقًا، متعددة الأهداف عالمية، أنبوب واحد، تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي، حساسية عالية.

خلاصة:

يدعم مزيج qPCR الجديد منخفض البقايا للغاية من الجيل الثالث، والذي تم خلطه مسبقًا لضمان حساسية عالية، بروتوكولًا سريعًا مدته 30 دقيقة ويتفوق في تضخيم الإرسال المتعدد عبر سيناريوهات متنوعة.

خلفية:

غالبًا ما تحتوي الإنزيمات الجزيئية التجارية، المُنتَجة أساسًا عن طريق التعبير المُؤتلف في سلالات مُهندَسة وراثيًا (مثل الإشريكية القولونية)، على بقايا من الحمض النووي الجينومي للمضيف. وتزيد عوامل مثل بيئة التحضير والتلوث البشري من احتمالية وجود بقايا من الحمض النووي في هذه الإنزيمات. وقد يؤدي هذا إلى عدم دقة تحديد كميات بقايا الأحماض النووية للمضيف في منتجات مراقبة الجودة، مما يُشكل مخاطر على سلامة تصنيع المستحضرات الصيدلانية الحيوية. وأثناء الكشف عن مُسببات الأمراض، قد تطغى الأحماض النووية البكتيرية الخلفية الملوثة على الأحماض النووية المستهدفة قليلة الوفرة، أو قد تُكتشف معها، مما يُضعف دقة الاختبار.

الحل الكامل

لمعالجة التدخل من البكتيريا الخلفية وبقايا الأحماض النووية المضيفة في الكشف عن مسببات الأمراض، YEASEN طورت شركة بيوتك تقنية فريدة للتحكم في المخلفات منخفضة للغاية. أسسنا UCF.ME، وهي قاعدة إنتاج إنزيمات جزيئية فائقة النظافة، ملتزمة بمعايير GMP، مع امتثال صارم لنظام إدارة الجودة ISO 13485 في جميع المراحل. يشمل ذلك رقابة صارمة على الموظفين والآلات والمواد (الكواشف والمواد الاستهلاكية) والعمليات والبيئة والمعايير. من خلال دمج الإجراءات التقنية الفعالة وبيئة الإنتاج النظيفة ومراقبة الجودة الصارمة، نمكّن من إنتاج UCF.ME على نطاق واسع.^TMإنزيمات جزيئية متبقية منخفضة للغاية.

هييف يونيكون^TM مزيج Pure Pro U+ qPCR(أنبوب واحد) (قطة#16713ES)هو مزيج qPCR عالمي تم تصميمه بعناية فائقة بواسطة YEASEN Biotech، الذي يتميز ببقايا منخفضة من الحمض النووي للمضيف. يعتمد هذا المنتج على جيل جديد من مزيج qPCR المختلط مسبقًا (رقم الكتالوج 16713ES) الذي يتحكم بفعالية في الحمض النووي الجينومي المتبقي للمضيف (الإشريكية القولونية)، مع التحكم أيضًا في المستويات المتبقية من البكتيريا المسببة للأمراض الشائعة، مثل الزائفة الزنجارية (Pseudomonas aeruginosa) والملوثات البشرية. ونظرًا لأن هذا المحلول المُخلط مسبقًا (رقم الكتالوج 16713ES) لا يتحكم بفعالية في مستوى بقايا مسببات الأمراض فحسب، بل يعالج أيضًا مشكلات الاستقرار في الكشف المتعدد وتعدد استخدامات الأهداف، فإنه يُعزز مؤشرات الأداء الرئيسية، مثل حساسية الكاشف وخصوصيته. كما يُحسّن بشكل كبير من كفاءة الكشف، ويمكن استخدامه على نطاق واسع في تطبيقات مثل الكشف عن الكائنات الدقيقة المسببة للأمراض.

مزايا المنتج

• بقايا خلفية منخفضة - لم يتم الكشف عن بقايا البكتيريا الإشريكية القولونية والزائفة الزنجارية والحمض النووي الجينومي المشتق من الإنسان في 48 بئراً.
• استقرار استثنائي مسبق الخلط:يبقى ثابتًا عند 37 درجة مئوية لمدة تصل إلى 14 يومًا، وعند 4 درجات مئوية لمدة تصل إلى 28 يومًا، وبعد 50 دورة تجميد وذوبان.
• تنوع ممتاز في الكواشف - متوافق مع مجموعة متنوعة من مجموعات البادئات والمجسات المتعددة (تم التحقق من صحتها لأكثر من 40 نوعًا مختلفًا من الأهداف)، مع أداء تضخيم ممتاز.
• حساسية وخصوصية عالية - الحساسية قادرة على اكتشاف 250 نسخة / مل، مع خصوصية تضمن عدم وجود قمم في 48 بئرًا سلبية.
• يدعم البروتوكولات السريعة - متوافق مع البروتوكولات السريعة، ويمكن الحصول على النتائج في 30 دقيقة فقط.
• نظام dUTP/UDG المضاد للتلوث - يتضمن نظام مضاد للتلوث dUTP/UDG لمنع تلوث الهباء الجوي بشكل فعال.
• التوافق مع منصات وأنظمة متعددة - متوافق مع منصات مثل Bio-Rad CFX96، ABI Q5، 7500، Slan، Tianlong، وغيرها.

أبرز أحداث الأداء

1. بقايا بكتيرية خلفية منخفضة للغاية

بناءً على تقييم مستويات بقايا البكتيريا في الخلفية الكيميائية، يتم استخدام YEASEN'س بقايا منخفضة للغاية عالميةأعيد مزجها مزيج qPCR (رقم الكتالوج 16713ES) والكواشف التقليدية (بدون التحكم في البقايا) لـ NTC (لا يوجد عنصر تحكم في القالب) التضخيم في الإشريكية القولونية (الإشريكية القولونية) النظام، مع خضوع 16713ES أيضًا لتضخيم NTC في كلٍّ من أنظمة Pseudomonas aeruginosa والحمض النووي الجينومي المشتق من الإنسان. تُظهر النتائج أن Cat#16713ES لا يُظهر أي تضخيم في 48 بئرًا من NTC، تشير إلى بقايا خلفية ضئيلة من الحمض النووي (الإشريكية القولونية، والزائفة الزنجارية، والحمض النووي البشري) في الكاشف.

2. استقرار ممتاز للخليط المسبق المختلط بالكامل

بناءً على التحقيق في استقرار ممزوجة مسبقًا عولج الكاشف، رقم الكتالوج 16713ES، بثلاث طرق (4 درجات مئوية، 37 درجة مئوية، والتجميد والذوبان). عولجت المجموعات التجريبية عند 4 درجات مئوية و37 درجة مئوية لمدة 7 أيام على التوالي، وأُخضعت لـ 50 دورة تجميد وذوبان. قُيِّم ثباتها مقارنةً بالمجموعة الضابطة (المخزَّنة عند درجة حرارة -20 درجة مئوية) باستخدام أربعة أنظمة تضخيم متعددة (المجموعات 1 و2 و4 هي أنظمة تضخيم رباعية، والمجموعة 3 هي نظام تضخيم ثلاثي)، مع تقييم ثبات بعض مجموعات التضخيم بعد 14 يومًا من التسارع عند درجة حرارة 37 درجة مئوية. وأظهرت النتائج أن انحراف قيمة Ct (قيمة ΔCt) بين الكواشف التجريبية والتحكمية كان ضمن ±0.5، وكان انحراف قيمة الفلورسنت في حدود 15%، مما يدل على أن YEASENيتمتع الكاشف المختلط مسبقًا بثبات ممتاز في تضخيم متعدد الإرسال.

3. تنوع ممتاز في الكواشف

بناءً على التحقيق في سيناريوهات التطبيق المتنوعة للكواشف، YEASEN (Cat#16713ES) تم استخدامه جنبًا إلى جنب مع العديد من الكواشف التقليدية للتحقق من صحة أداء التضخيم في سيناريوهات مستهدفة مختلفة. أظهرت النتائج أن المنتج يُظهر أداء تضخيم جيد عبر مجموعة متنوعة من الأهداف بما في ذلك مسببات الأمراض والمصادر البشرية والنباتات، مما يشير إلى مستوى عالٍ من تنوع الكواشف.

4. حساسية تضخيم ممتازة

بناءً على تقييم حساسية الكاشف، تم إجراء تقييم على معدل اكتشاف Cat#16713ES في نظام تضخيم متعدد (4-plex) باستخدام عينات بتركيزات منخفضة للغاية (250 نسخة/مل). وتشير النتائج إلى أن YEASENتُظهر Cat#16713ES أداءً ممتازًا حساسية التضخيم، مع حد الكشف لا يقل عن 250 نسخة/مل.

5. التوافق مع بروتوكولات سريعة متعددة

بناءً على التحقيق في أداء التضخيم للبروتوكول السريع للكاشف، تم التحقق من صحة سبع عينات متدرجة (1~10^6 نسخة/ميكرولتر) باستخدام كل من البروتوكولات التقليدية (1 ساعة و6 دقائق) والبروتوكولات السريعة (30 دقيقة) على نفس أداة تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي (ABI Q5). وأظهرت النتائج أن كفاءة التضخيم للبروتوكول السريع ظلت فوق 99%، وكان انحراف قيمة Ct (قيمة ΔCt) بين البروتوكولات التقليدية والسريعة في حدود ±0.5، مع انحراف قيمة الفلورسنت في حدود ±10%، ومنحنيات التضخيم يظهر على شكل حرف "S".

مشاركة كواشف الكشف عن الأمراض المُعدية

كمورد لأدوات العلوم الحياتية، YEASEN تُقدّم شركة بيوتك مواد خام عالية الجودة وفعّالة من حيث التكلفة لشركات التشخيص المخبري (IVD) منذ فترة طويلة. بالإضافة إلى خدماتها العالمية، ممزوجة مسبقًا بالكامل مخاليط رئيسية qPCR/RT-qPCR، نقدم مجموعة متنوعة من كواشف الكشف qPCR/RT-qPCR الأخرى، مما يساعد التشخيص المخبري يتعامل عملاء المؤسسات بشكل مشترك مع الكشف الفعال عن مسببات الأمراض البشرية وأمراض الحيوان.

نوع المنتج	وظيفة المنتج	اسم المنتج	رقم الصنف
مزيج qPCR	الجيل الثالث الجديد كليًا، مزيج مسبق بالكامل، عالي الحساسية، يدعم الاختبار السريع	مزيج Hieff UniconTM Universal TaqMan Pro U+ qPCR(أنبوب واحد)	16710ES
	عالمي عالي الحساسية (تركيز 5 ×)	هييف يونيكونTM مزيج رئيسي متعدد الاستخدامات من TaqMan qPCR(يو دي جي بلس)	13891ES
	الجيل الثاني سريع الخلط بالكامل مسبقًا	هييف يونيكونTM مزيج رئيسي من Superpro 1 TaqMan qPCR(يو دي جي بلس)	11827ES
	بقايا منخفضة للغاية خالية من المضيف	هييف يونيكونTM Purepro 1 TaqMan qPCR Master Mix(يو دي جي بلس)	11853ES
	عالية الحساسية قابلة للتجفيف بالتجميد عالميًا	مزيج Hieff UniconTM Universal TaqMan Multiplex qPCR الرئيسي(يو دي جي بلس)	11893ES
مزيج RT-qPCR	سريع عالمي عالي الحساسية	مجموعة مسبار RT-qPCR متعدد المراحل من HifairTM C203P1(يو دي جي بلس)	16630ES
	عالمي مختلط بالكامل مسبقًا	هيفيرTM مجموعة مسبار RT-qPCR أحادي الخطوة V Multiplex(يو دي جي بلس)	11899ES
	قابل للتجفيف السريع عالميًا	مجموعة HifairTM Lyo Multiplex One Step RT-qPCR	11831ES