مصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™ - خيارك الأول
مع تقدم علاج الخلايا الجذعية وتطوير الأدوية القائمة على العضويات، تلعب مصفوفة الغشاء القاعدي دورًا محوريًا كناقل غذائي وداعم لمزارع الخلايا الجذعية والعضويات ومزارع الخلايا ثلاثية الأبعاد وتطبيقات أخرى بما في ذلك تكوين الأوعية الدموية وتجارب تكوين الأورام في الجسم الحي وما إلى ذلك. يتم استخراج مستخلصات الغشاء القاعدي Ceturegel™ من أورام الفئران Engelbreth-Holm-Swarm (EHS) الغنية ببروتينات المصفوفة خارج الخلية بما في ذلك اللامينين والكولاجين من النوع الرابع والنستين وما إلى ذلك وIGF وFGF وعوامل النمو الأخرى. في درجة حرارة الغرفة، تتبلمر مصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™ لتكوين مصفوفة ثلاثية الأبعاد نشطة بيولوجيًا. يمكنها محاكاة بنية وتكوين وخصائص فيزيائية ووظائف الغشاء القاعدي للخلية في الجسم الحي، وهو أمر مفيد لزراعة الخلايا وتمايزها في المختبر وهو بديل جيد للماتريجيل.
1. ما هي مصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™؟
2. ما هو دور مصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™؟
3. ما هي خصائص مصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™؟
4. التطبيق الشائع لمصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™
5. الأسئلة الشائعة
6. دليل اختيار مصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™ من Yeasen
1. ما هي مصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™؟
تشكل المصفوفة المجاورة للخلايا البطانية والخلايا الظهارية والخلايا العضلية والخلايا العصبية مصفوفة خارج الخلية متصلة ومتعددة الطبقات تسمى الغشاء القاعدي. يتحلل الغشاء القاعدي ويتجدد أثناء النمو والتئام الجروح. فهو لا يدعم الخلايا وطبقات الخلايا فحسب، بل يلعب أيضًا دورًا مهمًا في تكوين الأنسجة من خلال التأثير على التصاق الخلايا وهجرتها وانتشارها وتمايزها، وهي وظائف الغشاء القاعدي. لذلك، يمكن القول إن الغشاء القاعدي هو الحاجز الرئيسي لغزو الخلايا السرطانية النقيلية.
الشكل 1. مصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™
لا تحتوي مصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™ التي طورتها وأنتجتها شركة YEASEN على LDEV (فيروس تعزيز اللاكتات ديهيدروجينيز) وتحتوي على محتوى منخفض للغاية من السموم الداخلية. وبعد الكشف عن الميكوبلازما للتأكد من عدم وجود تلوث بالميكوبلازما، بما في ذلك الأنواع المختلفة مثل التركيز الأساسي والتركيز العالي وعامل النمو المنخفض.
2. ما هو دور مصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™؟
يمكن استخدام مصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™ لإعداد مصفوفات الغشاء القاعدي لمتطلبات مختلفة. يمكن استخدامها لدراسات إشارات الخلايا، مثل دراسة دور عوامل النمو في تكوين الأنابيب الكلوية بواسطة الخلايا الجذعية الكلوية للفأر، ودراسة التعبير الجيني للخلايا الجذعية الظهارية الثديية للفأر، وتجربة غزو الورم في Transwell. في الوقت نفسه، يمكن استخدامها لدراسة مورفولوجيا الخلايا والوظيفة الكيميائية الحيوية والهجرة والعدوى والتعبير الجيني. يمكن لمصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™ أن تساعد بشكل فعال في ربط وتمايز الخلايا الظهارية وأنواع أخرى من الخلايا، بما في ذلك الخلايا العصبية والخلايا الجذعية والخلايا الظهارية الثديية وخلايا الورم الميلانيني والخلايا البطانية الوعائية وخلايا الغدة الدرقية وخلايا بصيلات الشعر. في الوقت نفسه، تؤثر مصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™ أيضًا على مستوى التعبير البروتيني للخلايا الظهارية الثديية للفئران وتدعم تجديد الأعصاب الطرفية.
الشكل 2.الاتجاهات الرئيسية لتطبيق مصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™
هجرة الخلايا وغزوها بالتفصيل: تشير هجرة الخلايا، والمعروفة أيضًا باسم زحف الخلايا أو حركتها أو حركتها، إلى حركة الخلايا بعد تلقيها إشارة هجرة أو شعورها بتدرج مواد معينة. هجرة الخلايا هي عملية متناوبة لتمديد الأرجل الكاذبة في رأس الخلية، وإنشاء التصاقات جديدة، وسحب ذيل جسم الخلية. هجرة الخلايا هي واحدة من الوظائف الأساسية للخلايا الطبيعية، وهي أيضًا عملية فسيولوجية للنمو والتطور الطبيعي للجسم. كشكل منتشر لحركة الخلايا الحية، يمكنها المشاركة في مجموعة متنوعة من العمليات الفسيولوجية والمرضية الجماعية. مثل التطور الجيني، وتكوين الأوعية الدموية، والتئام الجروح، والاستجابة المناعية، والاستجابة الالتهابية، وتصلب الشرايين، ونقائل السرطان، إلخ. في حين أن غزو الخلايا يشير إلى قدرة الخلايا على الهجرة من منطقة إلى أخرى من خلال المصفوفة خارج الخلية. غزو الخلايا هو استجابة الخلايا الطبيعية والخلايا السرطانية للمحفزات الكيميائية والميكانيكية. غالبًا ما يحدث غزو الخلايا في عمليات التئام الجروح، وتكوين الأوعية الدموية، والالتهاب، ونقائل الخلايا السرطانية، والتسلل غير الطبيعي للأنسجة.
3. ما هي خصائص مصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™؟
سلامة عالية:لا يوجد LDEV (فيروس زيادة لاكتات ديهيدروجينيز)
تنوع التركيز:يتراوح نطاق التركيز بين 8~20 ملغ/مل
استقرار الدفعة جيد: عملية صارمة لفحص جودة الإنتاج لضمان الأداء المستقر بين الدفعات
انخفاض السموم الداخلية: محتوى السموم الداخلية <8 EU/ml
كشف التلوث:لم يتم الكشف عن بقايا الميكوبلازما والبكتيريا والفطريات
إنتاجية عالية للدفعة الواحدة:إخراج الدفعة الواحدة أعلى من مستوى 50 لترًا
التوافق:متوافق مع أي نوع من وسط زراعة الخلايا
4. التطبيق الشائع لمصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™
4.1 اختبار الهجرة والغزو
الطريقة التجريبية لاكتشاف قدرة الخلايا على الهجرة والغزو هي تجربة ترانسويل، وتسمى ترانسويل أيضًا تجربة الثقب. يتم إضافة تعليق الخلايا إلى الحجرة أولاً لأن الحجرة بها مسام كثيفة. ثم توضع الغرف في صفيحة ذات 24 بئرًا يضاف إليها وسط كامل. تشوهت الخلايا ومرت عبر ثقوب في الحجرة إلى خارج الحجرة الأكثر ثراءً بالمغذيات، حيث التصقت بالخارج. من خلال صبغ وحساب الخلايا خارج الحجرة، يمكن الحكم على قدرة الخلايا على الهجرة والغزو. مبدأ ترانسويل هو وضع الحجرة الصغيرة في صفيحة الثقافة، تسمى الحجرة الصغيرة الغرفة العلوية، وتسمى صفيحة الثقافة الغرفة السفلية. يتم فصل الطبقات العلوية والسفلية من سائل الثقافة بغشاء بولي كربونات، تضاف الطبقة العلوية من سائل الثقافة إلى الغرفة العلوية، وتضاف الطبقة السفلية من سائل الثقافة إلى الغرفة السفلية. الخلايا موجودة في الغرفة العلوية، وسيؤثر تكوين الوسط السفلي على الخلايا في الغرفة العلوية بسبب نفاذية الغشاء. علاوة على ذلك، تمت دراسة تأثير المكونات الموجودة في الوسط السفلي على نمو الخلايا وحركتها.
العمليات المحددة لمصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™ في اختبارات الهجرة والغزو: تمت إضافة مصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™ المخففة إلى الغرفة العلوية من Transwell، وتم طلاء الخلايا وحضنها في 37 درجة مئوية و5٪ CO22 حاضنة لمدة 24 ساعة، مثبتة في 4% بارافورمالدهيد، وملطخة بمحلول صبغة بنفسجي كريستالي 0.1%. تمت ملاحظة الخلايا وعدها تحت مجهر التباين الطوري المقلوب.
الشكل 3. نتائج صبغ الكريستال البنفسجي بعد غزو الخلايا
4.2 تكوين الأوعية الدموية
1) قبل يوم واحد من التجربة، قم بإخراج Ceturegel™ قم بإخراج الماتريجيل من الفريزر ووضعه في الثلاجة بدرجة حرارة 4 درجات مئوية طوال الليل ليذوب أثناء تبريد المواد الاستهلاكية المستخدمة مسبقًا.
2) احرص دائمًا على حفظ Ceturegel™ Matrigel في صندوق ثلج قبل إجراء التجربة. افتح العبوة المعقمة لشرائح توليد الأوعية الدموية وأخرج الشرائح.
3) أضف 10 ميكرولتر من Ceturegel™ Matrigel إلى كل بئر. لاحظ أن طرف الماصة يجب أن يكون عموديًا على الجزء العلوي من الفتحة الداخلية عند إضافة Ceturegel™ Matrigel لمنع Matrigel من التدفق عبر الفتحة العلوية وترك بقايا غراء.
4) أولاً قم بتغطية الشريحة، ثم قم بإعداد طبق بتري مقاس 10 سم، ثم ضع المناشف الورقية المبللة بالماء لصنع صندوق مبلل.
5) ضع الشرائح في طبق بتري وقم بتغطية طبق بتري. ضعه في وعاء من ثاني أكسيد الكربون.2 الحاضنة، اتركها لمدة 30 دقيقة تقريبًا، وانتظر حتى يتخثر الجل، وقم بإعداد تعليق الخلايا في نفس الوقت.
6) تحضير الخلايا المهضومة في معلق خلوي بكثافة 2*105 خلايا/مل وتخلط جيدا.
7) قم بإزالة الشريحة الزجاجية التي تحتوي على الأوعية الدموية التي تجمدت في شكل هلام. أضف 50 ميكرولترًا من تعليق الخلايا إلى كل بئر، مع الحرص على إبقاء طرف الماصة عموديًا فوق البئر العلوي وعدم لمس الهلام في البئر السفلي.
8) أضف وسط زراعة الخلايا، ثم أغلق الغطاء واتركه جانبًا. بعد مرور بعض الوقت، ستغوص جميع الخلايا إلى سطح مادة الماتريجيل.
الشكل 4. الرسم البياني لنتائج تكوين الأوعية الدموية
التلوين المناعي الفلوري
1) قم بإزالة الوسط بعناية من الآبار دون لمس الغراء أو شبكة الخلايا. قم بتخفيف الكالسين في وسط خالٍ من المصل إلى تركيز نهائي يتراوح بين 6-8 ميكروجرام/مل. أضف محلول صبغ الخلايا لغمر الخلايا بالكامل، ثم احتضنه في درجة حرارة الغرفة لمدة 30-40 دقيقة في الظلام.
2) اغسل ثلاث مرات بـ PBS. لاحظ أنه يجب إضافة PBS ببطء إلى الآبار العلوية لتجنب التأثير على الخلايا. ملاحظة الفلورسنت باستخدام Ex = 485 نانومتر، Em = 529 نانومتر الطول الموجي
الشكل 5. صبغ الأوعية الدموية بالفلورسنت المناعي
4.3 زراعة الخلايا ثلاثية الأبعاد
على عكس زراعة الخلايا التقليدية، تعمل زراعة الخلايا ثلاثية الأبعاد على إعادة إنتاج البيئة الحية للخلايا. حتى النماذج الكروية البسيطة يمكنها التعويض عن أوجه القصور في مزارع الطبقة الأحادية. يمكن لهذه الهياكل أن تشكل تدرجات من الأكسجين والمغذيات والأيض والإشارات القابلة للذوبان، والتي بدورها تشكل مجموعات خلايا متنوعة. يمكن لتقنية زراعة الخلايا ثلاثية الأبعاد محاكاة البيئة الطبيعية التي تعيش فيها الخلايا في الكائنات الحية بشكل أفضل، مما يجعل التفاعلات بين الخلايا والاستجابات الكيميائية الحيوية والفسيولوجية أكثر واقعية. في بيئة ثلاثية الأبعاد، تشبه استجابات الخلايا للمحفزات الداخلية والخارجية استجاباتها الحية بشكل أكبر.
تتم العملية المحددة لمصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™ في ثقافة الخلايا ثلاثية الأبعاد على النحو التالي: قم بخلط مصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™ بلطف مع التركيز المعدل من تعليق خلية واحدة HepG2 بنسبة 1:1، وأضف 50 ميكرولترًا من تعليق الخلية الواحدة المختلط أعلاه إلى لوحة 24 بئرًا مبردة مسبقًا باستخدام طرف ماصة مبرد مسبقًا لتشكيل قطرات خلايا على شكل قوس تمت زراعتها في حاضنة عند درجة حرارة 37 درجة مئوية و5٪ من ثاني أكسيد الكربون، وتمت ملاحظتها وتصويرها كل يوم.
الشكل 6. نتائج زراعة الخلايا ثلاثية الأبعاد
الجدول 1. مرجع استخدام مصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™ لزراعة الخلايا ثلاثية الأبعاد:
نوع الطبق الثقافي | مساحة زراعة الخلايا (سم2) | قياس الاستخدام (التركيز ≥ 3 ملغ/مل)* |
---|---|---|
صفيحة ذات 6 آبار | 9.6 | 200 ميكرولتر/سم2 |
صفيحة ذات 12 بئر | 4.5 | 180 ميكرولتر/سم2 |
صفيحة ذات 24 بئرًا | 2.0 | 180 ميكرولتر/سم2 |
صفيحة 96 بئر | 0.32 | 160 ميكرولتر/سم2 |
35 ملم طبق | 11.78 | 200 ميكرولتر/سم2 |
100 ملم طبق | 58.95 | 200 ميكرولتر/سم2 |
ملاحظة: تختلف الدفعات المختلفة من مصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™ باختلاف تركيز معين، والجرعة الموصى بها هي للإشارة فقط
4.4 تجربة تكوين الورم في الجسم الحي
باستخدام تجربة تكوين الورم تحت الجلد لخلايا HepG2 في الفئران العارية كمثال، تم استخدام مصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™ وتعليق الخلايا للتخفيف بنسبة 1:1، وتم تطعيم فئران BALB/c-nu الإناث التي تتراوح أعمارها بين 4 و5 أسابيع تحت الجلد. تتم العملية التجريبية على النحو التالي:
♦ قم بإعداد خلايا HepG2 ذات نمو لوغاريتمي وكثافة خلوية تبلغ حوالي 80-90%، وقم بتغيير الوسط الطازج في الليلة السابقة لجمع الخلايا.
♦ يتم هضم الخلايا بواسطة التربسين، وعندما تصبح الخلايا مستديرة ولا تخرج من طبق الثقافة، يتم إزالة التربسين، وإضافة الوسط الخالي من المصل لصنع تعليق الخلايا، ويتم طرده وتنظيفه مرة واحدة، والتركيز النهائي هو 5 × 107 خلايا/مل.
♦ قم بتخفيف تعليق الخلية ومصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™ بنسبة 1:1 عند 4 درجات مئوية لإعداد تركيز نهائي يبلغ 5 × 107 خلايا/مل.
♦ امسك فأرًا عاري ثابتًا باليد اليسرى، واحقنه تحت الجلد في الكتف الأيمن للفأر العاري. أثناء التلقيح، يتم إدخال الإبرة تحت الجلد بعمق أقل قليلاً، حوالي 1 سم، لتقليل فيضان تعليق الخلايا من عين الإبرة بعد الحقن.
حجم التلقيح هو 200 ميكرولتر. (يجب إكمال هذه العملية في غضون نصف ساعة قدر الإمكان. في الطريق، يجب وضع تعليق الخلايا على الجليد لإبطاء موت الخلايا المبرمج ومنع ظاهرة الهلام).
♦ قم بوضع الفئران العارية مرة أخرى داخل القفص لمواصلة التغذية، ويمكن رؤية الورم لمدة تتراوح من أسبوع إلى شهر.وفقًا للتصميم التجريبي، قم بقتل الفئران العارية عندما يصل حجم الورم إلى المتطلبات، ثم التقط الصور.
ملاحظة: المجموعة الضابطة هي تعليق وسط الثقافة والخلايا، والكثافة النهائية هي نفس كثافة مجموعة اختبار غراء المصفوفة.
4.5 زراعة الأعضاء
العضويات هي أنسجة صغيرة متعددة الخلايا ثلاثية الأبعاد تختلف عن الخلايا الجذعية. يمكن إعادة إنتاج بعض خصائص الأعضاء. العضويات متعددة الخلايا وتظهر درجة عالية من التجميع الذاتي، وبالتالي فهي أكثر قدرة على إظهار استجابات وتفاعلات خلوية معقدة في الجسم الحي من الثقافات ثنائية الأبعاد التقليدية. يمكن خلط الخلايا الجذعية و/أو خلايا أسلاف الأعضاء من الأنسجة الطبيعية أو المريضة مع مصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™ أو الكولاجين. تشكل الكلى والغدة الدرقية والكبد والدماغ والرئة والأمعاء والبروستات وغيرها من الأعضاء الدقيقة. على سبيل المثال، بالنسبة للباحثين الذين يقومون بإجراء الفحوصات الجينية، يمكن استخدام ركائز مصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™ كأحبار بيولوجية لتمكين تحديد موقع الخلايا الحية/العضويات وتضمينها بدقة في الطباعة الحيوية ثلاثية الأبعاد.
الشكل 7. عملية تشغيل العضو
بناء عضو معوي صغير للفأر
تحضير العينة: تم قتل الفئران بقطع أعناقها، وتم رش السطح بالكحول للتعقيم. تم قطع الأنسجة المعوية على مسافة 3 إلى 15 سم بالقرب من نهاية المعدة تحت بيئة معقمة، وتم إزالة المساريقا والدهون بعناية خارج القناة المعوية باستخدام الملقط، ووضعها في محلول DPBS المحتوي على 1٪ جسم مضاد مزدوج مبرد مسبقًا عند 4 درجات مئوية.
تنظيف العينة: استخدم حقنة لتنظيف القناة المعوية 2-3 مرات، واستخدم مقصًا جراحيًا لقطع القناة المعوية بعناية مع مواجهة تجويف الأمعاء لأعلى، واستخدم شفرة جراحية لكشط الزغابات المعوية بلطف على سطح تجويف الأمعاء، وبعد كشط الزغابات المعوية (التي تظهر الأنسجة الشفافة)، ضع الأنسجة المعوية في طبق ثقافة جديد يحتوي على DPBS لمدة 2-3 مرات.
المعالجة الأولية للعينات: تقطيع أنسجة الأمعاء الدقيقة المغسولة إلى قطع صغيرة بعرض 2 مم، ثم نقلها إلى أنبوب طرد مركزي جديد سعة 50 مل. اغسلها برفق 3-5 مرات باستخدام DPBS لإزالة خلايا الزغابات المعوية والأنسجة الدهنية العائمة.
هضم العينة: أضف 10-15 مل من محلول DPBS المبرد مسبقًا والذي يحتوي على 3-5 مليمولار EDTA إلى أجزاء الأمعاء الدقيقة المنظفة من أجل الهضم، ثم احتضنها عند 4 درجات مئوية لمدة 30 دقيقة تقريبًا، ثم رج أنبوب الطرد المركزي برفق كل 10 دقائق خلال هذه الفترة.
بعد عملية الهضم، تخلص من العصارة العلوية لمحلول هضم EDTA واشطف الأنسجة بلطف بمحلول DPBS العازل الجديد مرتين إلى ثلاث مرات لإزالة EDTA المتبقي.
أضف 10-15 مل من محلول DPBS المبرد مسبقًا والذي يحتوي على 0.1% من BSA إلى شظايا أنسجة الأمعاء الدقيقة، ثم انفخ وأعد تعليق شظايا الأنسجة بشكل متكرر لفصل التجويف عن الطبقة القاعدية، ثم خذ كمية صغيرة من المعلق للفحص المجهري. عندما ترى عددًا كبيرًا من الهياكل التي تشبه التجويف، توقف عن النفخ واستخدم 70% من معلق الأنسجة المنفوخ ميكرومولر لتصفية وجمع معلق الأنسجة الذي يمر عبر شاشة المرشح.
كرر الخطوتين 5 و6 مرتين وقم بالطرد المركزي بسرعة 1500 دورة في الدقيقة و4 درجات مئوية لمدة 3 دقائق.
تكوين الخليط: ترسب الأنسجة المعلقة الثقيلة من غراء المصفوفة Ceturegel™، يحتوي كل 10 ميكرولتر من تعليق غراء المصفوفة على 200 إلى 600 تجويف. بعد إعادة التعليق، يوضع الخليط على الثلج ويتم تشغيله في أسرع وقت ممكن لتجنب تكوين هلام غراء المصفوفة.
ملحوظة: نسبة تخفيف غراء المصفوفة ≥ 50% لضمان استقرار بنية لاصق المصفوفة أثناء عملية الثقافة.
قم بزراعة الخليط المعلق في منتصف الجزء السفلي من اللوحة المكونة من 24 بئرًا، بمقدار 30~50 ميكرولترًا لكل بئر على اليسار واليمين لتجنب ملامسة الخليط المعلق للجدار الجانبي للوحة الفتحة.
ضع لوحة الثقافة المزروعة في حاضنة ثاني أكسيد الكربون ذات درجة الحرارة الثابتة 37 درجة مئوية، واحتضنها لمدة 30 دقيقة تقريبًا حتى يتصلب هلام المصفوفة.
انتظر Ceturegel™ بعد أن يتجمد غراء المصفوفة تمامًا، أضف ببطء وسط ثقافة الأعضاء المعوية المُجهز على طول الجدار، 800 ميكرولتر لكل بئر.
ضع الصفيحة ذات الـ 24 بئرًا في حاضنة ثاني أكسيد الكربون بدرجة حرارة 37 درجة مئوية للزراعة. استبدل الوسط الجديد كل 3 أيام وراقب حالة نمو العضو. بشكل عام، تتشكل الأعضاء التي تشبه الأمعاء الدقيقة لدى الفئران في غضون 5-7 أيام.
الشكل 8. نتائج زراعة أعضاء تشبه الأمعاء الدقيقة للفئران في المختبر
5. الأسئلة الشائعة
1. ما هو سبب اختلاف اللون (الأصفر الفاتح إلى الأحمر الداكن) للركيزة التي تم الحصول عليها؟
بالنسبة لمصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™ المحتوية على الفينول الأحمر، فإن ذلك يحدث بشكل أساسي بسبب تفاعل الفينول الأحمر والبيكربونات مع ثاني أكسيد الكربون2، ولكن سيتم تقليل اختلاف اللون بعد التوازن مع 5٪ CO2بعد التجميد والتذويب، رج القارورة بلطف لتوزيع مصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™ بالتساوي.
2. ما هي الأمور التي يجب الانتباه إليها في تشغيل مصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™؟
يجب إجراء جميع العمليات في بيئة معقمة، ويجب استخدام ماصة مبردة مسبقًا لضمان تجانس مصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™.
3. كيفية تجميد وتخزين مصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™ للاستخدام؟
يمكن توزيع مصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™ Matrix LDEV-Free Ceturegel™ المجمدة والمذابة في أنابيب صغيرة متعددة. يجب أن تكون جميع التوزيعات في قوارير مبردة مسبقًا، والتي يجب تجميدها وتخزينها بسرعة لتجنب التجميد والذوبان المتكرر. يجب تبريد جميع العناصر المعنية مسبقًا قبل الاستخدام. استخدم الماصات المبردة مسبقًا والأطراف والأنابيب الصغيرة للتعامل مع مصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™.
6. دليل اختيار مصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™ من Yeasen
إن الأنواع المختلفة من مصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™ لها تطبيقات مختلفة. يمكن استخدام التركيزات القياسية لمصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™ لزراعة الخلايا القطبية، مثل الخلايا الظهارية. ويمكنها تعزيز تمايز الخلايا المختلفة واستخدامها في تجارب هجرة الخلايا السرطانية وغزوها. تُستخدم التركيزات العالية من مصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™ على نطاق واسع في الجسم الحي ويمكن استخدامها لتجارب تكوين الأنابيب. تتمثل الوظيفة الرئيسية لعامل النمو المنخفض (GFR) في القضاء على تداخل عوامل النمو في التجربة، وهي مناسبة للدراسات ذات المتطلبات العالية لإعداد الغشاء القاعدي. يمكن لمصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™ بدون الفينول الأحمر القضاء على تداخل مؤشر الفينول الأحمر وهي مناسبة لتجارب تطوير اللون، مثل قياس الألوان والكشف عن الفلورسنت. تُستخدم مصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™ بدرجة زراعة الخلايا الجذعية الجنينية البشرية خصيصًا لزراعة الخلايا الجذعية الجنينية البشرية، وزراعة الخلايا الجذعية متعددة القدرات بدون وحدة تغذية. توفر Yeasen العديد من أنواع مصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™، ويمكنك اختيارها بناءً على تجاربك.
الجدول 2. دليل اختيار مصفوفة Ceturegel™
نوع المنتج | القطة رقم | اسم المنتج | ماتريجيل القط رقم | اتجاه التطبيق |
التركيز الأساسي (8-12 ملغ/مل) | 40183ES | 356234/ 354234 | تتكيف مع تجارب الثقافة والغزو والهجرة ثنائية وثلاثية الأبعاد، ويمكن استخدامها أيضًا في التجارب المسببة للأورام في الجسم الحي | |
40184ES | 356237 | يستخدم بشكل أساسي في اكتشاف الألوان مثل تجارب اكتشاف الفلورسنت وما إلى ذلك | ||
تخفيض عامل النمو
| 40185ES | 354230 | بشكل أساسي لاستبعاد تدخل عوامل النمو في التجربة. يتم تطبيقه على الأبحاث ذات الصلة بعوامل النمو ومسارات الإشارة وما إلى ذلك. | |
40186ES | 356231 | |||
تركيز عالي (≥18 ملغ/مل) | 40187ES | 354248 | يستخدم بشكل أساسي في التجارب مثل تكوين الأوعية الدموية، وانسداد الأوعية الدموية بالهلام، وتكوين الورم في الجسم الحي (بالنسبة لتكوين الأوعية الدموية، يوصى بأن يكون التركيز النهائي لمصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™ ≥10 مجم/مل) | |
40189ES (سؤال) | مصفوفة Ceturegel™ عالية التركيز، خالية من عوامل الخطر لمرض السكري، خالية من LDEV | 354263 | ||
40188ES | مصفوفة Ceturegel™ عالية التركيز، خالية من الفينول الأحمر، وخالية من LDEV | 354262 | ||
للخلايا الجذعية | 40190ES | 354277 | يستخدم بشكل أساسي لزراعة الخلايا الجذعية مثل hESC و iPSC وما إلى ذلك. | |
خاص بالعضويات | 40191ES (سؤال) | مصفوفة Ceturegel™ لزراعة الأعضاء، خالية من الفينول الأحمر، وخالية من LDEV | 356255 | مصفوفة الغشاء القاعدي Ceturegel™ لزراعة الأعضاء |