الرحلان الكهربائي للبروتين هو تقنية تحليل البروتين. يتم شحن البروتينات سلبًا أو إيجابًا في المخزن المؤقت وتتحرك إلى الأنود في مجال كهربائي يسمى الرحلان الكهربائي. تتمتع جزيئات البروتين المختلفة بقدرات كهربية مختلفة. يعد تحضير الهلام جزءًا مهمًا للغاية من الرحلان الكهربائي للبروتين. غالبًا ما يستغرق تحضير الهلام التقليدي عدة ساعات، وهناك أيضًا مشاكل مثل تسرب السائل، والهلام غير المتساوي، والفقاعات الهوائية. بالإضافة إلى مشكلة التحضير، فإن كواشف المواد الخام ستكون لها أيضًا سمية معينة، مما يتسبب في ضرر لجسم موزع الغراء، ويمكن أن يحل مظهر الغراء الجاهز هذه المشاكل. إذن ما هو المبدأ الأساسي للرحلان الكهربائي للبروتين، وما هي وظيفة ومبدأ الهلام الجاهز؟

1. ما هو المبدأ الأساسي لعملية التحليل الكهربائي للبروتينات؟
2. ما هي وظيفة ومبدأ الغراء الجاهز؟
3. مقدمة عن الغراء الجاهز الذي توفره شركة Yeasen
4. الأسئلة الشائعة
5. تفاصيل المنتج

1. ما هو المبدأ الأساسي لعملية التحليل الكهربائي للبروتينات؟

تحتوي معظم الجزيئات الحيوية الكبيرة، مثل البروتينات والأحماض النووية، على مجموعات كاتيونية وأنيونية، تسمى أيونات الزويتر. تسمى طريقة الرحلان الكهربائي للمنطقة التي تنتشر فيها الجسيمات في المحلول وهلام النشا أو هلام الأجار أو هلام الأجاروز أو هلام البولي أكريلاميد وما إلى ذلك كوسط داعم، بالرحلان الكهربائي للهلام. الرحلان الكهربائي للهلام البولي أكريلاميد هو طريقة رحلان كهربائي يكون فيها الداعم عبارة عن هلام بولي أكريلاميد. يُعتقد أنه يتم التحكم في حجم مسام هلام البولي أكريلاميد للبلمرة، ويتم فصل البروتينات من خلال عمل غربال جزيئي مماثل.

يتضمن الرحلان الكهربائي للبروتينات شكلين، الرحلان الكهربائي للهلام البولي أكريلاميد الأصلي (Native-PAGE) والرحلان الكهربائي للهلام البولي أكريلاميد كبريتات دوديسيل الصوديوم (SDS-PAGE). يحافظ Native-PAGE على البروتينات سليمة أثناء الرحلان الكهربائي ويفصلها بتدرج بناءً على وزنها الجزيئي وشكلها والشحنة المصاحبة لها. من ناحية أخرى، يفصل SDS-PAGE البروتينات وفقًا للوزن الجزيئي لوحداتها الفرعية. SDS هو منظف أنيوني. بصفته مادة مشوهة وعامل مذيب، يمكنه كسر الروابط الهيدروجينية داخل الجزيئات وبين الجزيئات، وطوي الجزيئات، وتدمير الهياكل الثانوية والثالثية لجزيئات البروتين. كعامل اختزال قوي، يمكن لمركابتويثانول، ديثيوثريتول، كسر روابط ثاني كبريتيد بين بقايا السيستين. بعد إضافة عامل الاختزال وSDS إلى العينة والهلام، يتم نزع بوليمر الجزيئات إلى سلاسل بولي ببتيد، ويتم دمج السلاسل الجانبية للأحماض الأمينية المنزوعة البوليمر وSDS في ميسيلات بروتين-SDS. تتجاوز الشحنة السالبة لميسيلات بروتين-SDS الشحنة الأصلية للبروتين، مما يزيل فرق الشحنة والاختلاف البنيوي بين الجزيئات المختلفة. تعتمد قدرة البروتين على الحركة فقط على الكتلة الجزيئية للبروتين، ويمكن تحديد الكتلة الجزيئية للبروتين عن طريق مقارنتها بمعيار الكتلة الجزيئية المعروفة.

2. ما هي وظيفة ومبدأ الغراء الجاهز؟

بالمقارنة مع المواد الهلامية المصبوبة يدويًا التقليدية، فإن المواد الهلامية البروتينية المصبوبة مسبقًا يمكن تجنب ملامسة عدد كبير من الكواشف السامة، وتوفير الكثير من الوقت، وحل مشكلة الاختلافات الكبيرة في المواد الهلامية المصبوبة يدويًا بشكل فعال.

يتكون الجل من طبقتين مختلفتين من الجل، الطبقة العلوية عبارة عن جل تكديس والطبقة السفلية عبارة عن جل فاصل. يُعرف جل التكديس أيضًا باسم جل التكديس.تركيز الهلام صغير نسبيًا وحجم المسام كبير نسبيًا. تُضاف العينة إلى الهلام المكدس وتُركز في منطقة ضيقة من خلال هجرة الهلام ذي حجم المسام الكبير. عادةً ما يكون للهلام المنفصل، المعروف أيضًا باسم هلام الرحلان الكهربائي، حجم مسام صغير، ويمكن أن يؤدي اختيار تركيز الهلام المناسب إلى فصل مكونات العينة جيدًا.

يمكن تقسيم الهلام الفاصل إلى هلام ثابت وهلام متدرج. تركيز بولي أكريلاميد هو 8٪، 10٪، 12٪، 15٪، 4٪ إلى 12٪، و4٪ إلى 20٪. أول أربعة هي هلام مسبق الصنع بتركيز ثابت، وآخر اثنين هما هلام متدرج. تمثل التركيزات نطاق الأوزان الجزيئية للبروتين المعزول. يتم تشكيل تدرجات الهلام بواسطة خلاطات التدرج. يضاف محلول أكريلاميد عالي التركيز إلى اللوحة الزجاجية، ثم ينخفض ​​تركيز المحلول في التدرج، ويكون حجم مسام الهلام أكبر في الأعلى وأصغر في الأسفل. يمكن للهلام المثبت فقط فصل البروتينات ضمن نطاق فصله، لا كبيرًا جدًا ولا صغيرًا جدًا. لا تحتوي هلامات التدرج على هذا القيد، حيث يتم فصل الجزيئات الكبيرة في الأعلى ويتم فصل الجزيئات الصغيرة في الأسفل. نظرًا لأن حجم مسام الهلام المتدرج يصبح أصغر تدريجيًا، فإن له تأثيرًا مركّزًا على البروتين بالقرب من حجم المسام الذي لا يستطيع البروتين اختراقه، وبالتالي ستتشكل منطقة ضيقة جدًا بعد الرحلان الكهربائي. غالبًا ما لا يمكن فصل البروتينات ذات الاختلافات الصغيرة في الوزن الجزيئي على الهلام الثابت ولكن يمكن حلها على الهلام المتدرج.

3. مقدمة عن الغراء الجاهز الذي توفره شركة Yeasen

ييسن جل البروتين الجاهز يتضمن تركيز التدرج والتركيز الثابت، يمكن لمجموعة متنوعة من التركيزات المختلفة تلبية احتياجات الرحلان الكهربائي للبروتينات المختلفة. يتم تحضيره من خلال عملية تحضير هلام فريدة من نوعها وله تأثير رحلان كهربائي ممتاز. إنه متوافق مع جميع أنواع خزانات الرحلان الكهربائي الموجودة في السوق (Bio-RAD وTanon وLife وما إلى ذلك) وله مزايا التكيف الواسع والدقة العالية والاستقرار العالي والأشرطة الواضحة والموحدة وما إلى ذلك.

3.1 ياسين جل البروتين الجاهز ترقية إلى لوحة بلاستيكية، جودة أفضل!

سهل الاستخدام: جاهز للاستخدام؛ قم بإزالة الشريط اللاصق من أسفل اللوحة البلاستيكية

مجموعة واسعة من التطبيقات: متوافقة مع البروتين المتحلل والبروتين الطبيعي

شريط واضح: إن المعالجة الخاصة للألواح البلاستيكية تقلل بشكل كبير من امتصاص البروتين

توفير الوقت: يمكن إكمال التجربة في 18 دقيقة بأسرع وقت

ضمان الجودة: ضمان صارم للاستقرار بين الدفعات

مدة صلاحية طويلة: يمكن تخزينها عند درجة حرارة 4 مئوية لمدة 12 شهرا

3.2 يمكن أن تساعدك المعلمات التالية في اختيار سلسلة الجل المناسبة

نظام تخزين الكهربي: عازل البروتين المتحلل أو عازل البروتين الطبيعي

عدد الآبار وتحميل العينة: 10 أو 15 بئرًا، وكان الحد الأقصى لحجم العينة 70 ميكرولترًا و40 ميكرولترًا على التوالي

تركيز الجل: 8%، 10%، 12%، 15%، 4%-12%، 4%-20%

الجدول 1.تركيز الهلام ونطاق الفصل الخطي

3.3 عرض البيانات

الشكل 1. تظهر البيانات

الشكل 2. تظهر البيانات

4. الأسئلة الشائعة

س1: هل يجب أن تكون مسبقة الصنع؟ جل هل يجب وضعه عند درجة حرارة 4 مئوية؟ هل يهم إذا تركته في درجة حرارة الغرفة لفترة من الوقت؟

أ: يوصى بتخزينه عند درجة حرارة 4 درجات مئوية لمدة 12 شهرًا. لا تخزنه عند درجة حرارة أقل من 0 درجة مئوية، ويمكن تخزينه في درجة حرارة الغرفة (25 درجة مئوية) لمدة 30 يومًا.

س2: كيف نختار بين التركيز المتدرج والتركيز الثابت؟ ما هو الحد الأدنى للوزن الجزيئي للبروتين المنفصل عن الخرسانة الجاهزة؟ جل؟

أ: حجم فصل البروتين عن طريق الخرسانة الجاهزة جل ترتبط بتركيزها، ويظهر نطاق الفصل المقابل في الشكل أعلاه.

تركيز ثابت مسبق الصنع جل تتمتع بدقة أفضل. تركيز التدرج مسبق الصنع جل لديه نطاق فصل أوسع ومجموعة أوسع من التطبيقات؛ العملاء ينبغي عليهم اختيار التركيز المناسب وفقًا لاحتياجاتهم الخاصة.

الخرسانة الجاهزة لدينا ذات التدرج 4%-20% جل (Cat#36250, Cat#36256) لديه نطاق فصل واسع للبروتينات يصل إلى 3.5 كيلو دالتون.

الشكل 3. التدرج المسبق الصنع بيانات الجل

س3: هل الخرسانة الجاهزة جل هل يجب أن تكون مجهزًا بمخزن مؤقت خاص بك؟ هل يمكنك صنع مخزن مؤقت خاص بك؟

أ: عازل خاص من YEASEN (رقم الفئة 36236، رقم الفئة 36237) ومسبق الصنع تكون قابلية تطبيق الجل أفضل. لا تخلط مع محاليل عازلة أخرى. يمكن تحضير المحاليل العازلة عن طريق شراء الكواشف، لكن العملاء يجب استخدام صيغتنا، والتي يمكن العثور عليها في المواد الجاهزة ذات الصلة تعليمات الجل.

س4: كيف نميز بين الجل المنفصل؟ وهل هو ضروري للتحليل الكهربائي المقطعي للجهد؟

ج: المكونان متماثلان، لكن التركيز ليس هو نفسه، ولا يمكن للعين المجردة التمييز بينهما؛ ويبلغ ارتفاع الغراء المركز 1.5 سم.

لا، يوصى بإجراء التحليل الكهربائي عند 150 فولت، ويستغرق الأمر 30-40 دقيقة لإكمال التجربة.

س5: هل الخرسانة الجاهزة الخاصة بك هل الجل مناسب لجميع أنواع خزانات الكهربي الموجودة في السوق؟

أ: نعم، منتجاتنا الجاهزة جل مناسب لجميع أنواع خزانات التحليل الكهربائي الموجودة في السوق،

Bio-rad Mini-Protean (II/3 /Tetra System) وTanon VE180 (لاحظ التجميع العكسي لشريط الختم)؛

خلية صغيرة من نوع Novex من Life Technology (تستخدم مع حاجز خاص)؛

عرض لوحة الجل الأخرى في خزان الرحلان الكهربائي 10 سم.

5. تفاصيل المنتج

المنتجات التي تقدمها شركة Yeasen هي كما يلي:

الجدول 2.تفاصيل المنتج