-أضئ غشاء النشاف الخاص بك، في متناول يديك!
تعتبر كواشف ECL، المعروفة باسم الركائز الكيميائية الضوئية لبيروكسيديز الفجل (HRP)، حاليًا أكثر الكواشف حساسية المستخدمة في الكشف عن الترسيب الغربي. تشمل المشكلات الشائعة مع كواشف ECL المتوفرة في السوق الإخماد، والخلفية العالية، وعدم الاستقرار، وصعوبة الكشف عن البروتينات ذات الوفرة المنخفضة، والتي يمكن أن تؤثر على النتائج التجريبية النهائية.
جمعت شركة Yeasen Biotech باحثين علميين بارزين في مجال الكشف المناعي. من خلال التحكم الصارم في جودة المواد الخام للومينول وتحسين تركيبة المعززات والمثبتات باستمرار، قمنا بتطوير أربعة أنواع من كواشف ECL لتلبية احتياجات التجارب المختلفة. وتشمل هذه المنتجات المحسنة والحساسة للغاية والمتينة والحساسة للغاية. فهي لا تلبي متطلبات الكشف عن البروتينات المستهدفة من الوفرة المنخفضة إلى العالية فحسب، بل تعمل أيضًا على تعزيز شدة التوهج دون التأثير على التجربة، مما يؤدي إلى صور أكثر وضوحًا.
مميزات المنتج
- حساسية ممتازة - الكشف عن المستضدات من البيكوغرام إلى مستويات الفيمتوغرام المنخفضة.
- نسبة إشارة إلى ضوضاء أعلى — تعمل الركائز المضيئة الدقيقة على تقليل الضوضاء الخلفية.
- أكثر كفاءة في استخدام الأجسام المضادة - أنظمة ركيزة مُحسّنة لتحقيق قدرة أعلى على ربط الأجسام المضادة.
- نسبة التكلفة إلى الأداء عالية - أداء أعلى بسعر أقل.
- استقرار ممتاز — تضمن المؤكسدات الجديدة تخزينًا مستقرًا عند 4 درجات مئوية لمدة تصل إلى عام واحد.
مبدأ المنتج
إن المبدأ الأساسي لكشف كاشف ECL هو التلألؤ الناتج عن تفاعلات الأكسدة: حيث يتم أكسدة اللومينول، المكون الرئيسي للركيزة المضيئة، بواسطة H2O2 في ظل ظروف قلوية من خلال تحفيز بيروكسيديز الفجل (HRP)، مما يشكل وسيطًا في الحالة المثارة لحمض 3-أمينو فثاليك. وعندما يعود إلى الحالة الأساسية، يتم إطلاق الفوتونات، مع طول موجة انبعاث أقصى يبلغ 425 نانومتر. ويمكن التقاط إشارات الفوتونات هذه بواسطة فيلم الأشعة السينية أو أجهزة التصوير CCD.
دليل الاختيار
تقدم Yeasen حاليًا أربعة أنواع من منتجات ECL، ولكل منها ميزاتها الفريدة، لتلبية احتياجات تطبيقات المناعة الغربية للمستخدمين بشكل كامل.
إذن، أي منتج يجب عليك اختياره لتجربتك؟
الجدول 1.دليل اختيار الكواشف ECL
| ياسين | تحسين ECL النوع المحسن | سوبر إي سي إل النوع فائق الحساسية | سوبر دورا نوع متين | ماكسي سيجنال نوع ذو حساسية عالية للغاية |
| العينات القابلة للتطبيق | الهدف هو الحصول على عينات بروتينية روتينية ذات وفرة عالية | الهدف ذو الوفرة المنخفضة والعينات المحدودة | الهدف ذو الوفرة المنخفضة والعينات المحدودة | هدف ذو وفرة منخفضة للغاية وعينات ثمينة |
| حساسية الكشف | مستوى بيكوجرام متوسط | مستوى بيكوجرام منخفض | مستوى فمتوجرام متوسط | مستوى فمتوجرام منخفض |
| مدة الإشارة | < 2 ساعة | < 12 ساعة | < 24 ساعة | < 8 ساعات |
| نظام الكشف المطبق | جميع الكواشف مناسبة لأفلام الأشعة السينية وأجهزة التصوير CCD | |||
| تركيز التخفيف الأساسي للأجسام المضادة | 1:1000-1:4000 | 1:1000-1:10000 | 1:1000-1:50,000 | 1:5000-1:100,000 |
| تركيز التخفيف الثانوي للأجسام المضادة | 1:1000-1:4000 | 1:2000-1:10,000
| 1:50,000-1:250,000 | 1:100,000-1:500,000 |
| الغشاء الموصى به | غشاء NC | غشاء NC أو غشاء PVDF | غشاء NC أو غشاء PVDF | غشاء NC أو غشاء PVDF |
| استقرار التخزين | درجة حرارة الغرفة لمدة سنة | 4 درجات مئوية لمدة عام واحد، ودرجة حرارة الغرفة لمدة نصف عام | ||
| المزايا | أقوى إشارة بين نفس مستوى الحساسية | أعلى نسبة تكلفة إلى أداء، مناسبة لمعظم تجارب WB | أطول مدة للإشارة، مناسبة للغاية للتعريضات المتعددة | حساسية ممتازة، مناسبة للغاية لاكتشاف البروتين النزر |
ملاحظة: يعتمد تركيز التخفيف الموصى به للأجسام المضادة على تركيز مخزون الأجسام المضادة بمقدار 1 ملغ/مل.
تطبيق المنتج
تتمتع كواشف Yeasen ECL بتأثيرات استخدام أفضل مقارنة بمنتجات العلامات التجارية الأخرى على نفس المستوى.
الشكل 1. مقارنة تأثيرات الكشف بين Yeasen ECL Ultra-Sensitive Substrate Super والركيزة المكافئة للعلامة التجارية T Pico.
الشكل 2. مقارنة تأثيرات الكشف بين ركيزة Yeasen ECL Ultra-High Sensitivity Substrate MaxiSignal والركيزة المكافئة من العلامات التجارية الأخرى West Femto.
الشكل 3.مقارنة تأثيرات الكشف بين Yeasen ECL Durable Substrate SuperDura والركيزة المكافئة من العلامات التجارية الأخرى West Dura.
الأدب المنشور
[1]Wang Z, Lu Z, Lin S, et al. Leucine-tRNA-synthase-2-expressing B cells Contributor to colonrectal cancer immunovesion. Immunity. 2022;55(6):1067-1081.e8. doi:10.1016/j.immuni.2022.04.017(IF:43.474)
[2] وو زد، ليو دي، بان دي، وآخرون. بنية وهندسة أسيديباسيلوس سلفوروأوكسيدانس كاس 12 إف 1[م]. نيتشر كاتاليز، 2023، 6(8):695-709. DOI:10.1038/s41929-023-00995-4(IF:38)
[3] Yao J, Wu D, Zhang C, et al. Macrophage IRX3 يعزز السمنة الناجمة عن النظام الغذائي والالتهاب الأيضي. Nat Immunol. 2021؛ 22(10): 1268-1279. doi:10.1038/s41590-021-01023-y (إذا: 25.606)
[4] He X, Li J, Zhou G, et al. Gating of hippocampal rhythms and memory by synaptic plasticity in inhibitory interneurons. Neuron. 2021;109(6):1013-1028.e9. doi:10.1016/j.neuron.2021.01.014(IF:17.173)
ميزة السعر
الشكل 7.مقارنة أسعار منتجات Yeasen ECL مع منتجات العلامات التجارية الأخرى على نفس المستوى
الأسئلة الشائعة
| المشاكل التي واجهتها | تحليل السبب | الحلول الموصى بها |
| الفيلم يحتوي على صور معكوسة | الفيلم يحتوي على صور معكوسة | الفيلم يحتوي على صور معكوسة |
| الفيلم يحتوي على خطوط بنية أو صفراء | ||
| إخماد الفلورسنت | وقت التشغيل طويل جدًا، يجف الغشاء تدريجيًا | منع الغشاء من الجفاف |
| تلوث الغلاف البلاستيكي أو المطور أو المثبت | تطوير عادات تجريبية جيدة | |
| عدم كفاية HRP في نظام التفاعل | زيادة المواد التي تحمل علامة HRP | |
| لا توجد نطاقات أو إشارة ضعيفة على الفيلم | كفاءة نقل منخفضة | تحسين كفاءة النقل، استخدم قلم التحديد المصبوغ مسبقًا للحكم |
| مستضد/جسم مضاد غير كاف أو غير متطابق | زيادة كمية المستضد/الأجسام المضادة أو تحديد المستضد/الأجسام المضادة المناسبة | |
| مشاكل أفلام الأشعة السينية | إذا كان فيلم الأشعة السينية أسود بالكامل (غير شفاف) بعد التعرض، فهذا يشير إلى تعرض الفيلم بالكامل؛ استخدم فيلم أشعة سينية جديد | |
| مشاكل المطور/المصلح | قم بتعريض الفيلم مسبقًا للتحقق منه؛ إذا كانت هناك مشكلات، فاستبدله بمطور/مثبت جديد | |
| ارتفاع نسبة HRP في نظام التفاعل | مادة مخففة تحمل علامة HRP | |
| خلفية عالية | تركيزات الأجسام المضادة الأولية والثانوية مرتفعة للغاية | تقليل تركيز الأجسام المضادة، وإطالة وقت الحجب |
| الأجسام المضادة لم يتم تنظيفها جيدا | زيادة عدد الغسلات | |
| حجب غير مكتمل | تحسين ظروف الحظر | |
| تم استخدام عامل حجب خاطئ | استخدم عامل حجب مختلف | |
| التعرض المفرط | تقليل وقت التعرض | |
| ضعف خصوصية الأجسام المضادة | استبدالها بأجسام مضادة عالية الجودة | |
| ارتفاع نسبة HRP في نظام التفاعل | مادة مخففة تحمل علامة HRP | |
| فرق بها أماكن فارغة | تركيز عالي من المستضد والأجسام المضادة الثانوية | قم بتخفيف العينة ثم أعد تشغيل الجل، أو قم بتبريد المحلول الكروموجيني المختلط وقم بتطبيقه على الغشاء لتحقيق التطور السريع الفوري. |
| شكل الشريط غير منتظم | فقاعات الهواء أثناء النقل أو الترطيب غير المتساوي مع الميثانول (لأغشية PVDF) | تحسين ظروف النقل. |
| بقع الفيلم | مجموعات من المواد التي تحمل علامة HRP | قم بتصفية المواد التي تحمل علامة HRP باستخدام غشاء 0.2 ميكرومتر |
| نطاقات غير محددة | ارتفاع نسبة HRP في نظام التفاعل | مادة مخففة تحمل علامة HRP |
| SDS يسبب ارتباطًا غير محدد بالبروتين | لا تستخدم SDS في الإجراء التجريبي | |
| ضعف خصوصية الأجسام المضادة | استبدالها بأجسام مضادة عالية الجودة | |
| حجب غير كاف | زيادة وقت الحظر أو استخدام عامل حظر مختلف |
معلومات الطلب
| اسم المنتج | رقم المنتج | مواصفة |
| كاشف الكشف عن سوبر إي سي إل | 36208ES60/76 | 100 مل/50 مل |
| مجموعة الركيزة الكيميائية الضوئية المحسنة ECL | 36222ES60/76 | 100 مل/500 مل |
| ركيزة SuperSignal SuperDura الممتدة المدة | 36223ES10/60/70/76 | 10 مل/100 مل/200 مل/500 مل |
| ركيزة SuperSignal MaxiSignal ذات الحساسية القصوى | 36224ES10/60/70/76 | 10 مل/100 مل/200 مل/500 مل |