1. مقدمة الخلفية
ستريبتافيدين هو بروتين مرتبط بالبيوتين مشتق من Streptomyces avidinii. ارتباطه غير النوعي أقل بكثير من ارتباطه بالأفيدين، وبالمقارنة مع الأفيدين في بياض البيض، والذي يحمل شحنة موجبة صافية عند درجة حموضة محايدة ويحتوي على حوالي 7% من الكربوهيدرات، فإن الستربتافيدين يتمتع بخصائص كيميائية أكثر ملاءمة مثل عدم وجود شحنة صافية تقريبًا عند درجة حموضة محايدة وعدم وجود كربوهيدرات. لذلك، يتم استخدامه على نطاق واسع كبديل للأفيدين.
2. مميزات المنتج
بنية رباعية:يوجد الستربتافيدين على شكل رباعي متماثل بحجم 66 كيلو دالتون؛
تقارب عالي:يمكن لكل جزيء من الستريبتافيدين أن يرتبط بشكل محدد للغاية بأربع جزيئات من البيوتين، مع وجود تقارب قوي للغاية بينهما؛
تطبيقات واسعة: إن ثابت تفكك مركب ستربتافيدين-بيوتين يقع في نطاق النانومول، وهي خاصية تستخدم عادة في تطبيقات البيولوجيا الجزيئية؛ وفي معظم التطبيقات، يمكن استخدامه بالتبادل مع بروتينات الأجسام المضادة؛
استخراج عالي الجودة:تم الحصول عليها عن طريق التنقية من ستربتوميسس افيديني؛
الشكل 1. ستريبتافيدين
منتج طلب
التطبيق 1: راتينج منقى باستخدام ستريبتافيدين
1) مبدأ التطبيقبناءً على التفاعل بين الستربتافيدين والبيوتين، يرتبط الستربتافيدين بشكل كبير بأجاروز 6%، وتمنحه عملية التحضير الفريدة خصائص فيزيائية وكيميائية أعلى، مما يسمح له بتحمل ضغوط أعلى. يمكنه تحقيق تنقية البروتين المستهدف بمعدلات تدفق عالية نسبيًا، مما يجعله أكثر ملاءمة لتنقية البروتين الصناعي على نطاق واسع.
الشكل 2. مبدأ تنقية راتنج ستريبتافيدين
2）تلتزم Yeasen بتزويدك بمنتجات عالية الكفاءة لتنقية البروتينات الأكثر مثالية لك.
الشكل 3. البروتين المنقى بواسطة راتنج ستريبتافيدين
3) الأسئلة الشائعة| سؤال | سبب محتمل | الحل الموصى به |
| الضغط الخلفي للعمود مرتفع جدًا | تم حظر التعبئة | تنظيف الراتينج. |
| يحتوي محلول التحلل على جزيئات صلبة صغيرة، ويوصى بترشيحها باستخدام غشاء تصفية 0.22 ميكرومتر أو 0.45 ميكرومتر قبل التحميل، أو استخدام أجهزة الطرد المركزي لإزالتها. | ||
| العينة لزجة جدًا. | تحتوي العينة على تركيز عالٍ من الأحماض النووية، قم بتمديد وقت التحلل حتى يتم تقليل اللزوجة، أو أضف DNase I (التركيز النهائي 5 ميكروجرام/مل)، Mg2+ (التركيز النهائي 1 مليمول)، احتضنه على الثلج لمدة 10-15 دقيقة | |
| المخزن المؤقت لزج للغاية | قد تتسبب الكواشف العضوية أو كواشف تثبيت البروتين (مثل الجلسرين وما إلى ذلك) في زيادة الضغط الخلفي وتقليل معدل التدفق التشغيلي. | |
| بروتين بلا غرض في مكون الإيلوشن | يؤدي الانقسام المفرط إلى تحلل البروتين المطلوب | استخدم ظروف انحلال معتدلة. تعتمد الظروف التجريبية على الخبرة. |
| يتجمع البروتين المستهدف لإنتاج الترسيب | أضف DTT إلى محلول ما قبل تحلل الخلايا بتركيز نهائي يتراوح من 1 إلى 10 مليمولار. | |
| لم يتم إخراج البروتين المستهدف بالكامل | حجم الايلوشن صغير جدًا | زيادة حجم المحلول المذيب وتقليل معدل تدفق المحلول المذيب. |
| يتغير الرقم الهيدروجيني لمحلول الإيلوشن | استخدم المستحضر الطازج | |
| وقت حضانة المذيب غير كافي | زيادة وقت حضانة محلول الإيلوشن مع الجل. |
التطبيق 2: المجموعة الفلورية والمقترن الإنزيمي المسمى ستريبتافيدين.
الشكل 4. ستريبتافيدينات مترافقة مختلفة
1) ستريبتافيدينات مترافقة مع الإنزيم- ستريبتافيدين مترافق مع بيروكسيديز الفجل الحار (HRP)
1. يتم إنتاجه من خلال ستريبتافيدين عالي النقاء وبيروكسيديز الفجل من خلال تقنية اقتران خاصة؛
2. يحافظ على النشاط النوعي العالي للبيروكسيديز. التطبيقات: المناعة النسيجية (IHC)، المناعة الخلوية (ICC)، التهجين الموضعي (ISH)، إلخ.
التركيز الموصى به: 0.01-0.1 ميكروجرام/مل لـ WB (طريقة الكيمياء الضوئية)؛ 1-2 ميكروجرام/مل لـ ELISA، HC/ICC، WB (تطوير لون الركيزة)
- ستريبتافيدين مترافق مع الفوسفاتيز القلوية (AP)
1. مناسب لتحليل الطور الصلب، وأنظمة تلوين الأنسجة/الخلايا، وتطبيقات اللطخة، مع ارتباط تساهمي محدد؛
2. المركب مستقر وفعال للغاية.
التطبيقات: المناعة النسيجية (IHC)، والمناعة الخلوية (ICC)، واختبار البقع المناعية المرتبطة بالإنزيم (ELISPOT)، واختبار الممتص المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA)، والتهجين الموضعي (ISH)، وتطبيقات اللطخة.
التركيز الموصى به: 1-2 ميكروجرام/مل لـ ELISA وIHC/ICC؛ 0.1-1 ميكروجرام/مل لـ WB
2) ستريبتافيدينات مترافقة مع الفلوروفور- ستربتافيدين مترافق بالفلوريسين من فلور®
Ⅰ. يوصى به للمناعة الفلورية الروتينية؛
Ⅱ. عالي التنقية مع خصائص ربط غير محددة منخفضة للغاية؛
Ⅲ. تقارب عالي للبيوتين؛
التطبيقات: المناعة الفلورية (IF)، التهجين الموضعي (ISH)، التدفق الخلوي (Flow Cyt).
التركيز الموصى به: 0.5-2 ميكروجرام/مل (إذا لزم الأمر)
- صبغة DyLight™ ستريبتافيدين مترافقة
1.يمكن استخدامها للكشف عن الأجسام المضادة الثانوية البيوتينية والجزيئات الكبيرة الأخرى في تطبيقات المناعة الفلورية أو التهجين الموضعي أو التدفق الخلوي؛
Ⅱ. عالي التنقية مع خصائص ربط غير محددة منخفضة للغاية؛
Ⅲ.تقارب عالي للغاية للبيوتين؛
Ⅳ. ثبات ضوئي عالي، غير حساس لدرجة الحموضة، وفلورسنت أكثر سطوعًا؛
التطبيقات: المناعة الفلورية (IF)، التهجين الموضعي (ISH)، التدفق الخلوي (Flow Cyt).
التركيز الموصى به: 0.5-2 ميكروجرام/مل (إذا)
معلومات المنتج
| سلسلة المنتجات | رقم المنتج | اسم المنتج | مواصفة |
| ستريبتافيدين | 35099ES | ستريبتافيدين (مسحوق) | 100 ملغ/1 غرام |
| 35101ES | ستريبتافيدين (5 ملغ/مل) | 1 ملغ/5 ملغ/10 ملغ/100 ملغ/1 جرام | |
| ستريبتافيدينات مترافقة مع الإنزيم | 35105ES | ستريبتافيدين HRP | 100 ميكرولتر |
| 35106ES | AP ستريبتافيدين | 100 ميكرولتر | |
| ستريبتافيدين مُصنَّف فلوريًا | 35102ES | ستريبتافيدين داي لايت 405™ | 100 ميكرولتر |
| 35103ES | واي اس فلورالعلامة التجارية ستربتافيدين مترافق بـ 488 | 100 ميكرولتر | |
| 35104ES | واي اس فلورالعلامة التجارية 647-ستريبتافيدين مترافق | 100 ميكرولتر | |
| 35107ES | واي اس فلورالعلامة التجارية 584-ستريبتافيدين مترافق | 100 ميكرولتر | |
| 35108ES | ستريبتافيدين مترافق مع Cy3 | 1 ملغ | |
| سلسلة تنقية ستريبتافيدين | 20512ES | راتنج ستريبتافيدين أجاروز 6FF | 5 مل/5 مل×5/100 مل |
| 20513ES | عمود كروماتوغرافيا BiotSep Streptavidin 6FF، 1 مل | 1 مل/1 مل×5 | |
| 20514ES | عمود كروماتوغرافيا BiotSep Streptavidin 6FF، 5 مل | 5 مل/5 مل×5 |