خلفية

الترانسفيرين، المعروف أيضًا باسم الترانسفيرين (TRF، Tf)، مسؤول عن حمل الحديد الذي يمتصه الجهاز الهضمي والحديد الذي يطلقه تحلل خلايا الدم الحمراء. يدخل إلى نخاع العظم في شكل معقد ثلاثي التكافؤ من الحديد (Tf-Fe3+) لإنتاج خلايا الدم الحمراء الناضجة. يوجد الترانسفيرين بشكل أساسي في البلازما. يوفر الترانسفيرين في البلازما الحديد لمعظم أنسجة الجسم، بينما في المناطق التي لا يمكنه الوصول إليها، ينتج الترانسفيرين الذي تصنعه هذه الأنسجة نفسها نقل الحديد في المنطقة المحلية.

الشكل 1. بنية الترانسفيرين

يتم تصنيع الترانسفيرين البشري بشكل أساسي في الكبد. وهو عبارة عن جليكوبروتين أحادي السلسلة يتكون من فصين يقعان عند الطرف الأميني المتماثل والطرف الكربوكسيلي. يحتوي الترانسفيرين البشري على 678 بقايا حمض أميني، ونقطة كهربية تساوي 5.9، ووزن جزيئي 76 كيلو دالتون. يمكن لكل جزيء من الترانسفيرين أن يحمل أيونين ثلاثيي التكافؤ من الحديد (Fe)³⁺). التفاعل بين الترانسفيرين والحديد³⁺ يعتمد على الرقم الهيدروجيني. عند الرقم الهيدروجيني 7.4، يرتبط الترانسفيرين وFe3+ بكفاءة، وينفصل الاثنان عند الرقم الهيدروجيني الحمضي.

وجود

الترانسفيرين المشبع جزئيًا، الترانسفيرين المشبع جزئيًا، الترانسفيرين الأبوي

الآليات الوظيفية

يرتبط الترانسفيرين (Tf) بالحديد عن طريق التفاعل مع مستقبله، مستقبل الترانسفيرين 1 (TfR1). TfR1 هو جليكوبروتين يتم التعبير عنه على سطح الخلية، ويتكون من وحدتين فرعيتين متماثلتين متصلتين بروابط ثنائية الكبريتيد. على سطح الخلية، يتفاعل Tf مع Fe3+ لتكوين holo-Tf، ويرتبط بمستقبل TfR1، ويدخل إلى الجسيم الداخلي عن طريق البلعمة الذاتية. في بيئة الجسيم الداخلي الحمضية، ينفصل Fe3+ عن Tf، ويختزل STEAP3 Fe3+ إلى Fe2+، والذي يتم نقله إلى السيتوبلازم عن طريق ناقل أيونات المعادن ثنائي التكافؤ 1 (DMT1). بعد ذلك، يشكل Tf الذي يطلق Fe3+ معقد Tf/TfR1 مع TfR1 ويهاجر مرة أخرى إلى سطح الخلية عن طريق الطرد الخلوي. على سطح الخلية، ينفصل الترانسفيرين (Tf) عن المستقبل TfR1 ليصبح apo-Tf، ثم يرتبط مرة أخرى بـ Fe3+ للمشاركة في دورة الحديد. بعد اكتمال العملية بالكامل، يتم إعادة تدوير Tf وTfR1 ويدخلان الدورة التالية من امتصاص الحديد الخلوي.

الشكل 2. مخطط آلية دورة الترانسفيرين^[1]

الوظيفة الرئيسية للترانسفيرين

1. تجنب تكوين الجذور الحرة وحماية نمو الخلايا.
2. مضاد للبكتيريا، معقم، مزيل للسموم
3. الحفاظ على تكاثر الخلايا ونموها
4. يعزز تخزين الحديد ونقله خارج الخلايا

مصادر الترانسفيرين

	مصدر	أمان	اختلافات الدفعة
الترانسفيرين المستخرج طبيعيا	مستخلص من بلازما الإنسان والابقار	سلامة ضعيفة، المنتج النهائي قد يحتوي على مسببات الأمراض	يتم استخلاص الترانسفيرين من دفعات مختلفة من مصل الإنسان أو مصل البقر، ويختلف أداؤه بشكل كبير
الترانسفيرين المؤتلف	يتم التعبير عنها من الخلايا البدائية والحقيقية النواة	سلامة جيدة، المنتج النهائي لا يحتوي على مسببات الأمراض	يتم التعبير عن كل دفعة باستخدام نفس خط الخلية، مع أداء مستقر

مميزات المنتج

سلامة جيدة: لقد اجتاز المنتج طبقات متعددة من فحص الجودة والاختبار، مما أدى إلى تجنب التلوث بالمسببات المرضية؛

سمية منخفضة: السمية الخلوية منخفضة جدًا وليس لها تأثير على التجارب اللاحقة؛

أداء مستقر: يتم التعبير عن كل دفعة من نفس سلالة الخلايا، مع اختلافات طفيفة في الأداء ونقاء بروتيني عالي

سهل التشغيل: أضف المنتج إلى القاعدة ببساطة؛

قابلة للتطبيق على نطاق واسع: يمكن استخدامها لزراعة أنواع مختلفة من الخلايا.

التعليمات

س1: هل يجب إضافة الترانسفيرين المستخرج أو الترانسفيرين المعاد تركيبه إلى وسط الثقافة الخالي من المصل؟

ج: يحتوي الترانسفيرين المستخرج على عيوب مثل ضعف السلامة والاختلافات الكبيرة بين الدفعات. وعلى وجه الخصوص، عندما يُضاف الترانسفيرين المستخرج إلى وسط زراعة خالٍ من المصل لزراعة الخلايا، فقد يؤدي ذلك إلى إدخال مسببات الأمراض البشرية أو الحيوانية (مثل فيروس مرض جنون البقر وفيروس كروتزفيلد جاكوب ومسببات الأمراض غير المعروفة الأخرى) إلى الخلايا وتلويثها. يتجنب الترانسفيرين المعاد التركيب تمامًا احتمالية تلوث الخلايا بمسببات الأمراض، لذلك يجب إضافة الترانسفيرين المعاد التركيب إلى وسط زراعة خالٍ من المصل.

س2: هل يجب إضافة الترانسفيرين المشبع بالحديد (Holo) أو الترانسفيرين الأبو (Apo) إلى وسط الثقافة؟

ج: عندما لا يحتوي وسط الثقافة على الحديد أو يكون محتوى الحديد منخفضًا، اختر إضافة الترانسفيرين المشبع بالحديد (Holo)؛ عندما يكون وسط الثقافة غنيًا بالحديد، اختر apo transferrin.

س3: ما هو الأفضل، الترانسفيرين المشبع بالحديد (Holo) أم الترانسفيرين الأبو (Apo)؟

ج: من المستحيل استنتاج تأثير الاثنين نظريًا، ويتطلب الأمر إجراء اختبار تجريبي.

س4: ما هو تركيز الترانسفيرين في وسط الثقافة الخالي من المصل؟

الإجابة: تركيز الترانسفيرين مرتبط بنوع الخلية. التركيز النوعي مرتبط بحالة الخلية وتركيزها والغرض التجريبي.الخلايا الأولية العامة: 5-100 مجم/لتر؛ خلايا مبيض الهامستر الصيني: 10-50 مجم/لتر؛ خلايا هجينة وخلايا فيرو: 5-20 مجم/لتر

معلومات الطلب

اسم المنتج	رقم المنتج	مواصفة
الترانسفيرين البقري ((APO) منظمة غير ربحية	40102ES60/80	100 ملجم
الترانسفيرين البقري (HOLO)	40103ES60/80	100 ملغ/1 جرام
الترانسفيرين البشري (المشتق من البلازما البشرية)	40133ES60/76/80	100 ملغ/500 ملغ/1 جرام
الترانسفيرين البشري المؤتلف	92288ES60/76/80	100 ملغ/500 ملغ/1 جرام
بروتين الأبو ترانسفيرين البشري المعاد تركيبه	92289ES60/76/80	100 ملغ/5