Cellekultur er en hjørnesten i mange forskningsapplikationer, fra lægemiddeludvikling til genterapi. Men det kan være udfordrende at opretholde sunde, prolifererende kulturer uden den rigtige tilgang og værktøjer. Uanset om du er en erfaren videnskabsmand eller ny til cellekultur, kan optimering af hvert trin i processen gøre hele forskellen. I denne guide vil vi lede dig gennem fem vigtige tips til at sikre, at dine cellekulturer trives, fra fordøjelse til forebyggelse af kontaminering.
1. Perfektion af din cellefordøjelse
Cellefordøjelse er et afgørende trin i cellekultureksperimenter, der letter frigørelsen af celler fra kulturoverfladen og deres adskillelse i en enkeltcellesuspension til subkultur og efterfølgende analyser. Valg af det rigtige fordøjelsesenzym kan forbedre celleadskillelseseffektiviteten, reducere celleskader og sikre glatte eksperimentelle fremskridt. For at hjælpe dig med at vælge det bedst egnede fordøjelsesenzym til dine behov, har vi udarbejdet en guide om flere almindeligt anvendte enzymprodukter og deres egenskaber. Du kan vælge det mest passende produkt baseret på celletypen, eksperimentelle krav og downstream-applikationer.
Almindelige fordøjelsesenzymer
- Trypsin (bruges til at hydrolysere intercellulære proteiner)
- Rekombinant trypsin (fri for forurening fra animalsk oprindelse, velegnet til biofarmaceutiske anvendelser)
- Kollagenase (bruges til at nedbryde kollagenfibre, ideel til vævsfordøjelse)
- Komposittrypsin (såsom Accutase, som bedre bevarer celleoverfladeantigener)
- Trypsin-alternativer (såsom TrypLE™, perfekt til serumfri cellekulturer)
- Dispase II (til adskillelse af forskellige væv og celler).
Hvert enzym har sine unikke anvendelser og fordele, og at vælge det rigtige kan forbedre den eksperimentelle effektivitet og kvaliteten af dine resultater markant.
| Produktnavn | Kattenummer | Specifikation |
| PerfCel™l Trypsin-EDTA (0,25%), ingen Fenol rød | 40123ES60 | 100 ml |
| PerfCell™ Trypsin-ingen EDTA (0,25%), ingen phenolrød | 40124ES60 | 100 ml |
| PerfCell™ Trypsin (0,25%), phenolrød | 40126ES60 | 100 ml |
| PerfCell™ Trypsin-EDTA (0.25%), phenolrød | 40127ES60 | 100 ml |
| Trypsin 1:250 (pulver) | 40101ES25 | 25 g |
| PerfCell™ Rekombinant trypsin(pulver） | 40512ES10/60 | 10 mg/100 mg |
| 20416ES60 | 100 μg | |
| PerfCel Tryzyme™ Express Enzyme (1X), phenolrød | 40134ES60 | 100 ml |
| PerfCel Tryzyme™ Express Enzyme (1X), ingen Fenol rød | 40135ES60 | 100 ml |
| ACCUTASE Celledissociationsopløsning | 40506ES60 | 100 ml |
| Dispase II | 40104ES60/80 | 100 mg/1 g |
2. At skabe det ideelle kulturmiljø
En sund kultur begynder med det rigtige miljø. Dette inkluderer en passende temperatur, pH og optimale medier til din celletype. Yeasen tilbyder en række cellekulturmedier, der er specielt formuleret til at understøtte en række cellelinjer, der giver dem de essentielle næringsstoffer og vækstfaktorer, de har brug for.
Serumfri cellekultur er opstået som en central teknologi inden for biologisk forskning, der sikrer repeterbarhed, konsistens og etiske standarder. Traditionelle cellekulturer er afhængige af føtalt bovint serum (FBS), som medfører variation i forsøgsresultater og etiske risici ved animalsk oprindelse. For at løse disse udfordringer vælger mange forskere i stigende grad serumfrie dyrkningsmedier.
I immunologisk forskning, lymfocytkultur spiller en afgørende rolle, især inden for områderne immunrespons, vaccineudvikling og cancerimmunterapi. Som centrale komponenter i immunsystemet kræver lymfocytter specifikke dyrkningsbetingelser for at proliferere og aktiveres in vitro. Yeasen leverer kulturmedier designet specifikt til lymfocytproliferation og -aktivering, som nøjagtigt kan simulere in vivo immunresponser og hjælpe forskere med at opnå mere pålidelige data inden for T-celleaktivering, antistofproduktion og cellulær immunologiforskning.
Desuden organoid kultur repræsenterer endnu et vigtigt fremskridt inden for cellekulturteknologi. Organoider er tredimensionelle cellulære strukturer, der kan simulere menneskelige væv og organfunktioner in vitro, hvilket giver en ny forskningsplatform for sygdomsmodellering, lægemiddelscreening og regenerativ medicin. Den tredimensionelle struktur af organoider replikerer bedre kompleksiteten og fysiologiske funktioner af menneskelige organer og er blevet et vigtigt værktøj til at studere organudvikling, sygdomsmekanismer og terapeutiske reaktioner.
| Produktnavn | Kattenummer | Specifikation |
| CelCulSF™ Insektcellekulturmedium(Serumfri） | 40140ES | 1000 ml |
| CelCulSF™ 293 cellekulturmedium(Serumfri） | 40141ES | 1000 ml |
| CelCulSF™ lymfocytkulturmedium(Serumfri） | 40142ES | 1000 ml |
| CelCulSF™ Hybridoma Cellekulturmedium(Serumfri） | 40143ES | 1000 ml |
| CelCulSF mesenkymal stamcelle(MSC）Kultur medium(Serumfri） | 40144ES | 500 ml |
| CelCulSF™ Adhærent cellekulturmedium(Serum-reduceret） | 40145ES | 1000 ml |
| Cebrary® Intestinal organoid vækstmedium (mus) | 41426ES60/76 | 100/500 ml |
| Cebrary® Organoid vækstmedium for tarmkræft (menneske) | 41427ES50/60/76 | 50/l00/500 ml |
| Cebrary® Mavekræft organoid vækstmedium (menneske) | 41428ES50/60/76 | 50/l00/500 ml |
| Cebrary® Organoid vækstmedium for leverkræft (menneske) | 41429ES50/60/76 | 50/l00/500 ml |
| Cebrary® Organoid vækstmedium for brystkræft (menneske) | 41430ES50/60/76 | 50/l00/500 ml |
| Cebrary® Organoid vækstmedium for lungekræft (menneske) | 41431ES50/60/76 | 50/l00/500 ml |
| Cebrary® Esophageal Kræftorganoid vækstmedium (menneske) | 41432ES50/60/76 | 50/l00/500 ml |
| Cebrary® Kræft i æggestokkene Organoid vækstmedium (menneske) | 41433ES50/60/76 | 50/l00/500 ml |
| Cebrary® Bugspytkirtelkræft Organoid vækstmedium (menneske) | 41434ES50/60/76 | 50/l00/500 ml |
3.Effektiv transfektion til højkvalitets genekspression
Celletransfektion er en afgørende teknik i biomedicinsk forskning, der muliggør introduktion af eksogene nukleinsyrer (såsom DNA, mRNA, siRNA og miRNA) i celler til genekspression, lyddæmpning eller funktionelle undersøgelser. Med forskellige celletyper og nukleinsyrer er valg af det rigtige transfektionsreagens afgørende for vellykkede eksperimenter.
Kemiske transfektionsreagenser, herunder liposomale, PEI- og calciumphosphatbaserede formuleringer, hver tilbyder unikke fordele. Yeasen Biology har udviklet en mangfoldig produktlinje optimeret til forskellige transfektionsapplikationer, herunder højeffektiv transfektion for DNA, siRNA, miRNA og mRNA, med verificeret succes på tværs af over 40 cellelinjer. Disse reagenser tilbyder høj transfektionseffektivitet, brede anvendelsesscenarier og GMP-produkter til kommerciel produktion, hvilket sikrer pålidelige og effektive resultater i forskning og industrielle applikationer.
| Kattenummer | Produktnavn | Nukleinsyre | Anvendelse |
| 40802ES | DNA | Højtydende liposomtransfektionsreagens | |
| 40804ES | LV | Forbedre lentiviral infektionsevne. | |
| 40806ES | siRNA, miRNA, ASO | siRNA- og miRNA-specifikke transfektionsreagenser med høj knockdown-effektivitet. | |
| 40808ES | DNA, siRNA, miRNA | Opgraderet liposomtransfektionsreagens, der kan udføre DNA- og RNA-transfektioner i forskellige celletyper, som stadig viser gode effekter på vanskelige at transficere celler. | |
| 40809ES | mRNA | mRNA-specifikt transfektionsreagens med høj transfektionseffektivitet i en række celletyper. | |
| 40815ES | DNA | Bredt anvendelig til proteinekspression og viral pakning (pulverform). | |
| 40816ES | Hieff Trans®Polyethylenimin Lineær (PEI) MW40000(hurtig lyse） | DNA | |
| 40820ES | DNA | Dedikerede transfektionsreagenser til viral pakning, i stand til at opnå højere udbytter for AAV og LV viral pakning | |
| 40821ES | DNA | ||
| 40823ES | DNA | Den højeste transfektionseffektivitet. Særligt velegnet til produktion af AAV i suspensionskultur, hvilket giver højere output. |
4. Kryopbevaring af dine celler til langtidsbrug
Cellefrysning er en afgørende teknik til langtidsbevaring af celler, der tjener formål som at forhindre kontaminering, opretholde eksperimentel konsistens, lette forsendelse og etablere cellebanker. De primære risici under frysning omfatter iskrystaldannelse og opløsningsskader. For at afbøde disse risici er det vigtigt at anvende protokoller for langsom frysning og hurtig optøning. Kryobeskyttelsesmidler som glycerol eller dimethylsulfoxid (DMSO) bruges almindeligvis til at reducere iskrystaldannelse og osmotisk stress.
Yeasen tilbyder to specialiserede kryokonserveringsløsninger: CellStore Freezing til pattedyrsceller og Insect Cell Store Freezing til insektceller. Begge produkter har unikke formuleringer, der tillader direkte frysning ved -70°C uden komplekse afkølingsprocedurer og giver høje celleoverlevelsesrater ved optøning, især for celler, der er følsomme over for DMSO eller har tendens til at klumpe. Disse opløsninger er fri for serum- eller proteinkomponenter og sikrer ingen kontaminering fra kvægkilder og er ideelle til serumfrie kulturer.
| Produktnavn | Kattenummer | Specifikation |
| Pattedyr CellStore Frysning | 40128ES50 | 5×10 ml |
| Pattedyr CellStore Frysning | 40128ES60 | 100 ml |
| Insektcelle Store Frysning | 40129ES50 | 5×10 ml |
| Insektcelle Store Frysning | 40129ES60 | 100 ml |
| Serumfrit cellefrysemedium | 40151ES | 50 ml/100 ml |
| Serumfrit cellefrysemedium (DMSO-frit) | 40152ES | 100 ml |
| Serumfrit cellefrysemedium (til stamceller) | 40153ES | 100 ml |
| Serumfrit cellefrysemedium (til stamceller, DMSO-frit) | 40154ES | 100 ml |
5. Forebyggelse af kontaminering for sunde kulturer
Kontaminering er et udbredt problem i cellekultur, hvilket ofte fører til kompromitterede resultater og spildte forskningstid. At erkende de forskellige typer forurening er afgørende for effektiv forebyggelse og afhjælpning.
Fælles celle forurenende stoffer
- Bakterie
- Svampe
- Mycoplasma
- Protozoer
- sorte pletter
- Virus
- på tværs af arter
Forebyggende foranstaltninger omfatter brug af antibiotika, regelmæssig desinfektion af udstyr, overholdelse af sterile teknikker og vedligeholdelse af rene arbejdsområder. Ved påvisning af kontaminering er det generelt tilrådeligt at kassere de berørte kulturer, medmindre de er sjældne eller værdifulde; i sådanne tilfælde bør der tages skridt til at fjerne forureningen. Det anbefales at etablere backup-cellelinjer eller anskaffe nye kulturer.I visse situationer kan specialiserede behandlinger rettet mod specifikke kontaminanter hjælpe med at genoprette cellekulturer. Opretholdelse af ordentlig hygiejne, sikring af streng adskillelse af udstyr og opretholdelse af et sterilt miljø er afgørende for at forhindre kontaminering og sikre vellykkede cellekultureksperimenter.
| Type | Produktnavn | Kattenummer | Specifikation |
| Antibakteriel | Penicillin-Streptomycin (100×), Velegnet til cellekultur | 60162ES76 | 100 ml |
| 60230ES07/60 | 3.2/100 g | ||
| Gentamycin sulfat salt | 60214ES03/08/25 | 1/5/25 g | |
| Metronidazol | 60223ES25/60 | 25/100 mg | |
| Antifungal | Amphotericin B | 60238ES01/03 | 100 mg/1 g |
| Nystatin | 60219ES08 | 5 g | |
| 60231ES03/08 | 1/5 mg | ||
| Mycoplasma påvisning | 40601ES10/20 | 10/20 assays | |
| 40612ES25/60 | 25/100 T | ||
| Mycoplasma fjernelse | MycAway™ Spray (klar til brug) | 40605ES02/03/08 | 1/2/10×500 ml |
| MycAway™ Behandling (1000×) - Mycoplasma Elimination Reagens | 40607ES03/08 | 1/5 ml | |
| MycAway™ Profylaktisk (2000×) - Mycoplasma forebyggelsesreagens | 40608ES03/08 | 1/5 ml | |
| 40609ES60 | 100 ml | ||
| 40610ES60 | 100 ml |
Konklusion
Optimering af cellekulturprocesser er afgørende for at producere pålidelige, reproducerbare resultater.Fra at vælge de rigtige enzymer til fordøjelsen til at forhindre kontaminering, er hvert trin i arbejdsgangen vigtigt. Ved at inkorporere højkvalitetsreagenser og -teknikker fra Yeasen kan du opnå sundere, mere produktive cellekulturer, hvilket fører til mere succesfulde eksperimenter og forskningsresultater.
Vil du lære mere?
Besøg vores hjemmeside for detaljerede produktvejledninger og flere løsninger til at forbedre dine cellekulturarbejdsgange. Uanset om du har brug for enzymer, medier, transfektionsreagenser eller kontamineringskontrol, har Yeasen alt hvad du behøver til blomstrende cellekulturer.
For mere information eller køb, besøg vores officielle hjemmeside.