Baggrund
Transferrin, også kendt som transferrin (TRF, Tf), er ansvarlig for at transportere jern absorberet af fordøjelseskanalen og jern frigivet ved nedbrydning af røde blodlegemer. Det kommer ind i knoglemarven i form af trivalent jernkompleks (Tf-Fe3+) til produktion af modne røde blodlegemer. Transferrin er hovedsageligt til stede i plasma. Transferrinet i plasma leverer jern til de fleste væv i kroppen, mens i områder, som det ikke kan nå, producerer transferrinet, der syntetiseres af disse væv selv, jernoverførsel i lokalområdet.
Figur 1. Struktur af transferrin
Humant transferrin syntetiseres hovedsageligt i leveren. Det er et enkeltkædet glycoprotein sammensat af to lapper placeret ved den homologe N-terminale og C-terminale ende. Humant transferrin indeholder 678 aminosyrerester, et isoelektrisk punkt på 5,9 og en molekylvægt på 76 kD. Hvert molekyle af transferrin kan bære 2 trivalente jernioner (Fe3+). Interaktionen mellem transferrin og Fe3+ afhænger af pH. Ved pH 7,4 binder transferrin og Fe3+ effektivt, og de to adskilles ved sur pH.
Eksistens
Holo-Transferrin 、Delvist mættet transferrin、Apo-Transferrin
Funktionelle mekanismer
Transferrin (Tf) binder jern ved at interagere med dets receptor, Transferrin Receptor 1 (TfR1). TfR1 er et glycoprotein udtrykt på celleoverfladen, sammensat af to homodimere underenheder forbundet med disulfidbindinger. På celleoverfladen interagerer Tf med Fe3+ for at danne holo-Tf og binder til TfR1-receptoren og kommer ind i endosomet under endocytose. I det sure endosommiljø adskilles Fe3+ fra Tf, og STEAP3 reducerer Fe3+ til Fe2+, som transporteres til cytoplasmaet af divalent metaliontransporter 1 (DMT1). Derefter danner Tf, der frigiver Fe3+, et Tf/TfR1-kompleks med TfR1 og migrerer tilbage til celleoverfladen gennem exocytose. På celleoverfladen adskilles transferrin (Tf) fra receptoren TfR1 og bliver til apo-Tf, og binder derefter igen med Fe3+ for at deltage i jerncyklussen. Efter at hele processen er afsluttet, genbruges Tf og TfR1 og går ind i den næste cyklus med cellulær jernoptagelse.
Figur 2. Mekanismediagram af transferrincyklus[1]
Transferrins hovedfunktion
- Undgå dannelsen af frie radikaler og beskyt cellevækst.
- Antibakteriel, steriliserende, afgiftende
- Oprethold celleproliferation og vækst
- Fremmer ekstracellulær jernlagring og transport
Kilder til transferrin
| Kilde | Sikkerhed | Batch forskelle | |
| Naturligt ekstraheret transferrin | Ekstrakt fra humant og bovint plasma | Dårlig sikkerhed, slutproduktet kan indeholde patogener | Transferrin udvindes fra forskellige partier af humant serum eller bovint serum, og dets ydeevne varierer meget |
| Rekombinant transferrin | Udtrykt fra prokaryote og eukaryote celler | God sikkerhed, slutproduktet indeholder ikke patogener | Hver batch udtrykkes ved hjælp af den samme cellelinje med stabil ydeevne |
Produktegenskaber
God sikkerhed: Produktet har bestået flere lag af kvalitetsinspektion og -testning og undgår kontaminering med patogener;
Lav toksicitet: Cytotoksiciteten er meget lav og har ingen indflydelse på efterfølgende forsøg;
Stabil ydeevne: Hver batch er udtrykt fra den samme cellelinje med minimale præstationsforskelle og høj proteinrenhed
Let at betjene: blot tilføje produktet til basen;
Bredt anvendelig: kan bruges til dyrkning af forskellige typer celler.
FAQ
Q1: Skal ekstraheret transferrin eller rekombinant transferrin tilsættes til serumfrit dyrkningsmedium?
A: Ekstraheret transferrin har defekter såsom dårlig sikkerhed og store batch-til-batch forskelle. Især når ekstraheret transferrin tilsættes til serumfrit dyrkningsmedium til cellekultur, kan det bringe humane eller animalske patogener (såsom kogalskabsvirus, Creutzfeldt-Jakob-virus og andre ukendte patogener) ind i cellerne og kontaminere celler. Rekombinant transferrin undgår fuldstændigt muligheden for patogenkontamination, så rekombinant transferrin bør tilsættes til serumfrit dyrkningsmedium.
Q2: Skal jernmættet (Holo) transferrin eller apo (Apo) transferrin tilsættes til dyrkningsmediet?
A: Når dyrkningsmediet ikke indeholder jern eller jernindholdet er lavt, skal du vælge at tilføje jernmættet (Holo) transferrin; når dyrkningsmediet er rigt på jern, skal du vælge apo transferrin.
Q3: Hvilken er bedre, jernmættet (Holo) transferrin eller apo (Apo) transferrin?
A: Det er umuligt at udlede effekten af de to teoretisk, og eksperimentel test er påkrævet.
Q4: Hvad er koncentrationen af transferrin i serumfrit dyrkningsmedium?
Svar: Koncentrationen af transferrin er relateret til celletypen. Den specifikke koncentration er relateret til celletilstanden, cellekoncentrationen og eksperimentelt formål.Generelle primære celler: 5-100 mg/L; kinesisk hamster ovarieceller: 10-50 mg/L; hybridom- og Vero-celler: 5-20 mg/L
Bestillingsoplysninger
| Produktnavn | Produktnummer | Specifikation |
| 40102ES60/80 | 100 mg | |
| Bovin transferrin (HOLO) | 40103ES60/80 | 100 mg/1 g |
| Human transferrin (afledt af humant plasma) | 40133ES60/76/80 | 100 mg/500 mg/1 g |
| 92288ES60/76/80 | 100 mg/500 mg/1 g | |
| 92289ES60/76/80 | 100 mg/5 |