El cáncer asociado a colitis (CAC) es el tercer tumor maligno más común en el mundo, con una morbilidad y mortalidad superadas por el cáncer gástrico y hepático.[1]La enfermedad inflamatoria intestinal (EII) puede aumentar la probabilidad de desarrollar cáncer colorrectal. La combinación de AOM y DSS ha ganado popularidad debido a su reproducibilidad, potencia, bajo costo y facilidad de uso. Este artículo destaca un protocolo para la creación de modelos DSS-AOM para estudiar la oncogénesis de los CAC.
Modelo animal
Ratones BALB/c (7 semanas de edad, machos)
Material
DSS (Yeasen #60316ES,MW36000-50000), AOM (Yeasen#60751ES)
Preparación de la solución
Agua potable suplementada con DSS: Utilice agua esterilizada para preparar una solución de DSS al 1-3 %. Almacene a 4 °C hasta su uso.
Solución de AOM: disuelva AOM en agua para inyección para obtener una solución madre de 10 mg/ml. Congelar a -20 °C. Evitar ciclos repetidos de congelación y descongelación. El día de uso, Descongelar alícuota y diluir 1/10 con solución salina estéril.
Protocolo
- El día 1, pesar y marcar los ratones. Inyectarles por vía intraperitoneal 10 mg/kg de solución de AOM.
- Llene el bebedero de las jaulas de los ratones con agua. Calcule entre 7 y 10 ml de agua por ratón por día. Alimentación durante una semana.
- Reemplace el agua potable con 2,5% DSS durante una semana;
- Alimente con agua potable habitual durante dos semanas;
- Repita los pasos 3 y 4 3 veces.
Fig. 1. Protocolo de modelado de cáncer colorrectal AOM/DSS
Resultados de un modelo CAC exitoso
Pérdida de peso con el tratamiento DSS
Fig. 2. Cambio en el peso corporal de los ratones.
2. Puntuación de diarrea y puntuación de sangrado
Fig. 3. Diarrea puntaje y puntuación de sangrado
3. Formación de tumores en colones de ratones.
Figura 4. Colon representativo en su totalidad y número de casos de cáncer de colon
Figura 5. Expresiones proteicas de COX-2, IL-6, β-catenina y caracol en modelos de ratón con colitis aguda y cáncer colorrectal inducido por azoximetano (AOM)/DSS (A) Se tiñeron secciones de colon con H&E y los anticuerpos indicados (B) La expresión proteica se examinó mediante transferencia Western con los anticuerpos indicados después de lisar los tejidos del colon de dos ratones de cada grupo, y se utilizó β-tubulina como control de carga[2].
Enlaces a este recurso
[1]Qun Wang, et al. El polisacárido de cártamo inhibe el cáncer colorrectal en ratones inducido por AOM/DSS a través de la regulación de la polarización de los macrófagos[J]. Fronteras en farmacología. 2021.761641[2]Jia-Rong Huang, et al. La piperlongumina alivia la enfermedad de los ratones Colitis y colitis asociada Colorrectal Cáncer[J].Fronteras en farmacología.2020.586885
Caso de éxito de modelado con Yeasen DSS
Yeasen ofrece alta calidad DSS (Cat. n.° 60316ES): pureza (98%), contenido de azufre 17-19%, azufre libre <0,2%, respaldado por una gran cantidad de datos bibliográficos.
Tabla 1 Construcción de modelos de diferentes tipos de enteritis con DSS
| Modelo | Muestras de modelado | Plan de modelado | Resultados del modelado | Utilizar evaluación |
| colitis aguda | Ratones BALB/c, hembras, 6-8 semanas, 25 g | Beber libremente entre un 3% y un 5% de DSS durante 7 días consecutivos | Apareció el día 5, la longitud del colon se acortó, la tinción HE y la inflamación eran evidentes. | La velocidad de moldeo es rápida y el tiempo es corto. Consistente con las características del modelo de colitis aguda. |
| Ratones C57BL/6, machos, 8 semanas, 20 g | 3%-5% DSS por sonda, administración continua | Se presenta el día 5, acortamiento del colon, pérdida de peso, sangre en las heces, diarrea. | Alta tasa de moho y corta duración. Consistente con las características del modelo de colitis aguda. | |
| colitis crónica | Ratón C57BL/6, macho, 8 semanas, 22 g | 1-2% DSS por sonda, administración continua | Aparece el día 40, acortamiento del colon, pérdida de peso, sangre en las heces, diarrea. | Alta tasa de moldeo. Consistente con las características del modelo de colitis crónica. |
| cáncer de colon | Ratón C57BL/6, macho, 8 semanas, 21 g | 1%-2% DSS ad libitum durante 5 días durante 3 semanas | 14 semanas con longitud de colon acortada, pérdida de peso, tinción HE e inflamación evidente | Alta tasa de moldeo. Consistente con las características del modelo de cáncer de colon. |
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| PAGproducto norteamo | AArtículo norteocre oscuro | Especificación |
| Sal sódica de sulfato de dextrano (DSS), grado de colitis, peso molecular: 36 000 ~ 50 000 | 60316ES25/60/76/80 | 25 g/100 g/500 g/1 kg |
| Azoximetano (OMA) | 60751ES03/08/10 | 1 mg/5 mg/10 mg |
| MolPure® Kit de ADN de heces | 18820ES08/50/70 | 5 toneladas/50 T/200 yo |
| MolPure® Kit de ADN de heces y suelos Mag48 FA | 18528ES48 | 48T |
| MolPure®Kit de ADN de suelo y heces de Mag | 18526ES20/50/70 | 20 T/50 T/200 yo |
| Kit de tinción de hematoxilina y eosina | 60524ES60 | 2 x 100 ml |
| Kit de prueba de sangre oculta en heces y orina | 60403ES60 | 100 toneladas |
| Solución de tinción con ácido peryódico de Schiff (AB-PAS) de azul alcián | 60534ES50/60 | 6×50 ml/6×100 ml/ |
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