Protocolo de modelado de lechones con colitis ulcerosa utilizando sulfato de sodio dextrán (DSS)
El aumento de la permeabilidad intestinal es uno de los factores etiológicos de la EII y, por lo tanto, puede utilizarse como biomarcador para evaluar la gravedad del daño en el intestino delgado y grueso. Se utilizó D-manitol, una pequeña molécula de carbohidrato inerte que puede absorberse a lo largo de todo el eje de las vellosidades de las criptas, para evaluar la permeabilidad intestinal in vivo.[1].
Figura 1. Lechón
1. Construcción de modelos
2. Resultados
3. Enlaces a este recurso
4. Caso de éxito de modelado con Yeasen DSS
5. Pedido de productos
6. Artículos publicados con nuestros reactivos
7. Considera la lectura
1. Construcción de modelos
1.1 Modelo animal
Lechones Yorkshire de 4-5 días de edad
1.2 Material
DSS (Yeasen #60316ES,MW36000-50000)
1.3 Protocolo
a) Los lechones Yorkshire se alojaron individualmente en corrales con suelo de metal y pisos de goma en una habitación con ciclo de luz/oscuridad controlado de 12 h. La temperatura ambiente se mantuvo a 26 ℃ y se complementó con una lámpara de calefacción;
b) Los lechones fueron alimentados con una dieta de fórmula de reemplazo de leche comercial tres veces al día, similar a su nivel de consumo ad libitum;
c) A los animales se les colocó quirúrgicamente un catéter intragástrico. El catéter se ancló a un parche de silicona (de aproximadamente 8 x 12 mm), que se suturó a la pared gástrica con aproximadamente 30 mm insertados dentro del lumen gástrico. A cada animal se le colocó un chaleco hecho a medida con un bolsillo dorsal para el almacenamiento temporal del segmento exterior del catéter;
d) Los animales se dividieron en un grupo de control positivo (Pos), un grupo de control negativo (Neg) y un grupo experimental (Trp);
e) Grupo control positivo (Pos): perfusión DSS (5 días) + solución salina (5 días); Grupo control negativo (Neg): perfundido con solución salina normal (10 días); Grupo experimental (Trp): infusión DSS (5 días) + fármacos terapéuticos (5 días);
f) Dosis de DSS: 1,25 g/kg, vía oral durante 5 días;
g) Al final del estudio, los animales fueron sedados mediante un anestésico inhalado, isoflurano, y sacrificados mediante inyección intracardíaca de etanol (pentobarbital) a 0,3 ml/kg de peso corporal (PC).
h) Los tejidos del colon se enjuagaron inmediatamente en solución salina fría (154 mM, pH 7,4) que contenía 0,1 mM de fluoruro de fenilmetilsulfonilo (PMSF) y se tomaron muestras para histología o se congelaron rápidamente en nitrógeno líquido para su posterior análisis.
2. Resultados
2.1 Análisis de la permeabilidad intestinal
Figura 2. La concentración de D-manitol inducida por DSS en lechones fue mayor que en el grupo de control.
La concentración de D-manitol inducida por DSS en lechones aumentó y se destruyó la barrera intestinal.
2.2 Sección de tinción patológica H&E
Figura 3. Sección de tinción patológica H&E (A: grupo Neg; B: grupo Pos)
La gravedad de la inflamación colónica se evaluó mediante puntuación de inflamación y mediciones histológicas.En el grupo Pos tratado con DSS, la estructura del receso se distorsionó, las células inflamatorias se infiltraron en la mucosa y la submucosa, se produjo un absceso del receso y se produjo una inflamación del receso.
2.3 Detección de factores inflamatorios
Figura 4. Detección de factores inflamatorios.
La concentración de dos citocinas en el grupo Pos tratado con DSS aumentó[1].
3. Enlaces a este recurso
[1]Connie J. Kim, et al. Revista de bioquímica nutricional 21 (2010) 468–475.
4. Caso de éxito de modelado con Yeasen DSS
Yeasen ofrece alta calidad Servicio de Seguridad Nacional (Cat#60316ES): pureza (98%), contenido de azufre 17-19%, azufre libre <0,2%, respaldado por una gran cantidad de datos de la literatura.
Tabla 1 Construcción de diferentes tipos de modelos de enteritis con DSS
Modelo | Muestras de modelado | Plan de modelado | Resultados del modelado | Utilizar evaluación |
colitis aguda | Ratones BALB/c, hembras, 6-8 semanas, 25 g | Beber libremente entre un 3% y un 5% de DSS durante 7 días consecutivos | El día 5 apareció La longitud del colon se acortó, la tinción HE y la inflamación eran evidentes. | La velocidad de moldeo es rápida y el tiempo es corto, acorde con las características del modelo de colitis aguda. |
Ratones C57BL/6, machos, 8 semanas, 20 g | 3%-5% DSS por sonda, administración continua | Se presenta el día 5, acortamiento del colon, pérdida de peso, sangre en las heces, diarrea. | Alta tasa de moho y corta duración. Consistente con las características del modelo de colitis aguda. | |
colitis crónica | Ratón C57BL/6, macho, 8 semanas, 22 g | 1-2% DSS por sonda, administración continua | Aparece el día 40, acortamiento del colon, pérdida de peso, sangre en las heces, diarrea. | Alta tasa de moldeo. Consistente con las características del modelo de colitis crónica. |
cáncer de colon | Ratón C57BL/6, macho, 8 semanas, 21 g | 1%-2% DSS ad libitum durante 5 días durante 3 semanas | 14 semanas con longitud de colon acortada, pérdida de peso, tinción HE e inflamación evidente | Alta tasa de moldeo. Consistente con las características del modelo de cáncer de colon. |
5. Pedido de productos
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Tabla 2. Orden de productos
Nombre del producto | Gato N° | Tamaño |
Sal sódica de sulfato de dextrano para modelar la colitis Peso molecular: 36000~50000 | 60316ES25 | 25 gramos |
60316ES60 | 100 gramos | |
60316ES76 | 500 gramos | |
60316ES80 | 1 kilogramo |
6. Artículos publicados con nuestros reactivos
[1]Li Zhao, Fei Wang, Zhengwei Cai, et al. Mejora de la plataforma de utilización de fármacos con hidrogel mucoadhesivo inyectable para el tratamiento de la colitis ulcerosa[J]. Revista de ingeniería química. 424 (2021) 130464. IF = 16,744
[2]Lingjun Tong, Haining Hao, Zhe Zhang, et al. Las vesículas extracelulares derivadas de la leche alivian la colitis ulcerosa al regular la inmunidad intestinal y remodelar la microbiota intestinal[J].Theranostics.2021; 11(17): 8570-8586 SI=11.556
[3]Li, Y., Dong, J., Xiao, H., Zhang, S., Wang, B., Cui, M. y Fan, S. El ácido valérico derivado de los comensales intestinales protege contra las lesiones por radiación. Gut Microbes, 2020 .1–18. IF=10.245
[4] Jingjing Gan, Yuxiao Liu, Lingyu Sun, et al. Partículas de administración oral de nucleótidos a partir de microfluidos para el tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal [J]. Applied Materials Today. Diciembre de 2021;25:101231 SI=10.041
[5] Mengmeng Xu, Ying Kong, Nannan Chen, et al. Identificación de la firma genética relacionada con el sistema inmunitario y predicción de la red CeRNA en la colitis ulcerosa activa [J]. Fronteras en inmunología. 2022; 13: 855645. SI=7,561
[6]JialiDong, YuanLi, HuiwenXiao, et al. La microbiota oral afecta la eficacia y el pronóstico de la radioterapia para el cáncer colorrectal en modelos de ratón[J]. Cell reports. 2021, 109886. IF=9.423
[7]Hao Yo, Zhang INCÓGNITA, Pinza Yo, Liu Q, et al.Lactobacillus plantarumEfecto de las vesículas extracelulares derivadas de Pregunta 7 sobre la microbiota intestinal y la colitis ulcerosa en ratones [J]. Frontiers in Immunology.2021.777147 .IF=7.561
[8]Yaohua Fan, Yanqun Fan, Kunfeng Liu, et al. El nido de pájaro comestible mejora la colitis ulcerosa inducida por sulfato de dextrán sódico en ratones C57BL/6J al restablecer el equilibrio de células Th17/Treg[J]. Fronteras en farmacología. 2021.632602. IF=7.561
[9]Jia-Rong Huang, Sheng-Te Wang, Meng-Ning Wei, et al.La piperlongumina alivia la colitis en ratones y el cáncer colorrectal asociado a la colitis[J].Fronteras en farmacología.2020.586885. SI=7,561
[10]Gao X, Fan W, Tan L, et al. Las isoflavonas de soja mejoran la colitis experimental al actuar sobre las vías del inflamasoma ERα/NLRP3[J]. The Journal of Nutritional Biochemistry, 2020, 83. IF=6.048
[11]Lujuan Xing, Lijuan Fu, Songmin Cao, et al. El efecto antiinflamatorio de los péptidos derivados de la gelatina ósea bovina en la AR inducida por LPSW264.7 Células de macrófagos y ratones C57BL/6 inducidos por sulfato de dextrán sódico [J]. Nutrients 2022, 14, 1479. SI=5,717
[12] Wang S, Huang Yo, Broncearse KANSAS, et al. El isosteviol sódico mejora la colitis crónica inducida por sulfato sódico de dextrán a través de la regulación del perfil metabólico, la polarización de los macrófagos y la vía NF-B[J]. Medicina oxidativa y longevidad celular. 2022,4636618. SI=5.076
7.Considerando la lectura
Establecimiento de un modelo de colitis ulcerosa con sulfato de sodio de dextrán (DSS)
Establecimiento de un modelo de cáncer asociado a colitis inducida por azoximetano (AOM) y sulfato de dextrán sódico (DSS)
Protocolo de modelado de colitis ulcerosa en Drosophila utilizando sulfato de sodio dextrán (DSS)
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