Los macrófagos desempeñan funciones únicas y fundamentales en diferentes partes del cuerpo; sin embargo, la eliminación precisa de los macrófagos se ha convertido en una herramienta de investigación clave para estudiar mejor las funciones específicas de los macrófagos en áreas específicas y su impacto en el desarrollo de enfermedades. Los liposomas de clodronato son una de las herramientas más probadas, rentables e ideales para la eliminación de macrófagos. Los liposomas de clodronato se pueden administrar por vía intraperitoneal, en la vena de la cola y de varias otras formas para eliminar los macrófagos de diferentes tejidos.
A continuación, compartiremos una serie de temas para demostrar los métodos y la efectividad de la eliminación de macrófagos en diferentes sitios, esperando proporcionar referencias y referencias útiles para los investigadores.
Introducción de métodos de inyección.
Inyección en la vena de la cola
La inyección en la vena de la cola alcanza su máximo agotamiento después de 24 horas. Se debe prestar atención al momento de detección.
1、Coloca los ratones en una lonchera invertida, saca la cola del orificio, hay dos arterias y tres venas en la cola de los ratones, dos Las arterias están en los lados dorsal y ventral de la cola, y las tres Las venas se distribuyen en forma de zigzag, generalmente se utilizan los lados izquierdo y derecho de las venas;
2、Remoje la gasa en agua tibia a aproximadamente 70 ℃ (o remójela en alcohol), sáquela y envuelva la cola, para lograr el propósito de vasodilatación de la cola y suavizar la queratina epidérmica;
3、Para la inyección intravenosa de la cola, con el pulgar y el índice izquierdos antes y después de sujetar la cola de la rata, dejando una sección de unos 2 cm, de modo que la piel esté tensa, las venas estén más llenas, la mano derecha sosteniendo una jeringa con aguja de 1 ml, de modo que la aguja y la vena estén paralelas (un ángulo inferior a 30 °), desde el 1/4 inferior de la cola hasta la aguja, el comienzo de la inyección del medicamento debe ser lento, observación cuidadosa, si no hay resistencia, no aparecen dermatomas blancos, significa que los vasos sanguíneos han sido perforados y se puede realizar una inyección formal de medicamentos.
4. Algunos experimentos requieren inyecciones repetidas en la vena de la cola durante varios días. El sitio de la inyección debe comenzar desde el extremo de la cola lo más lejos posible y avanzar hacia la raíz de la cola en secuencia, y cambiar la posición vascular para la inyección. Después de retirar la aguja, presione el sitio de la inyección con una bolita de algodón durante 1 minuto. - 2 minutos para detener el sangrado.
Inyección intraperitoneal
La inyección intraperitoneal alcanza su máxima depleción después de 48 horas. - 72 h. Se debe prestar atención a la detección de puntos temporales.
1、En primer lugar, utilice el método de rescate dorsal para atrapar a los ratones, de modo que sus cabezas estén ligeramente inclinadas hacia atrás y sus abdómenes hacia arriba, la extremidad trasera izquierda de los ratones se fija con el dedo meñique y luego el sitio de inyección se esteriliza con una bola de algodón con alcohol al 75%.
2、La ubicación de la inyección intraperitoneal en ratones es 0,5 cm a ambos lados de la línea media del abdomen inferior (a ras de la raíz del muslo). Para evitar lesiones en los órganos, la cabeza del ratón debe estar inclinada hacia atrás al sacarlo del apuro, de modo que los órganos del abdomen inferior se desplacen hacia arriba.
3、Perfore la aguja de la jeringa en la piel, ingrese al área subcutánea, empuje la aguja hacia adelante a lo largo del área subcutánea durante 2 minutos. - 3 mm y luego perforar la cavidad abdominal del ratón en un ángulo de 45 grados entre la aguja y la piel. Nota: Después de penetrar el peritoneo, la resistencia de la punta de la aguja desaparece.
4. Retire el tapón de la aguja; si no hay retorno de sangre o líquido, se puede inyectar el medicamento.
5、Después de la inyección, gire suavemente la aguja y luego retire lentamente la jeringa para evitar fugas de líquido.
También habrá diferentes métodos de inyección para diferentes sitios de estudio, como: inyección subcutánea, administración traqueal, inyección intracraneal, etc. Debe consultar la literatura relevante y consultar con el equipo técnico de Yeasen antes de realizar la experimentación.
Ciclo de dosificación y dosis
Administración a corto plazo: una única inyección de liposomas de clorofosfato de 200 µL (20 - 25 g de peso) en un momento específico para detectar la eficiencia de depuración de macrófagos o para experimentos posteriores.
Administración a largo plazo: se requiere más de una semana o más para lograr la eliminación de macrófagos. En ratones WT, por ejemplo, 200 µL (20 - Generalmente se administra una dosis inicial de 25 g de peso, seguida de 200 µL. cada 2 - 3 días.
Protocolo de prueba de referencia
| Órgano/Macrófago | Dosis (20-25 g/ratón) |
| Macrófagos del bazo/pulpa roja | Dosis única: 200 µL/ratón (IV o IP). |
| Células hepáticas/de Kuffer | Dosis única: 200 µL/ratón (IV o IP). |
| Macrófagos pulmonares/alveolares | La vía intravenosa (150-200 µL) combinada con intratraqueal o intranasal (50 µL) da los mejores resultados. |
| ganglio linfático | Inyección (100-200 µL)/ratón, se pueden encontrar regímenes de dosificación específicos en la literatura. |
| Cerebro/microglia | Entrada intracerebroventricular en el líquido cefalorraquídeo, 10 µL/ratón, 50 µL/rata. |
| Sangre/Monocitos | 150-200 µL/ratón (IV), la tasa máxima de agotamiento se alcanza dentro de las 24 horas, pero la tasa máxima de agotamiento a los 1-7 días depende de la cepa. |
Nota: Lo anterior es solo para referencia, consulte la literatura relevante y consulte con el equipo técnico de Yeasen antes de experimentar.
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| 40337ES08 | 5 ml | |
| 40337ES10 | 10 ml | |
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