---Eliminación de la interferencia bacteriana de fondo y la contaminación por ARNasa
¡En la detección de patógenos de una sola vez!
El inhibidor de la ARNasa (RNasa inhibidor, abreviado como RNasin) es capaz de unirse específicamente a la ARNasa a través de interacciones no covalentes para formar un complejo, inactivando así la ARNasa y preservando la integridad del ARN. Se utiliza ampliamente en métodos de detección de patógenos como RT-qPCR, mNGS y tNGS. Durante la detección de patógenos, es crucial controlar estrictamente la contaminación bacteriana de fondo de las enzimas moleculares; si las enzimas moleculares se ven interferidas por bacterias de fondo, pueden eclipsar los ácidos nucleicos objetivo de baja abundancia o ser detectados junto con ellos, lo que afecta la interpretación de los resultados.
Inhibidor de ARNasa residual ultrabajo de Yeasen
El inhibidor de la ARNasa murina UCF.ME® de Yeasen (n.° de cat. 14672ES/14673ES/14674ES) es un inhibidor de la ARNasa recombinante derivado de ratón expresado y purificado en forma soluble a partir de E. coli. Tiene la capacidad de inhibir ampliamente varios tipos de ARNasas, incluidas las ARNasas A, B y C. Este producto se ha probado con RT-PCR y RT-qPCR y se ha comprobado que es compatible con las transcriptasas inversas convencionales y una variedad de ADN polimerasas. En comparación con los inhibidores de la ARNasa derivados de humanos, el inhibidor de la ARNasa murina UCF.ME® de Yeasen carece de los dos residuos de cisteína que son altamente sensibles a la oxidación en las proteínas humanas, por lo que ofrece una mayor actividad antioxidante. Es particularmente adecuado para experimentos sensibles a altas concentraciones de DTT, como la qPCR.
Además, en comparación con los inhibidores de ARNasa convencionales (Cat#10603ES/10610ES/14671ES), el inhibidor de ARNasa murino Yeasen UCF.ME® exhibe niveles residuales más bajos de ADN genómico del huésped, lo que ayuda a abordar la interferencia bacteriana de fondo en la detección de patógenos y mejora la precisión de la detección.
Características del producto
- Residual ultrabajo: nivel de residuos de ADN de E. coli < 0,1 copias/100 U, adecuado para aplicaciones con requisitos bacterianos de fondo más estrictos.
- Actividad inhibidora de ARNasa de amplio espectro: capaz de inhibir ARNasas, incluidas ARNasa A, ARNasa B, ARNasa C y otras.
- Compatible con una amplia gama de condiciones de reacción: activo en condiciones de pH de 5,0 a 9,0 y temperaturas de 25 °C a 60 °C, adecuado para transcriptasas inversas termófilas.
- Compatible con un amplio espectro de experimentos posteriores: sin impacto en la actividad enzimática de las ARN polimerasas SP6, T7 o T3, las transcriptasas inversas AMV, M-MLV y las ADN polimerasas Taq.
- Estabilidad de lote a lote: La plataforma de producción de enzimas moleculares ultralimpias UCF.ME®, con un estricto control de calidad, garantiza la uniformidad, la estabilidad y el suministro oportuno del producto.
Rendimiento del producto
1) Sin exonucleasa, enzima de incisión y ARNasa residuo
Figura 1. Detección de residuos de nucleasa, enzima de mellado y ARNasa en el inhibidor de ARNasa murino UCF.ME®.
Nota: N representa el control negativo; 1, 2, 3 representan tres conjuntos de experimentos paralelos.
2) El residuo de ADN genómico de coli es inferior a 0,1 copias/100 U, significativamente inferior al de la versión convencional.
Al realizar la detección de residuos de ADN genómico del huésped (E. coli) en diferentes lotes del inhibidor de ARNasa murino UCF.ME® y compararlos con los niveles de residuos del huésped de los inhibidores de ARNasa murino convencionales, los resultados muestran que el residuo de ADN genómico del huésped del inhibidor de ARNasa murino UCF.ME® es inferior a 0,1 copias/100 U, significativamente inferior al de la versión convencional.
Figura 2: Comparación de los resultados de detección de residuos genómicos de E. coli entre UCF.Resonancia magnética ME® y resonancia magnética convencional.
3)La capacidad inhibidora de la ARNasa es significativamente superior a la de las marcas importadas.
Utilizando el ARN total como plantilla, se llevó a cabo la reacción de RT-qPCR utilizando el kit de sonda Hifair® V Multiplex One Step RT-qPCR (UDG Plus) (Cat#13650ES) para verificar la capacidad de digestión de la ARNasa A del inhibidor de la ARNasa murina UCF.ME®. Los resultados indicaron que el efecto inhibidor de Yeasen UCF.ME® MRI sobre la ARNasa A es significativamente superior al de productos internacionales similares de la competencia.
Figura 3: Validación de la capacidad de inhibición de la ARNasa de UCF.ME® MRI
Nota: Yeasen UCF MRI: 8 U UCF.ME® MRI + 80 ng RNaseA; Yeasen MRI: 8 U MRI + 80 ng RNaseA; Competidor N*: 8 U de un producto competitivo similar + 80 ng RNaseA; Control: Sin MRI ni RNaseA.
Recomendación de producto
| Tipo | Nombre | Gato |
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| Transcriptasa inversa Hifair® V (200 U/μL) | 11300ES | |
| Uracilo ADN glicosilasa (UDG/UNG), termolábil, 1 U/μL | 10303ES | |
| Inhibidor de la ARNasa murina (40 U/µL) | 10603ES | |
| Mezcla de dNTP (25 mM cada uno) | 10125ES | |
| Listo para usar lyo Serie de monoenzimas de PCR | ADN polimerasa Hieff UNICON® HotStart E-Taq, sin glicerol (5 U/μL) | 14316ES |
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| Uracilo ADN glicosilasa (UDG), termolábil (1 U/μL, sin glicerol) | 10707ES | |
| Inhibidor de la ARNasa murina (200 U/µL, sin glicerol) | 10703ES |