----Fondo limpio, patrones de banda estables, tamaños precisos
Los marcadores de ADN son una combinación de fragmentos de ADN con diferentes pesos moleculares. Su uso principal es co-migrar con el ADN de la muestra en la electroforesis en gel de agarosa para separar las moléculas de ADN. Al comparar el tamaño y el brillo de las bandas de la muestra con las del marcador de ADN, se puede estimar aproximadamente el peso molecular y la concentración del ADN de la muestra en solución. YEASEN Los marcadores de ADN cubren un rango de peso molecular de 100 pb a 15 kb, satisfaciendo las necesidades de la mayoría de los experimentos.
Características del producto
- Fuerte estabilidad, se puede almacenar a temperatura ambiente durante 3-6 meses;
- Fondo limpio, patrones de bandas estables y tamaños precisos;
- Contiene bandas de referencia con concentraciones conocidas para un fácil posicionamiento y análisis semicuantitativo;
- Incluye buffer de carga para electroforesis directa, cómodo y rápido;
- Viene con un buffer de carga 5× para cargar muestras.
Diagrama de electroforesis
Puntos de atención
- Método de almacenamiento: Almacenamiento estable a temperatura ambiente durante 3 a 6 meses; para períodos más prolongados, almacenar a 4 °C o -20 °C.
- El marcador de ADN es adecuado para analizar bandas de ADN en electroforesis en gel de agarosa y no se recomienda su uso en electroforesis en gel de poliacrilamida.
- Selección de concentración de gel y solución tampón:
| Concentración de agarosa | Rango de separación efectivo (pb) | Tampón recomendado |
| 0,5% | 2.000-50.000 | 1×TAE |
| 0,8% | 800-10.000 | 1×TAE |
| 1.0% | 400-8.000 | 1×TAE |
| 1,2% | 300-7.000 | 1×TAE |
| 1,5% | 200-3.000 | 1×TAE/0,5×TBE |
| 2,0% | 100-2.000 | 1×TAE/0,5×TBE |
| 3.0% | 25-1.000 | 0,5 × TBE |
【Nota】: Para fragmentos grandes, elija un gel de baja concentración y utilice un sistema de tampón TAE para la electroforesis; para fragmentos pequeños, elija un gel de alta concentración y utilice un sistema de tampón TBE para la electroforesis.
- Selección de tinciones de ácidos nucleicos:
El bromuro de etidio (EB) es un colorante fluorescente muy sensible con una longitud de onda de excitación máxima de 302 nm, que se puede utilizar para observar ácidos nucleicos en geles de agarosa y poliacrilamida. El EB se intercala con las bases de los ácidos nucleicos y se sabe que es tóxico.
YeaRed (Cat#10202ES76) y YeaGreen (Cat#10204ES76) son nuevos colorantes de ácidos nucleicos no tóxicos con una estructura molecular oleosa única que no puede penetrar las membranas celulares para ingresar a las células, no son fácilmente volátiles ni sublimables y, por lo tanto, no son inhalados por los humanos, lo que garantiza la seguridad del experimentador.Los resultados de la prueba de Ames también muestran que YeaRed y YeaGreen no tienen mutagenicidad en concentraciones de tinción en gel, lo que los convierte en una alternativa segura y no tóxica al altamente cancerígeno EB. Además, YeaRed tiene las mismas características espectrales que el EB, por lo que puede reemplazarlo perfectamente sin cambiar el sistema de imágenes existente.
Preguntas y respuestas
P1: ¿Por qué las bandas de alto peso molecular del marcador de ADN se arrastran y no se separan bien?
A1: El colorante de ácido nucleico no se une lo suficiente al marcador de ADN. Dado que las bandas de alto peso molecular requieren más colorante de ácido nucleico, si el colorante no está saturado, las bandas de alto peso molecular son más susceptibles a los efectos de migración, lo que provoca arrastre y una separación deficiente. Se recomienda reducir la cantidad de marcador de ADN utilizado (se puede diluir con agua 5 veces y luego se pueden cargar 8-10 μL) o aumentar la concentración del colorante de ácido nucleico.
P2: ¿Por qué no hay bandas o hay bandas débiles en el ADN?
A2:
- Carga de ADN insuficiente, aumentar la cantidad cargada;
- La banda de ADN se ha quedado sin gel;
- La banda de ADN queda oculta por el tinte de seguimiento;
- No se añadió colorante de ácido nucleico al gel;
- El gel de agarosa se ha dejado reposar durante demasiado tiempo, se recomienda prepararlo y utilizarlo inmediatamente.
P3: ¿Por qué las bandas marcadoras de ADN son difusas?
A3:
- Degradación parcial del ADN, comprobar si las condiciones de almacenamiento son demasiado cálidas;
- El voltaje durante la electroforesis es demasiado bajo, lo que provoca que las bandas de ADN se difundan. Se recomienda hacer funcionar el gel a 110 V-130 V. V por más de 45 min;
- La concentración del gel de agarosa no es la adecuada, preparar según la concentración de gel recomendada en el manual;
- La calidad del gel de agarosa es mala, se recomienda preparar uno nuevo.
P4: ¿Por qué las bandas de muestra parecen tener tamaños diferentes en comparación con las bandas del marcador de ADN?
A4:
- La migración del ADN no solo está relacionada con el tamaño real, sino también con la combinación de proteínas, el estado iónico, la estructura del ADN, el gel y otros factores. La tasa de migración electroforética de los ácidos nucleicos está relacionada con la relación ADN/colorante, y cuando la cantidad de colorante de ácido nucleico es insuficiente, puede provocar errores mayores en la tasa de migración;
- Si la muestra contiene una alta concentración de iones de sal, también puede provocar errores de migración importantes;
- Si la cantidad de muestra cargada difiere significativamente de la cantidad de bandas marcadoras de ADN o si los volúmenes difieren significativamente, también pueden producirse errores de migración mayores.
Información de pedidos
| Orientación del producto | Nombre del producto | Número de producto | Presupuesto |
| Marcador de ADN | Marcador de ADN GoldBand DL2000 | 10501ES60/80 | 100 T/10×100 T |
| Marcador de ADN GoldBand DL5000 | 10504ES60/80 | 100 T/10×100 T | |
| Escalera de ADN GoldBand de 100 pb | 10507ES60/80 | 100 T/10×100 T | |
| Escalera de ADN GoldBand de 1 kb | 10510ES60/80 | 100 T/10×100 T |