Residuo ultra bajo Mezcla QPCR universal Mezclada: para detección de patógenos precisos en diversas aplicaciones

Palabras clave:

Bajo residuo, premezclado, universal multiobjetivo, un tubo, qPCR, alta sensibilidad.

Abstracto:

La nueva mezcla qPCR de residuos ultra bajos de tercera generación, premezclada para garantizar una alta sensibilidad, admite un protocolo rápido de 30 minutos y se destaca en la amplificación multiplex en diversos escenarios.

Fondo：

Las enzimas moleculares comerciales, producidas principalmente mediante expresión recombinante en cepas modificadas genéticamente (p. ej., E. coli), suelen contener ADN genómico residual del huésped. Factores como el entorno de preparación y la contaminación humana aumentan aún más la probabilidad de encontrar ADN residual en estas enzimas. Esto puede provocar una cuantificación inexacta de los residuos de ácidos nucleicos del huésped en productos de control de calidad, lo que supone riesgos de seguridad para la fabricación biofarmacéutica. Durante la detección de patógenos, los ácidos nucleicos bacterianos de fondo contaminados podrían sobrepasar a los ácidos nucleicos diana de baja abundancia o ser detectados conjuntamente con ellos, lo que compromete la precisión de la prueba.

Solución total

Para abordar la interferencia de las bacterias de fondo y los residuos de ácidos nucleicos del huésped en la detección de patógenos, YEASEN Biotech ha desarrollado una tecnología única de control de residuos ultrabajos. Establecimos UCF.ME, una planta de producción de enzimas moleculares ultralimpias que cumple con las normas GMP y con el estricto cumplimiento del sistema de gestión de calidad ISO 13485 en todas las etapas. Esto incluye un riguroso control del personal, la maquinaria, los materiales (reactivos y consumibles), los procesos, el entorno y las normas. Mediante la integración de medidas técnicas eficaces, un entorno de producción limpio y un riguroso control de calidad, facilitamos la producción a gran escala de diversas UCF.ME.^{Marca registrada}enzimas de peso molecular residual ultrabajo.

Hieff Unicon^{Marca registrada} Mezcla de qPCR Pure Pro U+（Un tubo）（Gato#16713ES）es una mezcla universal de qPCR meticulosamente elaborada por YEASEN Biotecnología, con bajo nivel de residuos en el ADN del huésped. Este producto se basa en una nueva generación de mezcla universal premezclada para qPCR (Cat. n.° 16713ES) que controla eficazmente el ADN genómico residual del huésped.E. coli), a la vez que controla los niveles residuales de bacterias patógenas comunes, como Pseudomonas aeruginosa, y contaminantes de origen humano. Dado que esta solución premezclada (Cat. n.° 16713ES) no solo controla eficazmente el nivel de residuos de patógenos, sino que también aborda los problemas de estabilidad en la detección múltiple y la versatilidad de dianas, mejora indicadores clave de rendimiento como la sensibilidad y la especificidad del reactivo. Mejora significativamente la eficiencia de la detección y se puede utilizar ampliamente en aplicaciones como la detección de microorganismos patógenos.

Ventajas del producto

• Bajo nivel de residuos de fondo – No se detectó Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa ni residuos de ADN genómico derivado de humanos en 48 pocillos.
• Excepcional estabilidad premezclada:Estable a 37°C durante hasta 14 días, a 4°C durante hasta 28 días y después de 50 ciclos de congelación y descongelación.
• Excelente versatilidad de reactivos – Compatible con una variedad de conjuntos de cebadores-sondas multiplex (validados para más de 40 tipos diferentes de objetivos), con un excelente rendimiento de amplificación.
• Alta sensibilidad y especificidad – La sensibilidad es capaz de detectar 250 copias/mL, con especificidad que garantiza que no haya picos en 48 pocillos negativos.
• Admite protocolos rápidos – Compatible con protocolos rápidos, los resultados se pueden obtener en sólo 30 minutos.
• Sistema anticontaminación dUTP/UDG – Incorpora un sistema anticontaminación dUTP/UDG para prevenir eficazmente la contaminación por aerosoles.
• Compatibilidad con múltiples plataformas y sistemas – Compatible con plataformas como Bio-Rad CFX96, ABI Q5, 7500, Slan, Tianlong y otras.

Aspectos destacados del rendimiento

1、Residuos bacterianos de fondo ultra bajos

Con base en la evaluación de los niveles de residuos bacterianos de fondo del reactivo, se recomienda el uso de YEASEN's universal de residuos ultra bajos premezclado Mezcla de qPCR (Cat#16713ES) y reactivos convencionales (sin control de residuos)) para NTC (sin control de plantilla) amplificación en una Escherichia coli (E. coli), donde el gen 16713ES también experimenta amplificación de NTC tanto en sistemas de ADN genómico de Pseudomonas aeruginosa como de origen humano. Los resultados muestran que el gen 16713ES no presenta amplificación. en 48 pocillos de NTC, lo que indica un residuo de ADN de fondo insignificante (E. coli, P. aeruginosa y ADN humano) en el reactivo.

2、Excelente estabilidad de la premezcla completamente premezclada

Basado en la investigación de la estabilidad de la premezclado El reactivo, Cat#16713ES, se trató de tres maneras (4 °C, 37 °C y congelación-descongelación). Los grupos experimentales se trataron a 4 °C y 37 °C durante 7 días, respectivamente, y se sometieron a 50 ciclos de congelación-descongelación. La estabilidad se evaluó frente al grupo control (almacenado a -20 °C) en cuatro sistemas de amplificación multiplex (los grupos 1, 2 y 4 son sistemas de amplificación cuádruples, y el grupo 3 es un sistema de amplificación triple). En algunos grupos de amplificación, se evaluó adicionalmente su estabilidad tras 14 días de aceleración a 37 °C. Los resultados demostraron que la Desviación del valor Ct (valor ΔCt) entre los reactivos experimentales y de control fue de ±0,5 y la desviación del valor de fluorescencia fue de ±0,5. dentro del 15%, indicando que YEASENEl reactivo premezclado de tiene una excelente estabilidad en amplificación multiplexada.

3、Excelente versatilidad de reactivos

Basado en la investigación de los escenarios de aplicación versátiles del reactivo, YEASEN (Cat#16713ES) se utilizó junto con varios reactivos convencionales para validar el rendimiento de la amplificación en diferentes escenarios objetivo. Los resultados demostraron que el producto exhibe un buen rendimiento de amplificación en una variedad de objetivos, incluidos patógenos, fuentes humanas y plantas, lo que indica un alto nivel de versatilidad del reactivo.

4、Excelente sensibilidad de amplificación

Con base en una evaluación de la sensibilidad del reactivo, se realizó una evaluación de la tasa de detección de Cat#16713ES en un sistema de amplificación multiplex (4-plex) utilizando muestras en concentraciones ultra bajas (250 copias/mL). Los resultados indican que YEASENEl Cat#16713ES de 's exhibe una excelente sensibilidad de amplificación, con un límite de detección de al menos 250 copias/mL.

5、Compatibilidad con múltiples protocolos rápidos

Con base en la investigación del rendimiento de amplificación del protocolo rápido del reactivo, se validaron siete muestras de gradiente (1~10^6 copias/μL) utilizando protocolos convencionales (1 hora y 6 minutos) y rápidos (30 minutos) en el mismo instrumento de PCR cuantitativa (ABI Q5). Los resultados demostraron que la eficiencia de amplificación del protocolo rápido se mantuvo por encima del 99%, y la desviación del valor Ct (valor ΔCt) entre los protocolos convencionales y rápidos fue dentro de ±0,5, con una desviación del valor de fluorescencia dentro de ±10%, y las curvas de amplificación mostró una forma de “S”.

Intercambio de reactivos de detección de IVD

Como proveedor de herramientas para las ciencias de la vida, YEASEN La biotecnología lleva mucho tiempo proporcionando materias primas de alta calidad y rentables a las empresas de diagnóstico in vitro (IVD). Además de la universalidad... totalmente premezclado Mezclas maestras qPCR/RT-qPCR, ofrecemos una variedad de otros reactivos de detección qPCR/RT-qPCR, que ayudan Diagnóstico in vitro Los clientes empresariales abordan conjuntamente la detección eficiente de patógenos humanos y enfermedades animales.

Tipo de producto	Función del producto	Nombre del producto	Número de artículo
mezcla de qPCR	Nueva prueba universal de tercera generación, totalmente premezclada y de alta sensibilidad que admite pruebas rápidas	Mezcla para qPCR Hieff UniconTM Universal TaqMan Pro U+（Un tubo）	16710ES
	Universal de alta sensibilidad (concentración 5×)	Hieff Unicon™ Mezcla maestra universal TaqMan Multiplex qPCR（UDG más）	13891ES
	2.ª generación rápida totalmente premezclada	Hieff Unicon™ Mezcla maestra para qPCR TaqMan Superpro Ⅰ（UDG más）	11827ES
	Residual ultrabajo sin huésped	Hieff Unicon™ Mezcla maestra Purepro Ⅰ TaqMan qPCR（UDG más）	11853ES
	Liofilizable universal de alta sensibilidad	Mezcla maestra universal para qPCR Hieff UniconTM TaqMan Multiplex（UDG más）	11893ES
Mezcla de RT-qPCR	Rápido universal de alta sensibilidad	Kit de sonda RT-qPCR multiplexada de un solo paso HifairTM C203P1（UDG Plus）	16630ES
	universal totalmente premezclado	Hifair™ Kit de sonda RT-qPCR de un solo paso V Multiplex（UDG Plus）	11899ES
	Liofilizable rápido universal	Kit de RT-qPCR de un solo paso HifairTM Lyo Multiplex	11831ES