1. Introducción de antecedentes

La estreptavidina es una proteína que se une a la biotina derivada del Streptomyces avidinii. Su unión no específica es mucho menor que la de la avidina y, en comparación con la avidina de la clara de huevo, que tiene una carga neta positiva a pH neutro y contiene alrededor de un 7 % de carbohidratos, la estreptavidina tiene propiedades químicas más favorables, como una carga neta casi nula a pH neutro y sin carbohidratos. Por lo tanto, se utiliza ampliamente como alternativa a la avidina.

2. Características del producto

Estructura del tetrámero:La estreptavidina existe como un homotetrámero con un tamaño de 66 KDa;

Alta afinidad:Cada molécula de estreptavidina puede unirse de forma altamente específica a cuatro moléculas de biotina, con una afinidad extremadamente fuerte entre ellas;

Amplias aplicaciones: La constante de disociación del complejo estreptavidina-biotina está en el rango nanomolar, una propiedad comúnmente utilizada en aplicaciones de biología molecular; en la mayoría de las aplicaciones, se puede utilizar indistintamente con proteínas de anticuerpos;

Extracción de alta calidad:Obtenido por purificación de Streptomyces avidinii;

Figura 1. Estreptavidina

Producto Solicitud

Aplicación 1: Resina purificada con estreptavidina

1)Principio de aplicación

Basándose en la interacción entre la estreptavidina y la biotina, la estreptavidina está altamente reticulada con agarosa al 6%, y el proceso de preparación único le otorga propiedades fisicoquímicas superiores, lo que le permite soportar presiones más altas. Puede lograr la purificación de la proteína objetivo a velocidades de flujo relativamente altas, lo que la hace más adecuada para la purificación industrial de proteínas a gran escala.

Figura 2. Principio de purificación de la resina de estreptavidina.

2)Yeasen se compromete a brindarle productos de alta eficiencia para purificar proteínas más perfectas para usted.

Figura 3. Proteína purificada mediante resina de estreptavidina.

3) Preguntas frecuentes

Pregunta

Posible razón

Solución recomendada

La contrapresión de la columna es demasiado alta

El embalaje está bloqueado

Limpiar la resina.

El tampón de lisis contiene pequeñas partículas sólidas, se recomienda filtrar con una membrana de filtro de 0,22 μm o 0,45 μm antes de cargarlo o centrifugar para eliminarlo.

La muestra es demasiado viscosa.

La muestra contiene una alta concentración de ácidos nucleicos, prolongue el tiempo de lisis hasta que se reduzca la viscosidad o agregue DNasa I (concentración final de 5 μg/ml), Mg2+ (concentración final de 1 mM), incubar en hielo durante 10-15 minutos

El tampón es demasiado viscoso

Los reactivos orgánicos o estabilizadores de proteínas (como glicerol, etc.) pueden provocar un aumento de la contrapresión y reducir el caudal operativo.

Proteína sin propósito en el componente de elución

La escisión excesiva desnaturaliza la proteína de interés.

Utilice condiciones de lisis suaves. Las condiciones experimentales se basan en la experiencia.

La proteína objetivo se agrega para producir precipitación.

Agregue DTT a la solución de lisis previa a la célula a una concentración final de 1 a 10 mM.

La proteína objetivo no se eluye completamente

El volumen de elución es demasiado pequeño

Aumente el volumen de eluyente y disminuya el caudal de elución.

El pH del tampón de elución cambia

Utilice eluyente recién preparado

El tiempo de incubación del eluyente no es suficiente

Aumente el tiempo de incubación del tampón de elución con el gel.

Aplicación 2: Grupo fluorescente y conjugado enzimático marcado con estreptavidina.

Figura 4. Diferentes estreptavidinas conjugadas

1) Estreptavidinas conjugadas con enzimas
  • Estreptavidina conjugada con peroxidasa de rábano picante (HRP)

Ⅰ.Producido con estreptavidina de alta pureza y peroxidasa de rábano picante a través de una técnica de conjugación especial;

Ⅱ.Mantiene la alta actividad específica de la peroxidasa. Aplicaciones: Inmunohistoquímica (IHC), Inmunocitoquímica (ICC), Hibridación in situ (ISH), etc.

Concentración recomendada: 0,01-0,1 µg/mL para WB (método de quimioluminiscencia); 1-2 µg/mL para ELISA, HC/ICC, WB (desarrollo de color del sustrato)

  • Fosfatasa alcalina (AP) conjugada con estreptavidina

Ⅰ. Adecuado para análisis en fase sólida, sistemas de tinción de tejidos/células y aplicaciones de transferencia, con enlace covalente específico;

Ⅱ.El conjugado es estable y altamente activo.

Aplicaciones: Inmunohistoquímica (IHC), inmunocitoquímica (ICC), ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISPOT), ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA), hibridación in situ (ISH) y aplicaciones de transferencia.

Concentración recomendada: 1-2 µg/mL para ELISA, IHC/ICC; 0,1-1 µg/mL para WB

2) Estreptavidinas conjugadas con fluoróforos
  • Fluor® Estreptavidina conjugada con fluoresceína

Ⅰ.Recomendado para inmunofluorescencia de rutina;

Ⅱ. Altamente purificado con características de unión no específica muy bajas;

Ⅲ.Alta afinidad por la biotina;

Aplicaciones: Inmunofluorescencia (IF), Hibridación in situ (ISH), Citometría de flujo (Flow Cyt).

Concentración recomendada: 0,5-2 µg/mL (IF)

  • Estreptavidina conjugada con colorante DyLight™

Ⅰ.Se puede utilizar para detectar segundos anticuerpos biotinilados y otras moléculas grandes en aplicaciones de inmunofluorescencia, hibridación in situ o citometría de flujo;

Ⅱ. Altamente purificado con características de unión no específica muy bajas;

Ⅲ.Afinidad extremadamente alta por la biotina;

Ⅳ.Alta fotoestabilidad, insensible al pH y fluorescencia más brillante;

Aplicaciones: Inmunofluorescencia (IF), Hibridación in situ (ISH), Citometría de flujo (Flow Cyt).

Concentración recomendada: 0.5-2 µg/mL (SI)

Información del producto

Serie de productos

Número de producto

Nombre del producto

Especificación

Estreptavidina

35099ES

Estreptavidina (polvo)

100 mg/1 g

35101ES

Estreptavidina (5 mg/ml)

1 mg/5 mg/10 mg/100 mg/1 g

Estreptavidinas conjugadas con enzimas

35105ES

Estreptavidina HRP

100 μl

35106ES

Estreptavidina AP

100 μl

Estreptavidina marcada con fluorescencia

35102ES

Estreptavidina DyLight 405™

100 μl

35103ES

Fluor de YSFluorMT. Estreptavidina conjugada 488

100 μl

35104ES

Fluor de YSFluorMT. Estreptavidina conjugada con 647

100 μl

35107ES

Fluor de YSFluorMT. Estreptavidina conjugada con 584

100 μl

35108ES

Estreptavidina conjugada con Cy3

1 mg

Serie de purificación de estreptavidina

20512ES

Resina de agarosa y estreptavidina 6FF

5 ml/5 ml × 5/100 ml

20513ES

Columna de cromatografía BiotSep Streptavidin 6FF, 1 ml

1 ml/1 ml × 5

20514ES

Columna de cromatografía BiotSep Streptavidin 6FF, 5 ml

5 ml/5 ml × 5

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