Figura 1. Estructura de la albúmina sérica humana ^[1]

3.Aplicación de Recombinante Serum AAlbúmina

3.1. La albúmina es un suplemento del medio de cultivo sin suero.

La albúmina es un componente importante de muchos sistemas de cultivo celular sin suero, como los de células de hibridoma y células de ovario de hámster chino (CHO).La albúmina se puede incorporar a los andamios celulares para proporcionar a las células nutrientes esenciales y una fuente de factores de crecimiento, promoviendo la supervivencia y la proliferación celular. La albúmina sérica humana se utiliza como complemento del medio de cultivo celular para mantener el crecimiento y la salud de las células utilizadas en la producción de anticuerpos monoclonales, proteínas recombinantes y otros productos biológicos. La albúmina también puede hacer que el entorno de cultivo celular sea más estable y controlable, reduciendo la variabilidad de lote a lote y los riesgos de contaminación asociados con el suero de origen animal.

3.2 Cultivo de células de mamíferos

La albúmina se une a una amplia gama de sustancias bioactivas, lo que la convierte en una molécula de transporte clave. La albúmina también elimina especies reactivas de oxígeno que son perjudiciales para la supervivencia celular. Estas propiedades hacen que la albúmina sea una excelente opción para promover el crecimiento celular y mantener una variedad de células eucariotas in vitro. La albúmina humana recombinante es adecuada para una variedad de diferentes tipos de células madre, primarias y de producción, incluidas las células inmunes, VERO, células madre mesenquimales, HEK293, células diploides, CHO y otros tipos de células.

3.3. Producción y preparación de vacunas

La HSA es un componente importante para estabilizar las vacunas y ofrece múltiples beneficios para una variedad de tipos de vacunas, incluidos virus vivos atenuados, virus inactivados o muertos, partículas similares a virus y vacunas de subunidades. Una de las propiedades notables de la HSA es su capacidad para recubrir superficies tanto hidrófobas como hidrófilas, lo que evita la adsorción no específica no deseada de las vacunas durante todo su ciclo de vida, desde la producción hasta la formulación y el almacenamiento. Gracias a su capacidad de unión, capaz de interacciones tanto iónicas como hidrófobas, la HSA puede proteger las superficies expuestas de las vacunas de la agregación no deseada y la formación de partículas, que de otro modo podrían comprometer la eficacia de la vacuna.

3.4 Diagnóstico de enfermedades in vitro/in vivo

La HSA es un biomarcador de una variedad de enfermedades, entre ellas el cáncer, la artritis reumatoide, la isquemia, la enfermedad hepática, la obesidad y la diabetes.

3.5 Aplicación de la albúmina sérica humana en la terapia con células madre

La albúmina ha sido durante mucho tiempo un componente esencial de los medios de cultivo celular. Su capacidad para promover el crecimiento de una variedad de tipos de células está bien documentada, incluidas las células madre mesenquimales (MSC), las células madre embrionarias (ESC), las células madre pluripotentes inducidas (iPSC) y las células inmunes. En el cultivo celular, la albúmina es más que una fuente de nutrientes. Actúa como un reservorio multifuncional, protegiendo los metales esenciales y otras entidades moleculares, creando así un entorno óptimo para el crecimiento y la viabilidad celular continuos.

Además de su aplicación en cultivos celulares, la albúmina también se puede utilizar para la criopreservación de células madre. La capacidad de recubrimiento de la superficie de la albúmina garantiza la seguridad de las células durante el proceso de congelación. Además, la capacidad de amortiguación de la albúmina mantiene el equilibrio del pH necesario para la integridad celular, mientras que su capacidad estabilizadora mantiene las células en suspensión, lo que prolonga su viabilidad durante la criopreservación.

Además, la albúmina también se puede utilizar como transportador de fármacos para prolongar el tiempo de circulación de los fármacos en el organismo y mejorar su eficacia.

4. Mecanismo de acción de la Albúmina en el medio de cultivo.

4.1 Ácidos grasos ligantes

La albúmina es un transportador del 99% de los ácidos grasos (AG) no esterificados en el plasma. La albúmina tiene 7 sitios de unión de AG de alta afinidad y más de 20 de baja afinidad. Los ácidos grasos como el ácido linoleico, el ácido linolénico y el ácido oleico son insolubles en solución acuosa y deben ser entregados a las células a través de moléculas transportadoras. La albúmina circulante generalmente puede transportar 1 o 2 ácidos grasos libres. La unión de los ácidos grasos también ayuda a estabilizar la albúmina. Como aditivo de cultivo celular, la actividad de la albúmina depende en parte de los ácidos grasos específicos a los que se une y entrega a las células.

4.2 Unión de iones metálicos

Los iones metálicos son componentes esenciales para el cultivo celular. La HSA es un transportador clave para los iones metálicos clave Cu2+ y Zn2+. Además, los átomos de cobre pueden experimentar reacciones redox monovalentes y catalizar la generación de radicales libres, lo que hace que el cobre sea citotóxico. In vivo, los iones de cobre extracelulares se unen a la albúmina, lo que debilita la toxicidad potencial del cobre. Cada molécula de albúmina tiene un sitio de unión de cobre de alta afinidad y, cuando el cobre se une a este sitio, no participará en reacciones redox relacionadas con los radicales libres. La albúmina también puede unirse a otros cationes divalentes como Ca, Mg, Mn, Cd, Co y Ni.

4.3 Propiedades antioxidantes de la HSA

La actividad antioxidante de la HSA se atribuye principalmente a las propiedades redox de cuatro sitios principales de unión de metales. Cu libre 2+, Fe 2+ y otros iones metálicos reaccionan con el oxígeno para generar ROS , que también puede interactuar con H2O2 para producir radicales hidroxilo nocivos. Por otro lado, la unión de la albúmina a los iones metálicos limita la capacidad de estos iones de participar en la generación de ROS.

Los cultivos de células eucariotas a escala industrial realizados en biorreactores contienen oxígeno disuelto y metales libres como hierro, cobre, cobalto y níquel, que producen ROS que degradan las membranas celulares. La adición de BSA o HSA reduce la presión de ROS, lo que da como resultado cultivos celulares sanos. Por otro lado, la unión de la albúmina a estos metales, especialmente cobre, zinc, vanadio y selenio, promueve la absorción de estos metales por las células, estimula el crecimiento del cultivo y mejora significativamente la producción de proteínas recombinantes en células eucariotas.

4.4 Unión de piridoxal

Los aminoácidos son componentes clave de los medios de cultivo celular. El piridoxal y su derivado 5' piridoxal fosfato (PLP) pueden reaccionar de forma no enzimática con los aminoácidos y formar bases de Schiff. Estas bases de Schiff son muy inestables y, cuando entran en contacto con iones metálicos, provocan la degradación de los aminoácidos y la inhibición del crecimiento celular. La fracción libre de piridoxal se secuestra mediante la unión a la albúmina, lo que evita que el piridoxal reaccione con los aminoácidos in vitro y los destruya.

4.5 Unión de riboflavina

La riboflavina es otro factor que reacciona con los aminoácidos libres y los degrada. En solución acuosa, la riboflavina puede unirse al triptófano para formar un complejo. En condiciones de luz, este complejo se descompone en productos tóxicos. La albúmina puede unirse a la riboflavina y su fosfato (monofosfato de flavina) y protegerlos de la degradación. La albúmina tiene un único sitio de unión al triptófano.

5. Características del producto

Yeasen ofrece una variedad de albúmina sérica recombinante, incluidas las de origen humano, de ratón, de rata, de mono y de otras especies.