آنتی بادی های ضد پرداخت به تجزیه و تحلیل فارماکوکینتیک داروهای ADC کمک می کنند

کونژوگه های آنتی بادی-دارو (ADCs) ایمونوکونژوگه هایی هستند که از یک آنتی بادی مونوکلونال متصل به یک داروی سیتوتوکسیک (معروف به بار) از طریق یک پیوند شیمیایی تشکیل شده اند. اجزای تشکیل دهنده یک ADC عبارتند از یک بادی مولکولی اختصاصی آنتی ژن تومور، یک پیوند شیمیایی قابل شکافت یا غیرقابل شکافت پایدار، و یک بار سیتوتوکسیک قوی (شکل 1).

شکل 1: ساختار ترکیب آنتی بادی-دارو و خواص آنتی بادی (و آنتی ژن هدف)، پیوند دهنده و اجزای محموله سیتوتوکسیک^[1]

ویژگی های بار

محموله به طور کووالانسی از طریق پیوند دهنده به آنتی بادی متصل می شود، و داروی ADC نقش مهمی در فعالیت سیتوتوکسیک در سلول ها ایفا می کند، زیرا مکانیسم اثر آن، قدرت ADC حاصل را به عنوان یک ترکیب ضد سرطانی و نشانه های بالقوه آن تعیین می کند. یک بار ایده آل باید ویژگی های زیر را داشته باشد: سمیت سلولی بالا. ایمنی زایی کم؛ پایداری بالا؛ گروه های عاملی قابل تغییر بدون تأثیر قابل توجهی بر کارایی آن. اثر کشتن تماشاگر؛ حلالیت مناسب؛ و هدف باید درون سلولی باشد، زیرا اکثر ADCها برای آزادسازی بار خود نیاز به ورود به سلول های تومور دارند.

طبقه بندی بار

محموله ها را می توان به انواع سیتوتوکسیک و غیر سیتوتوکسیک تقسیم کرد که اکثریت قریب به اتفاق ADC ها از محموله های سیتوتوکسیک استفاده می کنند. دو نماینده اصلی بارهای سیتوتوکسیک وجود دارد: مهارکننده‌های میکروتوبول و مهارکننده‌های DNA، که بازدارنده‌های DNA بیشتر به عوامل آسیب DNA و مهارکننده‌های توپوایزومراز تقسیم می‌شوند. مهارکننده‌های میکروتوبول می‌توانند میتوز را مختل کنند و سلول‌های تومور سریع‌تر از اکثر سلول‌های طبیعی تقسیم می‌شوند و باعث می‌شود مهارکننده‌های میکروتوبول در کشتن سلول‌های سرطانی مؤثرتر باشند. مهارکننده های میکروتوبول را می توان به دو نوع تقسیم کرد: یکی که پلیمریزاسیون میکروتوبول را ترویج می کند و باعث رشد کنترل نشده میکروتوبول می شود، مانند MMAE مشتق از دولاستاتین، MMAF. دیگری به طور موثری از تجمع میکروتوبول ها جلوگیری می کند و باعث توقف میتوز سلولی می شود، مانند مشتقات میتانزین DM1، DM4. مهارکننده‌های میکروتوبول بالغ‌ترین محموله‌هایی هستند که در حال حاضر استفاده می‌شوند، با سمیت بسیار قوی‌تری نسبت به داروهای شیمی‌درمانی سنتی، اما مشکلاتی نیز دارند، مانند مهارکننده‌های میکروتوبول فقط می‌توانند سلول‌های تومور را در مرحله تقسیم سلولی بکشند و در برابر سلول‌های سرطانی غیرقابل تقسیم و ساکن بی‌اثر هستند و بیشتر مستعد مقاومت دارویی هستند. مهارکننده‌های DNA که در کل چرخه سلولی عمل می‌کنند نه تنها اثر کشنده‌ای روی سلول‌های سرطانی غیرقابل تقسیم دارند، بلکه سلول‌های سرطانی مقاوم به مهارکننده‌های میکروتوبول کلاسیک را نیز از بین می‌برند. به عنوان نسل سوم محموله‌ها، مهارکننده‌های DNA می‌توانند ساختار و عملکرد DNA را از طریق گسستن دو رشته‌ای، آلکیلاسیون، درون‌سازی، اتصال متقابل و مهار توپوایزومراز I (TOPO1) تخریب کنند و باعث مرگ سلول‌های سرطانی شوند.

در میان 14 داروی ADC تایید شده، 6 داروی ADC با محموله MMAE یا MMAF وجود دارد که نزدیک به 50٪ را شامل می شود. همچنین بیش از 80 خط لوله تحت تحقیق با MMAE به عنوان محموله وجود دارد که دولاستاتین را به رایج ترین محموله مورد استفاده تبدیل می کند.

جدول 1: طبقه بندی محموله متداول سیتوتوکسیک

هدف اقدام	مکانیسم	طبقه بندی
میکروتوبول	مهارکننده میکروتوبول	دولاستاتین: MMAE، MMAF
		مشتق میتانسین: DM1، DM4
		حل کننده میکروتوبول
		سم اسفنج نرم: هالیکندرین
DNA	آسیب DNA	کالیکی آمیسین
		PBD
		دووکارمایسین
	مهارکننده توپوایزومراز I	Camptothecin: DN38، Dxd

اجزای داروی ADC و روشهای آنالیز مربوطه

ADCها هم دارای مولکول های درشت و هم مولکول های کوچک هستند که برای تجزیه و تحلیل تنوع ADC ها به انواع روش ها و پلتفرم های زیست تحلیلی نیاز دارند. روش‌های سنتی آنالیز مولکول‌های کوچک LC-MS/MS معمولاً برای تجزیه و تحلیل محموله نامنظم و توزیع DAR (نسبت دارو به آنتی‌بادی، که نشان‌دهنده تعداد مولکول‌های محموله متصل به هر آنتی‌بادی است و یکی از ویژگی‌های مهم ADC است) در طول زمان استفاده می‌شود، در حالی که آنالیز اتصال لیگاند (LBA) و آنالیز کل آنتی‌بادی (LBA) و کل آنالیز آنتی‌بادی (LBA) و کل آنتی‌بادی/ ADC. آنتی بادی های ضد بار نقش مهمی در تجزیه و تحلیل ایمنی زایی ADC ها دارند.

برنامه های آنتی بادی ضد بار

• تجزیه و تحلیل فارماکوکینتیک (PK) داروهای ADC در پلاسما / سرم
• تعیین میل اتصال به دارو
• تجزیه و تحلیل مقدار DAR
• ارزیابی اثربخشی داروهای ADC

مزایای محصول آنتی بادی ضد بار

• خلوص بالا: خلوص تأیید شده توسط SDS-PAGE و HPLC، > 95٪
• میل ترکیبی بالا: تایید شده توسط ELISA و سایر روش های تشخیص فعالیت، با فعالیت بالا
• High Specificity: به طور خاص هدف را تشخیص می دهد
• پشتیبانی فنی حرفه ای: پشتیبانی فنی حرفه ای برای پاسخگویی به موقع به سوالات پیش از فروش و پس از فروش

گربه شماره	نام	اندازه
31901ES	ضد DM1 ماوس mAb	100μg/1mg
31902ES	ضد DXD ماوس mAb	100μg/1mg
31903ES	ضد MMAE ماوس mAb	100μg/1mg
31904ES	mAb ماوس ضد MMAF	100μg/1mg
31905ES	ضد SN-38 ماوس mAb	100μg/1mg

مراجع:

[1] سیندی اچ، پاتریشیا اس.، ویلیام دی..ترکیبات آنتی بادی-دارو برای سرطان [J]. Lancet 2019، 394:793-804