آنتی بادی ثانویه چیست؟
آنتی بادی ثانویه آنتی بادی است که می تواند به یک آنتی بادی اولیه متصل شود. این عمدتا برای تشخیص وجود آنتی بادی اولیه استفاده می شود. آنتی بادی اولیه به طور اختصاصی به آنتی ژن و آنتی بادی ثانویه به طور خاص به آنتی بادی اولیه متصل می شود. به عبارت دیگر، ناحیه Fc یا قطعه Fab آنتی بادی اولیه می تواند به عنوان یک آنتی ژن برای تحریک بدن برای تولید آنتی بادی عمل کند. به عبارت دیگر، آنتی بادی اولیه عمدتاً ایمونوگلوبولین های کلاس IgG است، بنابراین آنتی بادی ثانویه یک آنتی بادی ضد IgG است.
نقش آنتی بادی های ثانویه
آنتی بادی اولیه به طور خاص به پروتئین هدف متصل می شود و آنتی بادی اولیه باید با یک ماده درخشان یا یک گروه کروموژن نشاندار شود. با چشم غیرمسلح نمی توان دید که آیا آنتی بادی اولیه است یا خیر مقید کردن پروتئین با این حال، آنتی بادی اولیه نسبتاً اختصاصی است و هر کدام با هزینه بالایی برچسب گذاری می شوند. معمول است که از یک آنتی بادی ثانویه نشاندار استفاده شود که می تواند به آنتی بادی اولیه متصل شود و دارای یک برچسب قابل تشخیص باشد (مانند گروه فلورسنت، رادیواکتیو، نورتابی شیمیایی یا کروموژنیک). بنابراین طرح فعلی به طور کلی دارای آنتی بادی ثانویه با برچسب قابل تشخیص برای تشخیص آنتی بادی اولیه است، در حالی که آنتی بادی اولیه بستر را تشخیص می دهد. به این ترتیب هنگامی که آنتی بادی اولیه به سوبسترا متصل می شود، از طریق آنتی بادی ثانویه قابل تشخیص است.
به عنوان مثال، اصل لومینسانس ECL: در بستر ECL، H وجود دارد2O2 و لومینول (و مشتقات آن) که تحت تأثیر HRP (پراکسیداز ترب کوهی) فلورسانس منتشر می کنند.
نکات کلیدی برای استفاده از آنتی بادی های ثانویه
آنتی بادی ثانویه آنتی بادی است که توسط ایمن سازی پستانداران (معمولاً ایمن سازی بزها، اسب ها، الاغ ها، قاطرها و خوکچه هندی و غیره) با ایمونوگلوبولین IgG از یک زیرگروه خاص از گونه های آنتی بادی اولیه (مانند خرگوش، موش) تولید می شود، بنابراین آنتی بادی ثانویه، آنتی بادی اولیه و گونه فرعی خاص فقط به یک پادتن خاص متصل می شود. به عنوان مثال، ضد موش گوسفند (آنتی بادی ثانویه) به طور خاص به مونوکلونال موش (آنتی بادی اولیه) متصل می شود و به مونوکلونال پلی کلونال خرگوش یا موش صحرایی متصل نمی شود.
علائم جفت شدن آنتی بادی های ثانویه
روش‌های آزمایشی مختلف منجر به ایجاد گروه‌های جفت‌گیری متفاوتی برای آنتی‌بادی‌های ثانویه می‌شوند که عمدتاً آنزیم‌ها (پراکسیداز ترب کوهی/HRP و آلکالین فسفاتاز/AP)، گروه‌های فلورسنت (FITC، رودامین، PE، Dylight، Alexa Fluor، cy3، و غیره)، بیوتین، ذرات طلا، ذرات ثانویه برای HRPهای آزمایشی و غیره هستند. WB، ELISA، IHC و آنتی بادی های ثانویه نشاندار شده با بیوتین برای IHC توصیه می شود، در حالی که برچسب های فلورسنت مانند Alexa Fluor 488، FITC، PE برای IF، FC و غیره استفاده می شود.
نحوه انتخاب آنتی بادی ثانویه مناسب
الف بلات ایمنی (WB)
یک آنتی بادی ثانویه با برچسب پراکسیداز ترب کوهی یا آلکالین فسفاتاز برای وسترن بلات سنتی انتخاب کنید؛ یک آنتی بادی ثانویه با برچسب فلوروفور مربوطه برای وسترن بلات فلورسنت انتخاب کنید.
ب.ایمونوهیستوشیمی (IHC/ICC)
B. برای ICC (ایمونوسیتوشیمی)، یک آنتی بادی ثانویه با برچسب بیوتین انتخاب کنید.
ج. ایمونوفلورسانس (IHF/ICF)
رسوب ایمنی اغلب امکان انتخاب استفاده از یک آنتی بادی ثانویه که مخصوص Fc یا Fab است را می دهد. چنین آنتی بادی های ثانویه می توانند از تداخل زنجیره سنگین (وزن مولکولی 55 کیلو دالتون) یا زنجیره سبک (وزن مولکولی 25 کیلو دالتون) جلوگیری کنند.
اطلاعات محصول توصیه شده
| گروه برچسب | شماره محصول | نام محصول |
| بدون علامت | 34850ES | ضد خرگوش بز lgG(H+L) |
| 34851ES | ضد ماوس بز lgG(H+L) | |
| 34847ES | IgG ضد انسان الاغ (H+L) | |
| HRP | 33101ES | Peroxidase AffiniPure Goat Anti-Rrabbit IgG (H+L) |
| 33201ES | Peroxidase AffiniPure Goat Anti-Mouse IgG (H+L) | |
| 33301ES | Peroxidase AffiniPure Goat Anti-Rat IgG (H+L) | |
| 33401ES | پراکسیداز آفینی پیور بز ضد خوکچه هندی IgG(H+L) | |
| 33501ES | ترب پراکسیداز بز ضد IgG انسانی (H+L) | |
| 33701ES | Peroxidase AffiniPure Rabbit Anti-Goat IgG (H+L) | |
| 33801ES | Peroxidase AffiniPure Rabbit Anti-Sheep IgG (H+L) | |
| 34201ES | Peroxidase AffiniPure Donkey Anti-Rabbit IgG (H+L) | |
| 34101ES | Peroxidase AffiniPure Donkey Anti-Mouse IgG (H+L) | |
| 34301ES | Peroxidase AffiniPure Donkey Anti-Goat IgG (H+L) | |
| 33101ES | Peroxidase AffiniPure Goat Anti-Rrabbit IgG (H+L) | |
| فلورسانس سبز | 33106ES | YSFluor™ 488 بز ضد خرگوش IgG (H+L) |
| 33126ES | YSFluor™ 488 Goat Anti-Human IgG (H+L) | |
| 33206ES | YSFluor™488 بز ضد موش IgG (H+L) | |
| 33306ES | YSFluor™ 488 بز ضد IgG گاوی (H+L) | |
| 33406ES | YSFluor™ 488 بز ضد خوکچه هندی IgG (H+L) | |
| 33706ES | YSFluor™488 خرگوش ضد بز IgG (H+L) | |
| 33906ES | YSFluor™ 488 Rabbit Anti-Mouse IgG (H+L) | |
| 34906ES | YSFluor™488 IgG ضد گوسفند الاغ (H+L) | |
| 34106ES | YSFluor™488 Anti-Mouse IgG (H+L) | |
| 34206ES | YSFluor™488 IgG ضد خرگوش الاغ (H+L) | |
| 34306ES | YSFluor™ 488 Donkey Anti-Goat IgG (H+L) | |
| 34406ES | YSFluor™ 488 Donkey Anti-Rat IgG (H+L) | |
| 34506ES | YSFluor™488 Donkey ضد IgG خوکچه هندی (H+L) | |
| 34606ES | YSFluor™488 Donkey IgG ضد مرغ (H+L) | |
| 34706ES | YSFluor™488 خرگوش ضد IgY مرغ (H+L) | |
| 34806ES | YSFluor™488 IgG ضد انسان الاغ (H+L) | |
| 34856ES | FITC AffiniPure Goat Anti-Human IgG(H+L) | |
| 33107ES | FITC-AffiniPure بز ضد خرگوش IgG (H+L) | |
| 33207ES | FITC-AffiniPure بز ضد موش IgG (H+L) | |
| 33307ES | FITC-AffiniPure بز ضد موش IgG (H+L) | |
| 33707ES | FITC-AffiniPure Rabbit Anti-Goat IgG (H+L) | |
| 33807ES | FITC-AffiniPure Rabbit Anti-Sheep IgG (H+L) | |
| رودامین | 33109ES | رودامین (TRITC) بز ضد خرگوش IgG (H+L) |
| 33209ES | رودامین (TRITC) بز ضد موش IgG (H+L) | |
| 33709ES | رودامین (TRITC) Affini Pure Rabbit Anti-Goat IgG (H+L) | |
| 33210ES | Rhodamine Red-X (RRX) بز ضد موش IgG (H+L) | |
| فلورسانس نارنجی | 33112ES | YSFluor™594 AffiniPure بز ضد خرگوش IgG (H+L) |
| 33212ES | YSFluor™ 594 Goat Anti-Mouse IgG (H+L) | |
| 33222ES | YSFluor™ 594 Goat Anti-Human IgG (H+L) | |
| 33412ES | YSFluor™594 IgG ضد خوکچه هندی بز (H+L) | |
| 33312ES | YSFluor™ 594 بز ضد IgG گاوی (H+L) | |
| 33712ES | YSFluor™594 خرگوش ضد بز IgG (H+L) | |
| 33812ES | YSFluor™ 594 Rabbit Anti-Sheep IgG (H+L) | |
| 33912ES | YSFluor™594 Rabbit Anti-Mouse IgG (H+L) | |
| 34712ES | YSFluor™594 Rabbit Anti-Chicken IgY (H+L) | |
| 34112ES | YSFluor™ 594 Donkey Anti-Mouse IgG (H+L) | |
| 34212ES | YSFluor™594 IgG ضد خرگوش الاغ (H+L) | |
| 34312ES | YSFluor™ 594 Donkey Anti-Goat IgG (H+L) | |
| 34412ES | YSFluor™ 594 IgG ضد موش الاغ (H+L) | |
| 34512ES | YSFluor™594 Donkey ضد IgG خوکچه هندی (H+L) | |
| 34612ES | YSFluor™594 Donkey IgG ضد مرغ (H+L) | |
| 34812ES | YSFluor™594 IgG ضد انسان الاغ (H+L) | |
| 34912ES | YSFluor™594 IgG ضد گوسفند الاغ (H+L) | |
| 33208ES | Cy3-AffiniPure بز ضد موش IgG (H+L) | |
| 33308ES | Cy3-AffiniPure بز ضد موش IgG (H+L) | |
| 33708ES | Cy3-AffiniPure Rabbit Anti-Goat IgG (H+L) | |
| 33808ES | Cy3-AffiniPure Rabbit Anti-Sheep IgG (H+L) | |
| 34855ES | Cy3-AffiniPure Donkey Anti-Goat IgG(H+L) | |
| فلورسانس قرمز | 33113ES | YSFluor™647 بز ضد خرگوش IgG (H+L) |
| 33213ES | YSFluor™ 647 Goat Anti-Mouse IgG (H+L) | |
| 33223ES | YSFluor™647 IgG ضد انسانی بز (H+L) | |
| 33313ES | YSFluor™ 647 بز ضد IgG گاوی (H+L) | |
| 33413ES | YSFluor™ 647 IgG ضد خوکچه هندی بز (H+L) | |
| 33713ES | YSFluor™ 647 Rabbit Anti-Goat IgG (H+L) | |
| 33813ES | YSFluor™647 Rabbit Anti-Sheep IgG (H+L) | |
| 33913ES | YSFluor™ 647 Rabbit Anti-Mouse IgG (H+L) | |
| 34713ES | YSFluor™647 خرگوش ضد IgY مرغ (H+L) | |
| 34113ES | YSFluor™ 647 Donkey Anti-Mouse IgG (H+L) | |
| 34213ES | YSFluor™ 647 IgG ضد خرگوش الاغ (H+L) | |
| 34413ES | YSFluor™ 647 IgG ضد موش الاغ (H+L) | |
| 34813ES | YSFluor™647 IgG ضد انسان الاغ (H+L) | |
| 34913ES | YSFluor™647 IgG ضد گوسفند الاغ (H+L) |
مراجع
[1] Zhang B، Wang H، Liao Z، و همکاران.نانوذرات کونژوگه EGFP-EGF1 برای هدف قرار دادن سلول‌های نئوواسکولار و گلیوما در درمان گلیومای مغز [J]. مواد زیستی، 2014، 35 (13): 4133-4145. IF: 8.387[2] یو ایکس، وانگ جی، لیو جی، و همکاران. یک نانوعامل چندوجهی پپساتین A مبتنی بر پپتید برای تصویربرداری مولکولی از P-گلیکوپروتئین در مغز موش‌های صرعی [J]. زیست مواد، 1395، 76: 173-186. IF: 8.402
[3] Liu J، He Y، Zhang J، و همکاران. نانوحامل عامل دار ترکیبی بردار اختصاصی تشنج با خاصیت مدولاسیون P-گلیکوپروتئین برای تحویل داروی ضد صرع [J]. زیست مواد، 1395، 74: 64-76. IF: 8.402
[4] Ma Y، Ji Y، You M، و همکاران. برچسب‌گذاری و ردیابی طولانی‌مدت سلول‌های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان در شرایط آزمایشگاهی با استفاده از NaYF 4: Yb 3+، Er 3+ نانوذرات تبدیل upconversion [J]. Acta biomaterialia، 2016، 42: 199-208. IF: 6.638
[5] Wang Y، Lin YX، Qiao SL، و همکاران. نانوذرات پلیمری ماکروفاژ معکوس را در ریزمحیط تومور برای ایمونوتراپی [J] ممکن می‌سازد. بیومتریال، 2017، 112(15): 3e163. IF: 8.806
[6] لیو سی، او ایکس، لیو دبلیو، و همکاران. جهش های دو آللی در TTC29 باعث ناباروری مردان می شود استنوتراتوسپرمی در انسان و موش [J]. مجله آمریکایی ژنتیک انسانی، 2019، 105 (6): 1168-1181. 34106ES60 IF: 9.924
[7]Xu T، Ding W، Ao X، و همکاران. ARC نکروز برنامه ریزی شده و آسیب ایسکمی/خونرسانی مجدد میوکارد را از طریق مهار باز شدن mPTP [J] تنظیم می کند. زیست شناسی ردوکس، 2019، 20: 414-426.IF (7.126) (Alexa Fluor 488)
[8] Tan T، Wang Y، Wang J، و همکاران. هدف قرار دادن لیپوپروتئین های بیومیمتیک تزئین شده با پپتید باعث بهبود نفوذ عمیق و دسترسی به سلول های سرطانی در تومور جامد می شود. Acta Pharm Sin B. 2020؛ 10 (3): 529-545. الکسا فلور 488 با برچسب IgG (H+L)IF: 7.097
[9] یک هیدروژل فوتوکلیکی برای بهبود یافته ایمونوبلات تکی[J]. مواد کاربردی پیشرفته، 2020، 30.33112ES60 IF: 16.836
[10] Bingcheng Yi a,b,1, Lei Yuc,1, Han Tanga, et al. پوشش پلی دوپامین دوپ شده با لیزین افزایش می یابد antithrombogenicity و endothelialization یک عروق فیبری تراز الکتروریسی شده است پیوند.. مواد کاربردی امروز، 2021. 33207ES60 IF: 10.041