ماکروفاژها نقش های منحصر به فرد و حیاتی را در قسمت های مختلف بدن ایفا می کنند، با این حال، حذف دقیق ماکروفاژها به یک ابزار تحقیقاتی کلیدی برای مطالعه بهتر عملکردهای خاص ماکروفاژها در مناطق خاص و تأثیر آنها بر توسعه بیماری تبدیل شده است. لیپوزوم های کلودرونات یکی از اثبات شده ترین، مقرون به صرفه ترین و ایده آل ترین ابزار برای حذف ماکروفاژها هستند. لیپوزوم های کلودرونات را می توان به صورت داخل صفاقی، در ورید دم و به روش های مختلف دیگر برای حذف ماکروفاژها از بافت های مختلف تجویز کرد.
در ادامه یک سری موضوعات برای نشان دادن روش ها و اثربخشی حذف ماکروفاژها در سایت های مختلف به اشتراک می گذاریم تا بتوانیم مراجع و مرجع مفیدی را برای محققین فراهم کنیم.
معرفی روش های تزریق
تزریق ورید دم
تزریق ورید دم پس از 24 ساعت به حداکثر تخلیه می رسد. باید به نقطه زمانی تشخیص توجه شود.
1، موش ها را در یک جعبه ناهار معکوس قرار دهید، دم را از روزنه بیرون بیاورید، دو عدد وجود دارد. شریان ها و سه رگه های دم موش، دو شریان ها در دو طرف پشتی و شکمی دم و سه رگه ها به صورت زیگزاگ توزیع می شوند، معمولاً از سمت چپ و راست رگه ها استفاده می شود.
2، گاز را در حدود 70 درجه سانتیگراد آب گرم خیس کنید (یا آن را در الکل خیس کنید)، آن را بیرون بیاورید و دم آن را بپیچید تا به هدف اتساع عروق دم دست یابید و کراتین اپیدرمی را نرم کنید.
3- برای تزریق داخل وریدی دم، با انگشت شست و سبابه چپ قبل و بعد از پایین نگه داشتن دم موش، قسمتی در حدود 2 سانتی متر باقی می ماند، به طوری که پوست منقبض شده، رگ ها پرتر می شوند، دست راست سرنگ سوزنی 1 میلی لیتری را نگه می دارد، به طوری که سوزن و ورید از 30 درجه پایین تر (کمتر از 4) موازی باشند. سوزن، شروع تزریق دارو باید آهسته باشد، با مشاهده دقیق، در صورت عدم وجود مقاومت، درماتوم سفید ظاهر نشد، به این معنی است که رگ های خونی سوراخ شده است و می توان دارو را به صورت رسمی تزریق کرد.
4. برخی آزمایشات نیاز به تزریق مکرر ورید دم برای چند روز دارند، محل تزریق باید تا آنجا که ممکن است از انتهای دم شروع شود و به ترتیب به سمت ریشه دم حرکت کند و موقعیت عروقی را برای تزریق تغییر دهد. پس از برداشتن سوزن، محل تزریق را با پنبه به مدت 1 فشار دهید - 2 دقیقه برای قطع خونریزی
تزریق داخل صفاقی
تزریق داخل صفاقی پس از 48 به حداکثر تخلیه می رسد - 72 ساعت باید به تشخیص نقاط زمانی توجه شود.
1- ابتدا برای گرفتن موش ها از روش بایلینگ پشتی استفاده کنید، به طوری که سر آنها کمی به سمت عقب متمایل شده و شکم آنها به سمت بالا باشد، اندام عقبی چپ موش ها با انگشت کوچک ثابت شود و سپس محل تزریق با پنبه 75 درصد الکل استریل شود.
2-محل تزریق داخل صفاقی در موش 0.5 است سانتی متر در دو طرف خط وسط پایین شکم (همسطح با ریشه ران). برای جلوگیری از آسیب به اندام‌ها، هنگام نگه‌داشتن موش باید سر موش به سمت عقب متمایل شود تا اندام‌های زیر شکم به سمت بالا حرکت کنند.
3. سوزن سرنگ را داخل پوست سوراخ کنید، وارد ناحیه زیر جلدی شوید، سوزن را در امتداد ناحیه زیر جلدی به مدت 2 به جلو فشار دهید. - 3 میلی متر و سپس با زاویه 45 درجه بین سوزن و پوست داخل حفره شکم موش سوراخ کنید. نکته: پس از نفوذ به صفاق، مقاومت نوک سوزن از بین می رود.
4. پلاگ سوزن را به عقب بکشید، در صورت عدم بازگشت خون یا مایع، می توان دارو را تزریق کرد.
5، پس از تزریق، سوزن را به آرامی بچرخانید، سپس به آرامی سرنگ را بیرون بکشید تا از نشت مایع جلوگیری شود.
همچنین روش های مختلف تزریق برای محل های مختلف مطالعه مانند: تزریق زیر جلدی، تزریق تراشه، تزریق داخل جمجمه و غیره وجود خواهد داشت. قبل از آزمایش باید به ادبیات مربوطه مراجعه و با تیم فنی Yeasen مشورت کنید.
چرخه دوز و دوز
تجویز کوتاه مدت: یک بار تزریق لیپوزوم کلروفسفات 200 میکرولیتر (20 - 25 گرم وزن) در یک زمان خاص برای تشخیص کارایی پاکسازی ماکروفاژها یا برای آزمایشات پایین دست.
مصرف طولانی مدت: بیش از یک هفته یا بیشتر برای دستیابی به کلیرانس ماکروفاژها لازم است. برای مثال، در موش‌های WT، 200 µL (20 - 25 گرم وزن) معمولاً به عنوان اولین دوز و سپس 200 میکرولیتر داده می شود هر 2 تا 3 روز
پروتکل آزمون مرجع
| اندام / ماکروفاژ | مقدار مصرف (20-25 گرم/موش) |
| ماکروفاژهای پالپ طحال / قرمز | تک دوز: 200 میکرولیتر در موش (IV یا IP). |
| سلول های کبد / کوفر | تک دوز: 200 میکرولیتر در موش (IV یا IP). |
| ماکروفاژهای ریه/آلوئولار | IV (200-150 میکرولیتر) همراه با داخل تراشه یا داخل بینی (50 میکرولیتر) بهترین نتایج را به همراه دارد. |
| گره لنفاوی | تزریق (100-200 میکرولیتر) در موش، رژیم های دوز خاصی را می توان در ادبیات یافت. |
| مغز / میکروگلیا | ورود داخل بطن مغزی به مایع مغزی نخاعی، 10 میکرولیتر در موش، 50 میکرولیتر در موش. |
| خون/مونوسیت ها | 150-200 μL/موش (IV)، حداکثر سرعت تخلیه در عرض 24 ساعت به دست می‌آید، اما حداکثر سرعت تخلیه در 1 تا 7 روز بستگی به فشار دارد. |
توجه: موارد فوق فقط برای مرجع است، لطفاً به ادبیات مربوطه مراجعه کنید و قبل از آزمایش با تیم فنی Yeasen مشورت کنید.
توصیه محصول
| نام محصول | شماره مورد | مشخصات |
| 40337ES08 | 5 میلی لیتر | |
| 40337ES10 | 10 میلی لیتر | |
| 40338ES08 | 5 میلی لیتر | |
| 40338ES10 | 10 میلی لیتر |