پروتکل کلاسیک سیتوکین Wner برای کشت ارگانوئید

ارگانوئیدها سه بعدی هستند در شرایط آزمایشگاهی ساختارهایی که معماری و عملکرد اندام های واقعی را شبیه سازی می کنند. این مدل‌های خودآرایی که از سلول‌های بنیادی یا سلول‌های پرتوان مشتق شده‌اند، تنوع سلولی و پیچیدگی عملکردی بافت‌ها را تکرار می‌کنند. ارگانوئیدها با ارائه سیستم های فیزیولوژیکی مرتبط برای مطالعه زیست شناسی انسان، تحقیقات را در زیست شناسی رشد، مکانیسم های بیماری، کشف دارو و پزشکی شخصی پیش می برند.

را WNER ترکیب سیتوکین (Wnt-3a، نوگین، EGF، و R-Spondin 1) استاندارد طلایی برای کشت ارگانوئیدهای مختلف از جمله مدل های معده، روده، کبدی، پانکراس، پستانی و پروستات است. این سیتوکین ها به طور هم افزایی از خود نوسازی، تکثیر و تمایز بافتی خاص سلول های بنیادی حمایت می کنند.

نقش ها و کاربردهای سیتوکین

• R-Spondin 1 (RSPO1)

تابع: تقویت کننده سیگنالینگ Wnt ترشح شده که باعث نوسازی سلول های بنیادی و گسترش ارگانوئید می شود.
مکانیسم های کلیدی:
• Lgr5 (نشانگر سلول های بنیادی) را برای تقویت سیگنال دهی Wnt/β-catenin متصل می کند
• بتا کاتنین را تثبیت می کند، ژن های طرفدار تکثیر (c-myc، Cyclin D1) را فعال می کند.
• سیگنال دهی BMP را برای حفظ قدرت سلول های بنیادی Lgr5+ تضاد می کند
برنامه های کاربردی: برای کشت ارگانوئید معده، روده، کبد و پستان ضروری است.

• Wnt-3A

تابع: فعال کننده اولیه مسیر متعارف Wnt/β-catenin.
مکانیسم های کلیدی:
• گیرنده های Frizzled/LRP5/6 را برای تثبیت β-کاتنین متصل می کند
• فعالیت رونویسی TCF/LEF هسته ای را تحریک می کند
• برای نگهداری طولانی مدت ارگانوئید با EGF/Noggin هم افزایی می کند
برنامه های کاربردی: برای تکثیر ارگانوئید روده، مغز و کبد حیاتی است.

• EGF (فاکتور رشد اپیدرمی)

تابع: لیگاند گیرنده ErbB که باعث رشد اپیتلیال می شود.
مکانیسم های کلیدی:
• باعث ایجاد دیمریزاسیون EGFR → مسیرهای MAPK/PI3K را فعال می کند
• آپوپتوز را در ساختارهای کریپت-پرز روده سرکوب می کند
برنامه های کاربردی: برای رشد ارگانوئید روده و سلول های بنیادی گلیوما حیاتی است.

• نوگین

تابعآنتاگونیست پروتئین مورفوژنتیک استخوان (BMP) برای متعادل کردن سیگنال‌های Wnt در سوله‌های سلول‌های بنیادی حیاتی است.
مکانیسم های کلیدی:
• BMP4/7 را متصل و خنثی می کند و محور مهاری BMP-PTEN-β-catenin را مختل می کند.
• سرکوب مسیر Wnt را آزاد می کند، سیگنال های وابسته به β-کاتنین را تقویت می کند.
• بیان نشانگر سلول های بنیادی Lgr5 را برای طول عمر ارگانوئید حفظ می کند
برنامه های کاربردی: برای کشت طولانی مدت ارگانوئیدهای کبد، روده و لوله فالوپ ضروری است.

• شبکه سیگنالینگ سینرژیستیک

RSPO1-Wnt3A-EGF-Noggin برای تقلید از ریزمحیط های سلول های بنیادی in vivo همکاری کنید:

1. RSPO1 + Wnt3A تقویت تکثیر مبتنی بر Wnt/β-catenin

2. EGF مسیرهای بقا را فعال می کند و با آپوپتوز مقابله می کند

3. نوگین مهار Wnt با واسطه BMP را مسدود می کند و باعث گسترش پایدار سلول های بنیادی می شود.

این سیستم از رشد ارگانوئید قوی و وفاداری ساختاری در انواع مختلف بافت پشتیبانی می کند.

چرا سیتوکین های Yeasen را انتخاب کنید؟

· بدون حیوانات | خطرات آلودگی (ویروس ها، عوامل بیماری زا) را از بین می برد.

· خلوص بالا | > 95٪ توسط SDS-PAGE.

· اندوتوکسین کم | <0.01 EU/μg برای کاربردهای حساس.

· سازگاری دسته ای | عملکرد قابل اعتماد در بسیاری از تولیدات.

· فعالیت تایید شده | در ارگانوئیدهای تومور (ریه، دهانه رحم، تخمدان، پانکراس، کولورکتال) و ارگانوئیدهای طبیعی (روده انسان/موش) نشان داده شده است.

داده های اعتبار سنجی از کشت ارگانوئید

Human Wnt3a، Human RSPO1، Human noggin و Human EGF در مدل‌های in vitro مانند ارگانوئیدهای تومور انسانی مانند سرطان ریه، سرطان دهانه رحم، سرطان تخمدان، سرطان پانکراس و سرطان روده و ارگانوئیدهای طبیعی مانند ارگانوئیدهای روده کوچک انسان و موش تأیید شده‌اند.

فعالیت بالا

شکل 1.انسان Wnt3a：با توانایی آن در القای فعالیت گزارشگر Topflash در سلول های کلیه جنینی انسان HEK293T اندازه گیری شد. ED50 برای این اثر است 25 نانوگرم در میلی لیتر

شکل 2. با توانایی آن در القای فعالیت گزارشگر Topflash در سلول های کلیه جنینی انسان HEK293T اندازه گیری شد. EC50 برای این اثر 1.0 - 10.0 نانوگرم در میلی لیتر در حضور 5 نانوگرم در میلی لیتر Wnt3a نوترکیب است.

محصولات مرتبط

نام محصول	گربه شماره	مشخصات
انسان Wnt-3a	92294ES10	10 میکروگرم
	92294ES60	100 میکروگرم
	92294ES80	1 میلی گرم
RSPO1 انسان	92278ES10	10 میکروگرم
	92278ES60	100 میکروگرم
	92278ES80	1 میلی گرم
انسان نوگین	92623ES10	10 میکروگرم
	92623ES50	50 میکروگرم
	92623ES60	100 میکروگرم
	92623ES80	1 میلی گرم
EGF انسان	92708ES60	100 میکروگرم
	92708ES76	500 میکروگرم
	92708ES80	1 میلی گرم

خوراکی های کلیدی

· پروتکل WNER به طور جهانی قابل اجرا است معده، روده، کبد، پانکراسو سایر کشت های ارگانوئیدی

· سیتوکین های Yeasen تضمین می کنند تکرارپذیری بالا و انبساط ارگانوئیدی قوی با کنترل کیفیت دقیق

برای بهینه سازی پروتکل یا سفارشات انبوه، با تیم فنی ما تماس بگیرید.