کشت ارگانوئیدی

Oرگانوید تایپ کنید	مورد نیاز اسمرکز خرید مolecule	مورد نیاز جیردیف افبازیگران	رسانه ها و مواد افزودنی
روده باریک	Y-27632، SB-202190، الف 83-01، گاسترین، نیکوتین آمید	EGF، نوگین، R-Spondin 1، Wnt-3a	HEPES، محلول L-alanyl-L-glutamine، پنی سیلین-استرپتومایسین، N-2
جیآستریک	Y-27632، SB-202190، الف 83-01، گاسترین من، نیکوتین آمید	FGF-10، EGF، نوگین، R-Spondin 1، Wnt-3a	HEPES، محلول L-alanyl-L-glutamine، پنی سیلین- استرپتومایسین
Lبیماری آیور	Y-27632، الف 83-01، DAPT، فورسکولین، گاسترین، نیکوتین آمید، پروستاگلاندین E2	BMP-4، EGF، FGF-basic، FGF-10، HGF، نوگین، Wnt-3a	N-2، HEPES، L-محلول آلانیل ال گلوتامین، پنی سیلین - استرپتومایسین
کلیه	CHIR-99021،رتینوئیک اسید	BMP-2،BMP-4،BMP-7،FGF- اساسی ،FGF-9	HEPES، محلول L-alanyl-L-glutamine، پنی سیلین - استرپتومایسین
Lungs	CHIR-99021،SB-431542	اکتیوین A،FGF- اساسی،FGF-4،نوگین	HEPES، محلول L-alanyl-L-glutamine، پنی سیلین - استرپتومایسین
پآنکراس	گاسترین I،A 83-01،نیکوتین آمید	FGF-10، EGF،نوگین،R-Spondin 1،Wnt-3a	HEPES، محلول L-alanyl-L-glutamine، پنی سیلین - استرپتومایسین
پبرشته کردن	Y-27632،SB-202190،A 83-01،نیکوتین آمید،پروستاگلاندین E2،تستوسترون	EGF،اکتیوین A،FGF- اساسی،FGF-10،نوگین،R-Spond در 1،Wnt-10b	HEPES، محلول L-alanyl-L-glutamine، پنی سیلین - استرپتومایسین
مغده آمری	Y-27632	در اینجا گولین β-1،R-Spondin 1،R-Spondin 2،نوگین،EGF، FGF- اساسی،FGF-10،Wnt-3a،پرولاکتین	HEPES، محلول L-alanyl-L-glutamine، پنی سیلین - استرپتومایسین
آراتینا	CHIR-99021،Y-27632	SHH،Wnt-3a	HEPES، محلول L-alanyl-L-glutamine، پنی سیلین - استرپتومایسین
منگوش nner	SB-431542،A 83-01	BMP-4، FGF- اساسی	HEPES، محلول L-alanyl-L-glutamine، پنی سیلین - استرپتومایسین
بباران	Y-27632،MK-2206،GDC-0068،دورسومورفین	FGF- اساسی،نوگین،DKK-1، EGF،BDNF،GDNF	ب-27، HEPES، محلول L-alanyl-L-glutamine، پنی سیلین - استرپتومایسین

اسخلاصه از سمولکول‌های مال که معمولاً در کشت ارگانوئید استفاده می‌شوند: فوق العاده مفید، فراموش نکنید که آن را نشانه گذاری کنید!

❶ Y-27632 (Cat#53006ES، Cat#52604ES): این یک مهارکننده قوی سنگ است، که p160ROCK (Ki=140nM) و ROCK-II (IC50=800nM) را بطور رقابتی با ATP مهار می کند.، و همچنین PRK2 را مهار می کند (IC50=600nM)، و معمولاً در اولین بار کشت در بشقاب بذر اضافه می شود، اما نه در فرهنگ بعدی.Y-27632 (10 میکرومولار) می تواند آپوپتوز سلول های بنیادی را مهار کند، با درمان سلول های بنیادی جنینی انسان با Y-27632 (10 میکرومولار) به مدت 1 ساعت، کارایی شبیه سازی را بهبود بخشید و نتاج سلولی را طولانی تر کرد.

غلظت کاری توصیه شده 10 است μM

❷ SB-202190 (Cat#53005ES): یک مهارکننده قوی p38 MAPK کیناز که p38α/β را هدف قرار می دهد. SB202190 باعث تمایز سلول های بنیادی جنینی انسان به قلب می شود.، خود نوسازی سلول های بنیادی عصبی را ترویج می کند، و می تواند در کشت ارگانوئیدهای گوارشی و پستانی استفاده شود.

غلظت انحلال توصیه شده: 10 میلی گرم با افزودن 3.018 میلی لیتر محلول DMSO به 10 میلی مولار حل شده و در قسمت هایی در دمای 20- درجه سانتی گراد نگهداری می شود.

غلظت کاری توصیه شده 10 است μM

❸ CHIR-99021 (Cat# 53003ES): یک مشتق آمینوپیریمیدین که به عنوان یک مهارکننده GSK-3 (GSK3α/β) عمل می کند.، که باعث تمایز سلول های بنیادی جنینی انسان به سمت اندودرم می شود، و در کشت ارگانوئیدهای کلیوی و شبکیه استفاده می شود. CHIR-99021، در ترکیب با سایر معرف ها، برنامه ریزی مجدد سلول های سوماتیک به سلول های بنیادی را تحریک می کند.

غلظت انحلال توصیه شده: 5 میلی گرم با افزودن 3.58 میلی لیتر محلول DMSO به 3 میلی مولار حل شده و در قسمت هایی در دمای 20- درجه سانتی گراد نگهداری می شود.

rغلظت کاری توصیه شده: 3 میکرومولار

❹ A 83-01 (Cat#53002ES): یک مهارکننده مسیر Activin/NODAL/TGF-β است که فعالیت ALK5/4/7 کیناز را مهار می کند و عموماً در کبد استفاده می شود.، پروستات، و کشت ارگانوئید پستان، و اغلب برای مهار تمایز iPSCها و حفظ خود نوسازی سلول ها در شرایط آزمایشگاهی استفاده می شود. غلظت انحلال توصیه شده: 5 میلی گرم به 5.93 میلی لیتر محلول DMSO اضافه می شود تا تا 2 میلی مولار حل شود.، -20 ℃ تقسیم و ذخیره می شود. (توجه ویژه: این محصول در حالت محلول ناپایدار است، توصیه می شود در حال حاضر از آن استفاده کنید.)

rغلظت کاری توصیه شده: 2 میکرومولار

❺ گاسترین I (Cat#53007ES): گاسترین یک هورمون پپتیدی درون‌زای دستگاه گوارش است که ترشح اسید معده را از سلول‌های پوشش معده تحریک می‌کند. گاسترین به گیرنده کوله سیستوکینین B (CCKBR) متصل می شود.، که باعث افزایش Ca2+ داخل سلولی می شود، تولید فسفاتیدیلینوزیتول را افزایش می دهد، و پروتئین کیناز C فعال می شود. گاسترین همچنین در تکثیر و تمایز سلول های اپیتلیال معده نقش دارد و در مطالعه اندام های مشابه دستگاه گوارش استفاده می شود. افزودن گاسترین برای طولانی شدن بقای ارگانوئیدهای روده ای و کبدی در کشت مورد نیاز است.

غلظت انحلال توصیه شده: 1 میلی گرم با افزودن 2.38 میلی لیتر محلول آمونیاک 1 درصد به 0.2 میلی مولار حل شده و در قسمت هایی در دمای 20- درجه سانتی گراد نگهداری می شود.

rغلظت کاری توصیه شده: 10 نانومتر

❻ نیکوتین آمید نیکوتین آمید (Cat# 51402ES): یک ویتامین B3 که در انواع واکنش های ردوکس آنزیمی نقش دارد و در دستگاه گوارش استفاده می شود.، کبد، و کشت ارگانوئید پستان.

نیکوتین آمید همراه با سیتوکین ها و سایر مواد بیوشیمیایی برای اعمال خواص ضد التهابی و تقویت تمایز سلول های بنیادی مزانشیمی به سلول های تولید کننده انسولین استفاده می شود.، برای مهار فعالیت سیرتوئین ها، و برای ترویج تشکیل ارگانوئیدها و افزایش طول عمر ارگانوئیدها.

غلظت انحلال توصیه شده: 100 میلی گرم با افزودن 8.19 میلی لیتر H2O (یا DMSO) در 100 میلی مولار حل شده و در قسمت هایی در دمای 20- درجه سانتی گراد ذخیره می شود.

rغلظت کاری توصیه شده: 10 میلی‌مولار

❼ فورسکولین تریکوتسن (Cat#51001ES): آدنیلیل سیکلاز را فعال می کند و معمولاً برای افزایش سطح cAMP داخل سلولی استفاده می شود. فورسکولین باعث تمایز بسیاری از انواع سلول ها می شود و PXR و FXR را فعال می کند. دارای اثرات ضد انعقاد پلاکتی و ضد فشار خون و، هنگامی که با مولکول های کوچک دیگر ترکیب می شود، می تواند برنامه ریزی مجدد فیبروبلاست را به iPSC ها القا کند. این ماده باید به کشت های ارگانوئیدی کبد اضافه شود. دوباره به iPSC ها برنامه ریزی شد. باید در طی کشت اندام شبیه کبد اضافه شود. غلظت کاری توصیه شده: 1-10 میکرومولار

❽ پروستاگلاندین E2 (Cat#60810ES): پروستاگلاندین E2 (PGE2) بسیاری از سیستم های فیزیولوژیکی را تنظیم می کند.، تکثیر و تمایز سلولی را پس از اتصال به گیرنده های خاص واسطه می کند، لازم است به کشت اندام های مشابه کبد و پروستات اضافه شود، و در کاهش عضله صاف نقش دارد، التهاب، باروری، تنظیم چرخه خواب و یکپارچگی مخاط معده.

غلظت انحلال توصیه شده: 1 میلی گرم به 0.28 میلی لیتر محلول DMSO حل شده تا 10 میلی مولار اضافه شده و در قسمت هایی در دمای 20- درجه سانتیگراد ذخیره می شود.

غلظت کاری توصیه شده: 500 نانومتر

❾ N-acetyl-L-Cysteine ​​(Cat#50303ES): N-acetyl-L-cysteine ​​(NAC) پیش ساز آنتی اکسیدان گلوتاتیون است.، که خاصیت آنتی اکسیدانی دارد، و یک مهارکننده ROS که آپوپتوز را در سلول های عصبی مهار می کند، و در اکثر کشت های ارگانوئیدی لازم است اضافه شود.

غلظت انحلال توصیه شده: 2 گرم به 24.51 میلی لیتر H2O (یا DMSO) حل شده تا 500 میلی مولار اضافه شده و در قسمت هایی در دمای 20- درجه سانتیگراد ذخیره می شود.

غلظت کاری توصیه شده: 1 میلی متر

محصول توصیهn

ترکیبات مولکولی کوچک (بازدارنده/فعال کننده)

نام محصول	شماره کاتالوگ	استشدید
رتینوئیک اسید (رتینوئیک اسید، رتینوئیک اسید)	53001ES	100 mg/500 mg/1 g
الف 83-01	53002ES	1 میلی گرم/5 mg/10 میلی گرم
CHIR-99021	53003ES	2 میلی گرم/5 mg/10 میلی گرم
SB-431542	53004ES	5 mg/10 mg/50 میلی گرم
SB-202190	53005ES	5 mg/10 mg/25 میلی گرم
Y-27632	53006ES	1 میلی گرم/5 mg/10 میلی گرم
گاسترین من (انسان)	53007ES	1 میلی گرم/5 میلی گرم
MK-2206 2HCl	53008ES	1 میلی گرم/5 mg/10 میلی گرم
GDC-0068 (ایپاتاسرتیب; RG7440; GDC0068)	53009ES	1 میلی گرم/5 mg/10 میلی گرم
دورسومورفین دی هیدروکلراید (دورسومورفین 2HCl)	53010ES	1 میلی گرم/5 mg/10 میلی گرم
Y-27632 دی هیدروکلراید	52604ES	5 mg/10 mg/25 میلی گرم
نیکوتین آمید	51402ES	1 g/5 g
DAPT (GSI-IX، LY-374973)	52104ES	5 mg/25 میلی گرم
فورسکولین مو گلو	51001ES	10 میلی گرم/50 mg/100 mg/1 g
پروستاگلاندین (PG) E2 پروستاگلاندین E2	60810ES	1 میلی گرم
تستوسترون	60803ES	1 g/5 g
NAC (N-استیل-L-سیستئین)	50303ES	2 g
RepSox	53016ES	5 mg/10 mg/25 میلی گرم
LDN193189 (DM-3189)	53012ES	5 mg/10 میلی گرم

رسانه و مکمل ها

نام محصول	شماره کاتالوگ	استشدید
HEPES رایگان اسید سلول فرهنگ درجه	60110ES	100 گرم/500 g
ال-آلانیل-ال-گلوتامین راه حل، 200 میلی متر ال-آلانیل-L-گلوتامین، 200 میلی متر	60701ES	20 میلی لیتر/100 میلی لیتر/500 میلی لیتر
پنی سیلین-استرپتومایسین (100×)، مناسب است برای سلول مس lture پنی سیلین-استرپتومایسین (دوگانه آنتی بادی) برای سی خوب فرهنگ	60162ES	100 میلی لیتر
B-27 بدون سرم متوسط، 50 x	60703ES	10 میلی لیتر
N-2 مکمل، سرم رایگان، 100X N-2 سرم رایگان افزودنی، 100×	60706ES	5 میلی لیتر

سیتوکین

نام محصول	شماره کاتالوگ	استشدید
نوترکیب انسان اکتیوین الف	91702ES	10 میکروگرم/100 میکروگرم/500 میکروگرم
نوترکیب انسان BMP-2	92051ES	10 میکروگرم/100 میکروگرم/500 میکروگرم
نوترکیب انسان DKK-1	92275ES	20 میکروگرم/100 میکروگرم/500 میکروگرم
نوترکیب انسان EGF	92701ES	100 میکروگرم/500 میکروگرم
نوترکیب انسان bFGF	91330ES	10 میکروگرم/100 میکروگرم/500 میکروگرم
نوترکیب انسان FGF-4	91303ES	5 میکروگرم/100 میکروگرم/500 میکروگرم
نوترکیب انسان FGF-9	91305ES	5 میکروگرم/100 میکروگرم/500 میکروگرم
نوترکیب انسان FGF-10	91306ES	5 میکروگرم/100 میکروگرم/500 میکروگرم
نوترکیب انسان GDNF	92102ES	10 میکروگرم/100 میکروگرم/500 میکروگرم
نوترکیب انسان نوگین	92528ES	5 میکروگرم/100 میکروگرم/500 میکروگرم
نوترکیب انسان NRG1-بتا 1	92711ES	10 میکروگرم/100 میکروگرم/500 میکروگرم
نوترکیب انسان R-Spondin 1	92274ES	100 میکروگرم/1 میلی گرم
نوترکیب انسان خس	92566ES	5 میکروگرم/100 میکروگرم/500 میکروگرم
نوترکیب انسان BAFF	90604ES	5 میکروگرم/100 میکروگرم/500 میکروگرم
نوترکیب انسان sCD40 لیگاند	90606ES	10 میکروگرم/100 میکروگرم/500 میکروگرم
نوترکیب انسان BMP-4	92053ES	10 میکروگرم/100 میکروگرم/500 میکروگرم
نوترکیب انسان HGF	92055ES	5 میکروگرم/100 میکروگرم/500 میکروگرم
نوترکیب انسان BDNF	92129ES	5 میکروگرم/20 میکروگرم/100 میکروگرم

مینی کلاس درس: ترکیبات مولکولی کوچک ترکیباتی با وزن مولکولی کمتر از 1000 Da (به ویژه کمتر از 500 Da) و دارای فعالیت بیولوژیکی هستند.برخلاف سیتوکین ها و پروتئین ها، مولکول های کوچک می توانند از طریق غشای سلولی وارد سلول شوند و عملکردهای بیولوژیکی خود را انجام دهند. ترکیبات مولکولی کوچک دارای طیف وسیعی از اهداف هستند و به طور گسترده در بسیاری از تحقیقات مهم مورد استفاده قرار گرفته اند زمینه های علوم زیستی، مانند ساقه سلول ها، ارگانوئیدها، ایمونولوژی، نوروبیولوژی، اپی ژنتیک، آپوپتوز، کانال های یونی، انکولوژی و انتقال سیگنال

Yeasen خط تولید مولکول کوچک طیف و تنوع کاملی را پوشش می دهد از محصولات، با خلوص بالا، بازرسی کیفیت دقیق، تضمین کیفیت، تیم فنی حرفه ای پیش فروش و پس از فروش، و قیمت عالی و نسبت قیمت به عملکرد بالای محصولات. ما اصرار داریم که با محصولات با کیفیت بالا به مشتریان خود خدمت کنیم تا به تحقیقات علمی شما کمک کنیم!

مراجع

[1] Sato T، Stange DE، و همکاران. گسترش طولانی مدت ارگانوئیدهای اپیتلیال از کولون انسان، آدنوم، آدنوکارسینوم و اپیتلیوم بارت. گوارش. 2011 نوامبر؛ 141 (5): 1762-72. doi:10.1053/j.gastro.2011.07.050. Epub 2011 Sep 2. PMID: 21889923.

[2] لنکستر MA، رنر ام، و همکاران. ارگانوئیدهای مغزی رشد مغز انسان و میکروسفالی را مدل می کنند. طبیعت. 2013؛ 501 (7467): 373-379. doi:10.1038/nature12517.

[3] گرجیو سی و همکاران سوله های سه بعدی مصنوعی توسعه پانکراس را در شرایط آزمایشگاهی تخریب می کنند. توسعه. 2013.140 (21): 4452-4462. http://dx.doi.org/10.1242/dev.096628.

[4] مک کراکن KW و همکاران. مدل‌سازی رشد انسان و بیماری در ارگانوئیدهای معده مشتق از سلول‌های بنیادی پرتوان طبیعت 2014.516(7531):400-404. http://dx.doi.org/10.1038/nature13863.

[5] ژائو بی، نیکل سی، و همکاران. خلاصه کردن عفونت SARS-CoV-2 و آسیب کلانژیوسیت با ارگانوئیدهای مجرای کبد انسان. سلول پروتئینی اکتبر 2020؛ 11 (10): 771-775. doi: 10.1007/s13238-020-00718-6. PMID: 32303993; PMCID: PMC7164704.

[6] Qu M، Xiong L، و همکاران. ایجاد کشت های ارگانوئیدی روده ای که بازسازی اپیتلیال مرتبط با آسیب را مدل سازی می کند. Cell Res. 2021 مارس؛ 31 (3). 259-271. doi: 10.1038/s41422-020-00453-x. Epub 2021 8 ژانویه. PMID:

[7] 33420425; PMCID: PMC8027647.

[8] شرکت BlueRock Therapeutics اولین بیمار دریافت شده با DA01 را در مطالعه فاز 1 در بیماران مبتلا به بیماری پارکینسون پیشرفته اعلام کرد. بیانیه مطبوعاتی BlueRock Therapeutics: 8 ژوئن 2021.

[9] Takasato M، Er PX، و همکاران.ارگانوئیدهای کلیه از سلول های iPS انسانی حاوی دودمان های متعدد هستند و نفروژنز انسان را مدل می کنند. طبیعت 2015.526(7574):564 -568. http://dx.doi.org/10.1038/nature15695.

[10] اسپنس JR، Mayhew CN، و همکاران. تمایز هدایت شده سلول های بنیادی پرتوان انسانی به بافت روده در شرایط آزمایشگاهی. طبیعت. 2011.470(7332):105- 109. http://dx.doi.org/10.1038/nature09691.