راهنمای رایگان: بهینه سازی گردش کار تصفیه پروتئین

خالص سازی پروتئین یک تکنیک اساسی در بیوشیمی و زیست شناسی مولکولی است که به طور گسترده در تحقیقات، تشخیص و کاربردهای درمانی مورد استفاده قرار می گیرد. برای مطالعه یک پروتئین خاص، اولین قدم جداسازی و خالص سازی آن از نمونه های بیولوژیکی است. با این حال، با توجه به تنوع پروتئین ها و پیچیدگی سیستم های بیولوژیکی، دستیابی به پروتئین با خلوص بالا می تواند یک چالش باشد. درک اصول اصلی خالص سازی پروتئین و انتخاب تکنیک های مناسب برای تحقیق شما می تواند کارایی و بازده گردش کار شما را تا حد زیادی افزایش دهد.

اصول خالص سازی پروتئین

خالص سازی پروتئین به تفاوت در خواص فیزیکی و شیمیایی پروتئین ها مانند اندازه، بار، آبگریزی و میل ترکیبی برای لیگاندهای خاص متکی است. با بهره برداری از این تفاوت ها، محققان می توانند به طور موثر پروتئین های هدف را از سایر اجزای بیولوژیکی جدا کرده و آلودگی را به حداقل برسانند.

در اینجا تکنیک‌های اولیه خالص‌سازی پروتئین بر اساس مکانیسم‌های جداسازی متمایز آمده است:

هر یک از این تکنیک ها را می توان با انتخاب مواد و ستون های مناسب بهینه کرد. روش ایده آل به ویژگی های پروتئین و سطح خلوص مورد نیاز برای کاربردهای پایین دست بستگی دارد.

بهینه سازی گردش کار تصفیه پروتئین با Yسهولت محصولات بیولوژیکی

در Yeasen زیست شناسی، ما طیف گسترده ای از معرف ها و مواد با کیفیت بالا را ارائه می دهیم که برای ساده سازی تصفیه پروتئین طراحی شده اند. چه در حال کار با نمونه‌های بیولوژیکی پیچیده باشید یا به پروتئین‌های با بازده و خلوص بالا نیاز داشته باشید، ما ابزارهایی را برای بهبود فرآیند تصفیه شما ارائه می‌کنیم. در اینجا مروری بر برخی از محصولات کلیدی ما برای کمک به شما در بهینه‌سازی گردش کار تصفیه آورده شده است:

تگ تصفیه پروتئین او (Cat#20502ES):

در بیان پروتئین نوترکیب، برچسب او (معمولاً 6×His) به دلیل اندازه کوچک، ایمنی زایی کم و تأثیر کم بر عملکرد پروتئین به طور گسترده ای استفاده می شود. پروتئین های برچسب او را می توان به طور موثر توسط رزین های میل ترکیبی با یون های نیکل، مانند رزین های Ni-NTA خالص کرد. رزین آگاروز HisSep Ni-NTA (Cat#20502ES) ارائه شده توسط Yسهولت زیست شناسی از ژل آگارز بسیار متقابل به عنوان ماتریکس استفاده می کند، که با لیگاند چهارگانه هماهنگ شده نیتروژن-تری استیک اسید (NTA) ترکیب شده است تا کلات های یون نیکل پایدار را تشکیل دهد. ساختار ترکیبی اتصال کارآمد پروتئین و عملکرد شستشو را تضمین می کند.

تگ خالص سازی میل ترکیبی آنتی بادی

خالص سازی میل ترکیبی آنتی بادی های برچسب از اتصال ویژه بالا بین آنتی بادی و برچسب اختصاصی آن برای دستیابی به خالص سازی پروتئین فیوژن استفاده می کند. برچسب های رایج شامل پرچم، HA، Mycو غیره. با استفاده از محیط میل آنتی بادی مربوطه، پروتئین مورد نظر را می توان به طور موثر از نمونه های پیچیده جدا کرد.

زیست شناسی Yeasen انواع مختلفی از محصولات تصفیه میل آنتی بادی برچسب را ارائه می دهد:

• قرابت ضد پرچم ژل (Cat#20584ES):
  تهیه شده از آنتی بادی مونوکلونال IgG2b موش با کیفیت بالا با 4% ژل آگارز با پیوند متقابل بالا.کوپلینگ تامین ugh، دارای ظرفیت بارگیری پروتئین همجوشی Flag-tag بالا، suبرای رسوب ایمنی و خالص سازی پروتئین های Flag-tag قابل استفاده است. Yeasen.com

• ژل آنتی HA Affinity(گربه شماره 20586ES):
  تهیه شده از آنتی بادی مونوکلونال IgG1 موش با کیفیت بالا و ژل Sepharose 4B از طریق کوپلینگ تامین، دارای ظرفیت بارگیری بالایی از پروتئین های همجوشی HA-tag است که برای رسوب ایمنی و خالص سازی پروتئین های HA-tag مناسب است. مخمر.com

• ژل Anti-Myc Affinity(گربه شماره 20587ES):
  آنتی بادی مونوکلونال IgG1 موش با کیفیت بالا با ژل Sepharose 4B که برای خالص سازی پروتئین های برچسب گذاری شده Myc طراحی شده است، با ویژگی بالا و توانایی اتصال بالا، جفت شده است.

• مهره های ایمونومغناطیسی ضد پرچم(گربه شماره 20565ES):
  این مهره ایمونومغناطیسی با میکروسفرهای آگارز مغناطیسی با استفاده از آنتی بادی مونوکلونال IgG2b مشتق شده از موش با کیفیت بالا جفت می شود که می تواند به سرعت پروتئین های برچسب گذاری شده Flag را تحت تأثیر میدان های مغناطیسی خالص کند و برای خالص سازی نمونه های کوچک مناسب است.

تصفیه میل ترکیبی آنتی بادی (Cat#36401ES):

تصفیه میل ترکیبی آنتی بادی روشی برای استفاده از اتصال اختصاصی یک آنتی بادی به آنتی ژن آن برای خالص سازی پروتئین است. پروتئین نوترکیب مقاوم به قلیایی A رزین خالص سازی آگارز (Cat#36401ES) معمولاً به عنوان یک محیط خالص سازی آنتی بادی استفاده می شود و به طور گسترده برای خالص سازی و غنی سازی آنتی بادی استفاده می شود.

پروتئیناز

در مطالعات پروتئینی، پروتئازها برای شکافتن تگ های همجوشی و بازیابی حالت طبیعی پروتئین هدف استفاده می شوند. ترکیب این پروتئازها در گردش کار خالص سازی پروتئین می تواند کیفیت و عملکرد پروتئین های مورد نظر شما را افزایش دهد و پروژه های تحقیق و توسعه پیشرفته را تسهیل کند.

• انتروکیناز نوترکیب (Cat#20401ES):

انتروکیناز، همچنین به عنوان انتروپپتیداز شناخته می شود، یک پروتئاز سرین است که به طور خاص پس از توالی اسید آمینه DDDDK می شکند. انتروکیناز نوترکیب Yeasen در بیان می شود اشرشیاکلی و عاری از برچسب است، اطمینان حاصل می کند که با برنامه های پایین دست تداخلی ندارد. این آنزیم برای حذف تگ های همجوشی از پروتئین های نوترکیب، تسهیل تولید پروتئین های بومی برای مطالعات ساختاری و عملکردی ایده آل است.

• لPNGase F (Cat#20407ES):

PNGase F یک آمیداز است که به طور خاص بین درونی‌ترین باقی‌مانده‌های GlcNAc و Asn گلیکوپروتئین‌های مرتبط با N می‌شکافد. Yeasen's PNGase F در غلظت 100000 U/ml ارائه می‌شود که فعالیت بالایی برای واکنش‌های گلیکوزیلاسیون ارائه می‌دهد. این آنزیم برای مطالعه ساختارها و عملکردهای گلیکوپروتئین بسیار مهم است، زیرا گلیکان های مرتبط با N را بدون تأثیر بر ستون فقرات پپتیدی حذف می کند.

• تریپسین نوترکیب (MS-SAFE) (Cat#20416ES):

تریپسین یک پروتئاز سرین است که پیوندهای پپتیدی را در سمت کربوکسیل باقی مانده های لیزین و آرژنین می شکند. تریپسین نوترکیب Yeasen MS-SAFE است، به این معنی که به دلیل خلوص بالا و حداقل فعالیت اتولیتیک برای کاربردهای طیف سنجی جرمی مناسب است. این آنزیم برای مطالعات پروتئومی، از جمله هضم پروتئین برای تجزیه و تحلیل طیف سنجی جرمی ایده آل است.

تطهیر روش	نوع معرف	نوع محصول	محصولات توصیه شده
فیلتراسیون ژل	دکستران ژل کروماتوگرافی	نمک زدایی پرکننده ها نمک زدایی ستون های از پیش بسته بندی شده نمک زدایی ستون های گرانشی ستون ها را بچرخانید	نمک زدایی ستون G25 M(گربه شماره 20590ES) ستون نمک زدایی چرخشی، 0.5 میلی لیتر (Cat#20599ES) ستون نمک زدایی جاذبه، 8.3 میلی لیتر (گربه شماره 20741ES)
	آگارز ژل کروماتوگرافی	پرکننده ستون های از پیش بسته بندی شده	بسته بندی کروماتوگرافی ژل آگارز با وضوح بالا Geldex 200 PG (10-600 کیلو دالتون) (Cat#20598ES) ستون کروماتوگرافی Geldex 200 PG (Cat#20593ES)
تبادل یون	تبادل آنیونی کروماتوگرافی	پرکننده ستون های از پیش بسته بندی شده	Q Agarose HP (بسته بندی کروماتوگرافی تبادل آنیون Q Strong HP) (Cat#20460ES) ستون از پیش بسته بندی شده Q HP Strong Anion Exchange، 5 میلی لیتر (Cat#20462ES)
	کروماتوگرافی تبادل کاتیونی		SP Agarose HP (SP Strong Cation Exchange Chromatography Packing HP) (Cat#20463ES) SP HP Strong Cation Exchange Column Prepacked, 5 ml (Cat#20465ES)
کروماتوگرافی برهمکنش هیدروفوبیک	آبگریز ضعیف کروماتوگرافی	پرکننده ستون های از پیش بسته بندی شده	محیط کروماتوگرافی هیدروفوبیک ضعیف بوتیل با وضوح بالا (Cat#20484ES) ستون کروماتوگرافی آبگریز ضعیف بوتیل HP، 5 میلی لیتر (Cat#20485ES)
	آبگریز قوی کروماتوگرافی		محیط کروماتوگرافی هیدروفوبیک فنیل با وضوح بالا (Cat#20486ES) ستون از پیش بارگذاری شده کروماتوگرافی هیدروفوبیک فنیل HP، 5 میلی لیتر (Cat#20487ES)
تصفیه میل جنسی	برچسب او تصفیه پروتئین	رزین ستون های از پیش بسته بندی شده دانه های مغناطیسی تصفیه	رزین تصفیه آگارز پروتئین او (Cat#20502ES) ستون از پیش بارگذاری شده خالص سازی پروتئین His-tag، 5 میلی لیتر (Cat#20504ES) مهره‌های مغناطیسی تصفیه‌کننده پروتئین او (Cat#20561ES)
	GST-برچسب تصفیه پروتئین	رزین ستون های از پیش بسته بندی شده دانه های مغناطیسی تصفیه	رزین گلوتاتیون آگارز (برای تصفیه پروتئین با برچسب GST) (Cat#20507ES) ستون از پیش بارگذاری شده تصفیه پروتئین با برچسب GST، 5 میلی لیتر (Cat#20510ES) مهره های مغناطیسی تصفیه پروتئین با برچسب GST (Cat#20562ES)
	MBP-برچسب تصفیه پروتئین	رزین ستون های از پیش بسته بندی شده	رزین خالص سازی با پیوند متقابل پروتئین با برچسب MBP (Cat#20515ES) MBP Tagged Protein Purification Column Preloaded, 5ml (Cat#20517ES)
	استرپتوکوکی (Ⅱ) برچسب بزنید تصفیه پروتئین	رزین ستون های از پیش بسته بندی شده	رزین خالص‌سازی پروتئین آگارز با برچسب استرپتوکوک (II) (Cat#20495ES)
	بیوتی-برچسب تصفیه پروتئین	رزین ستون های از پیش بسته بندی شده مهره های ایمونومغناطیسی	رزین تصفیه استرپتاویدین آگارز (Cat#20512ES) ستون از پیش بارگذاری شده تصفیه مولکولی بیوتین، 5 میلی لیتر (Cat#20514ES) دانه های ایمونومغناطیسی استرپتاویدین (SAV) (Cat#47503ES)
	تگ آنتی بادی Affinity Purification	ژل مهره های ایمونومغناطیسی	ژل تصفیه کننده آنتی فلگ افینیتی (Cat#20584ES) ژل تصفیه کننده آنتی HA Affinity (Cat#20586ES) ژل تصفیه کننده آنتی Myc Affinity (Cat#20587ES) مهره های ایمونومغناطیسی ضد پرچم (Cat#20565ES)
	تصفیه میل ترکیبی آنتی بادی	رزین ستون های از پیش بسته بندی شده مهره های ایمونومغناطیسی	پروتئین نوترکیب A Agarose Purification Resin (Cat#36401ES) رزین تصفیه آگارز پروتئین G (Cat#36405ES) رزین تصفیه آگارز پروتئین A/G (Cat#36403ES) دانه های ایمونومغناطیسی پروتئین A/G (Cat#36417ES)
	سایر تصفیه های آنتی بادی میل ترکیبی	رزین ستون های از پیش بسته بندی شده	رزین پاکسازی حذف با راندمان بالا (Cat#20518ES) محیط تصفیه هپارین افینیتی (Cat#20493ES)
其他产品	پروتئازها	آنزیم های جدا کننده را برچسب بزنید گلیکوزیدازها آنزیم های درجه طیف سنجی جرمی	E.coli انتروکیناز نوترکیب بیان شده (بدون برچسب) (Cat#20401ES) ترومبین گاوی (قابلیت زنده ماندن بالا، > 2000 واحد بین المللی در میلی گرم) (Cat#20402ES) پروتئاز rTEV پروتئاز نوترکیب توتون اچ ویروس (Cat#20403ES) PNGase F، N-گلیکوزیداز F (100000 U/mL) (Cat#20407ES) تریپسین نوترکیب (MS-SAFE) تریپسین نوترکیب (درجه طیف سنجی جرمی) (Cat#20416ES)
	مواد مصرفی کروماتوگرافی	ستون های خالی جریان جاذبه Empty Columns را تایپ کنید ستون های YXK کیسه های دیالیز	12 میلی لیتر ستون خالی کروماتوگرافی جاذبه (Cat#20523ES) ستون خالی 5 میلی لیتری نوع C (متصل به آکاتا، سرنگ یا پمپ پریستالتیک) (Cat#20526ES) ستون خالی کروماتوگرافی YXK16/70 (Cat#20443ES) کیسه دیالیز 27 میلی‌متری (MWCO 50 کیلو دالتون) (Cat#20534ES)

نتیجه گیری: گردش کار خود را مطابق با نیازهای خود تنظیم کنید

بهینه‌سازی گردش کار خالص‌سازی پروتئین برای دستیابی به پروتئین‌های با خلوص بالا و بازدهی بالا برای تحقیق یا کاربرد شما بسیار مهم است. با درک اصول تصفیه و انتخاب ابزار مناسب، می توانید فرآیند خود را ساده کنید و از دام های رایج جلوگیری کنید. Yeasen زیست شناسی با بالاترین کیفیت معرف ها و مواد مصرفی را برای تمام مراحل تصفیه پروتئین ارائه می دهد و اطمینان می دهد که پروتئین های شما خالص، کاربردی و آماده برای تجزیه و تحلیل هستند.

برای کسب اطلاعات بیشتر در مورد اینکه چگونه محصولات ما می توانند فرآیند تصفیه پروتئین شما را بهبود بخشند، از صفحات محصول ما دیدن کنید یا برای توصیه های شخصی با تیم ما تماس بگیرید.

برای اطلاعات بیشتر یا خرید به ما مراجعه کنید ما رسمیبسایت.