Yeasen ژل Affinity Anti-DYKDDDDD (پرچم): تصفیه دقیق برای پروتئین های غشایی کم فراوانی

در زمینه تحقیقات زیست پزشکی، تصفیه پروتئین یک فناوری کلیدی برای کشف اسرار زندگی است. با این حال، روش‌های تصفیه سنتی با ناکارآمدی و هزینه‌های بالا دست و پنجه نرم می‌کنند - به‌ویژه برای پروتئین‌های غشایی، که تمرکز تحقیقات زیست‌شناسی ساختاری هستند. این پروتئین‌ها از نظر ساختاری پیچیده هستند، سطح بیان پایینی در غشای سلولی دارند و به شرایط محیطی حساس هستند و خالص‌سازی آنها را به‌ویژه دشوار می‌کند. اکنون، Yeasen Biotech، با قابلیت های برجسته تحقیق و توسعه، ارتقا یافته را راه اندازی کرده است ژل میل ترکیبی ضد DYKDDDDK(پرچم). (Cat#20584ES)ابزاری قدرتمند برای تصفیه کارآمد و راحت پروتئین، حتی برای پروتئین های غشایی چالش برانگیز.

عملکرد محصول

1. ویژگی بالا و ظرفیت اتصال بالا: مزایای کلیدی برای جذب پروتئین هدف

Yeasen ژل میل ترکیبی ضد DYKDDDDK(پرچم). (Cat#20584ES) با جفت کووالانسی آنتی بادی های مونوکلونال IgG2b موش با کیفیت بالا با ژل آگارز دارای پیوند متقابل 4 درصد تهیه شده است. این فرآیند تولید منحصر به فرد، ویژگی بسیار بالایی را به محصول می بخشد و آن را قادر می سازد تا پروتئین های همجوشی را با برچسب Flag به طور دقیق تشخیص دهد و پیوند دهد. آیا این پروتئین فیوژن پرچم N ترمینال است که توسط Met (مت-پرچم-پروتئین، پروتئین فیوژن پرچم N ترمینال (پرچم-پروتئین، یا پروتئین فیوژن C ترمینال پرچم (پروتئین-پرچم) ژل می تواند به راحتی آنها را اداره کند.

در خالص سازی پروتئین غشایی، این ویژگی اهمیت ویژه ای دارد زیرا این پروتئین ها از نظر ساختاری پیچیده هستند و مستعد اتصال غیر اختصاصی با پروتئین های دیگر هستند. ویژگی بالای ژل Flag به طور موثر تداخل پروتئین های غیر اختصاصی را کاهش می دهد و خلوص بالای پروتئین های غشایی خالص را تضمین می کند. علاوه بر این، ژل دارای ظرفیت اتصال بالایی برای پروتئین‌های همجوشی برچسب‌دار Flag (حداقل 1.1 میلی گرم پروتئین در میلی لیتر ژل). این بدان معنی است که حتی اگر پروتئین مورد نظر در سطوح پایین بیان شود، همچنان می توان آن را به طور موثر با استفاده از ژل Flag جذب و خالص کرد.

2. خلوص بالا و بازده بالا: فعال کردن برنامه های پایین دست

Yeasen ژل میل ترکیبی ضد DYKDDDDK(پرچم). (Cat#20584ES) دارای حداقل اتصال غیر اختصاصی ناخالصی ها است که در نتیجه پس از خالص سازی نمونه های پروتئینی بسیار خالص ایجاد می شود. این برای کاربردهای پایین دستی مانند سنجش زیست فعالی و تجزیه و تحلیل ساختاری بسیار مهم است. نمونه‌های پروتئینی با خلوص بالا داده‌های تجربی دقیق‌تری را ارائه می‌کنند و پایه‌ای محکم برای مطالعات محققان ایجاد می‌کنند.

3. گردش کار تجربی بهینه شده: ساده کردن چالش های تصفیه پروتئین

برای جلوگیری از آسیب ساختاری به پروتئین ها، به ویژه برای پروتئین های غشایی پیچیده، تصفیه پروتئین باید در شرایط ملایم انجام شود. Yeasen ژل میل ترکیبی ضد DYKDDDDK(پرچم). (Cat#20584ES) با در نظر گرفتن این موضوع طراحی شده است. بافر ذخیره سازی آن است TBS حاوی 50٪ گلیسرول در PH 7.4، که نه تنها از فعالیت ژل محافظت می کند، بلکه محیطی ملایم را برای تصفیه پروتئین فراهم می کند.

فرآیند تصفیه با ژل Flag ساده و کارآمد است. برای تسهیل استفاده از شستشوی پپتید 1×Flag، بسته محصول شامل پپتید 1×Flag (Cat#20572ES) رایگان است. این امر فرآیند شستشو را ملایم (تقریباً بدون هیچ آسیبی به پروتئین ها) و بسیار راحت می کند (سهولت آزمایش را بیشتر افزایش می دهد).

4. اندازه های چندگانه و گزینه های حمل و نقل انعطاف پذیر: برآورده کردن نیازهای تجربی مختلف

با توجه به مقیاس ها و نیازهای مختلف آزمایشگاه های مختلف، Yeasen ژل پرچم را در اندازه های مختلف ارائه می دهد، از جمله 1 میلی لیتر، 5 میلی لیتر، 25 میلی لیتر و 100 میلی لیتر. چه برای اکتشاف اولیه در مقیاس کوچک یا تولید پروتئین در مقیاس بزرگ، یک گزینه مناسب در دسترس است. برای خریدهای سالانه با حجم بالا، مشتریان می‌توانند محموله‌ها را به صورت دسته‌ای دریافت کنند که به آنها امکان می‌دهد از تخفیف قیمت برخوردار شوند و در عین حال از فشار موجودی بیش از حد اجتناب کنند.

داده های تست

M: نشانگر پروتئین 1: نمونه خام پیش ستونی پروتئین Flag-N/ Flag-M/Flag-C 2: جریان پس از ستون پروتئین Flag-N/ Flag-M/Flag-C 3: شستشو (شرق با pH 2.7) 4: شستشو (شستشو pH 12) 5: شستشو (1×شستشوی پپتید پرچم) 6: ژل خالص شده (pH 2.7 شستشو) 7: ژل خالص شده (شرق با pH 12) 8: ژل خالص شده (1×شستشوی پپتید پرچم) الف：پرچم-N   ب：پرچم-M   ج：پرچم-C

شکل 1.   Yeasen ژل میل ترکیبی ضد DYKDDDDK(پرچم). نتایج خالص سازی برای پروتئین های کم بیان (Flag-N (a)، Flag-M (b)، Flag-C (c)) نشان داده شده در SDS-PAGE.

M: نشانگر پروتئین 1: نمونه خام پیش ستونی از پروتئین Flag-C 2: جریان پس از ستون پروتئین Flag-C 3: شستشو (شرق با pH 2.7) 4: شستشو (شرق با pH 12) 5: شستشو (1×شستشوی پپتید پرچم) 6: ژل خالص شده (PH 2.7 شستشو) 7: ژل خالص شده (شرق با pH 12) 8: ژل خالص شده (1×شستشوی پپتید پرچم) الف：Yeasen ب：برند S*   ج：برند G*

شکل 2. مقایسه از Yeasen (الف) بابرند S* (ب) و بrand G* (c) ژل های Anti-Flag در تصفیه پروتئین های کم بیان (مثلاً پروتئین های غشایی) نشان داده شده در SDS-PAGE.

نتیجه گیری:

1. Yeasen ژل میل ترکیبی ضد DYKDDDDK(پرچم). (Cat#20584ES) دارای ویژگی بالایی است و می تواند به برچسب های Flag در موقعیت های مختلف (پروتئین های همجوشی پرچم N ترمینال، پروتئین های همجوشی پرچم N ترمینال اصلاح شده با Met، پروتئین های همجوشی پرچم ترمینال C) متصل شود.

2. تحت شرایط بیان پروتئین هدف بسیار کم (به عنوان مثال، پروتئین های غشایی)، Yeasen ژل Affinity Anti-DYKDDDDK(Flag). (Cat#20584ES) بازده و خلوص قابل توجهی در مقایسه با رقبا به دست می آورد. استفاده از Yeasen پپتید 1×Flag (Cat#20572ES) برای شستشو نتایج بهتری را ارائه می دهد.

راه حل های کامل برای پروتئین های فیوژن با برچسب پرچم:

انتروکیناز نوترکیب (Cat#20395ES): یک پروتئاز خاص که انتهای کربوکسیل لیزین را با چهار اسید آسپارتیک می شکافد: Asp-Asp-Asp-Asp-Lys. این دنباله بخشی از برچسب octapeptide Flag (DYKDDDDK) است. انتروکیناز نوترکیب (rEK) می تواند به راحتی برچسب Flag را از پروتئین های همجوشی حذف کند و آن را به ابزاری ایده آل برای مطالعه ساختار و عملکرد پروتئین های بومی تبدیل کند.

MagBeads ضد DYKDDDDK(پرچم). (Cat#20565ES): میکروسفرهای مغناطیسی پلیمری تهیه شده از جفت کووالانسی آنتی بادی های مونوکلونال ضد DYKDDDDK (پرچم) موش با کیفیت بالا با دانه های مغناطیسی مبتنی بر سیلیس (قطر) از 200 نانومتر). این دانه ها برای رسوب ایمنی (IP) یا رسوب همزمان (Co-IP) پروتئین ها با برچسب Flag مناسب هستند.

اطلاعات محصول

نام محصول	شماره محصول	مشخصات
ژل Affinity Anti-DYKDDDDDK(Flag).	20584ES03/08/25	1 میلی لیتر/5 میلی لیتر / 25 میلی لیتر
انتروکیناز گاوی نوترکیب، His، بیان شده در مخمر	20395ES60/76/90	100 U/500 U/5000 U
MagBeads ضد DYKDDDDK(پرچم).	20565ES03/08	1 میلی لیتر/5 میلی لیتر