yeasen ucf. من ® اولترانوکلئاز - بهترین انتخاب شما برای تخریب اسیدهای نوکلئیک

1. نوکلئاز تمام توان چیست؟
2. سناریوهای استفاده از نوکلئاز تمام توان چیست؟
3. مزایایی که نوکلئاز تمام توان باید داشته باشد چیست؟
4. سوالات متداول
5. محصولات مرتبط

1. نوکلئاز تمام توان چیست؟

نوکلئازهای تمام توان، اندونوکلئازهای اصلاح شده ژنتیکی با توانایی تجزیه طیف گسترده ای از اشکال اسید نوکلئیک هستند که شامل اسیدهای نوکلئیک تک رشته ای، دو رشته ای، خطی، بومی و دناتوره شده می باشد. آنها اولیگونوکلئوتیدهای 5'-مونوفسفات را با طول های 3 تا 5 باز تولید می کنند و هیچ بازشناسی خاصی از خود نشان نمی دهند. این نوکلئازهای همه کاره پایداری و فعالیت هضم قوی را در شرایط مختلف از خود نشان می دهند، که آنها را برای از بین بردن باقی مانده های اسید نوکلئیک در نمونه ها یا محصولات بسیار کارآمد می کند. این امر خلوص نمونه و اثربخشی بیولوژیکی محصولات را افزایش می‌دهد و نوکلئازهای قدرتمند را به عنوان آماده‌سازی آنزیمی ترجیحی برای تحقیقات علمی، واکسن‌ها و صنایعی مانند پروتئین و داروسازی پلی‌ساکارید تبدیل می‌کند.

علاوه بر این، نوکلئازهای تمام توان نقش مهمی در حذف اسیدهای نوکلئیک در طول تهیه واکسن‌ها، آنتی‌بادی‌ها، سلول‌درمانی و سایر محصولات بیولوژیکی ایفا می‌کنند و از انطباق با مقررات FDA اطمینان می‌دهند که اسید نوکلئیک باقی‌مانده در محصول نهایی برای استفاده درمانی نباید از 10 pg/دوز تجاوز کند. با تجزیه اسیدهای نوکلئیک، نوکلئازهای همه توان ویسکوزیته لیزات سلولی را کاهش می دهند و فرآیند فیلتراسیون/اولترافیلتراسیون محلول را در خلال خالص سازی ذرات مشتق شده از سلول مانند ویروس ها، وکتورهای AAV و اجسام انکلوژن تسهیل می کنند. این فرآیند پردازش را ساده می کند، سانتریفیوژ را بهبود می بخشد، راندمان جداسازی رسوب و مایع رویی را افزایش می دهد و اثربخشی خالص سازی کروماتوگرافی را افزایش می دهد و در نهایت بازده و خلوص محصول را افزایش می دهد.

2. سناریوهای استفاده از نوکلئاز تمام توان چیست؟

UltraNuclease طیف گسترده ای از کاربردها را دارد و در اینجا سناریوهای استفاده خاص آورده شده است.

2.1 تصفیه ویروس (لنتی ویروس، AAV، واکسن آدنوویروس نوترکیب، ویروس غیرفعال، ویروس انکولیتیک و غیره)

استفاده از ویروس ها در بخش زیست پزشکی به طور قابل توجهی در حال گسترش است و کاربردهایی مانند واکسن، سلول درمانی، ژن درمانی و زمینه های مختلف دیگر را در بر می گیرد. سلول های میزبان مسئول تولید ویروس عمدتاً سلول های عبور پیوسته (CCL) هستند. CCL ها یک استعداد ژنتیکی برای رشد غیرقابل تنظیم نشان می دهند و به آنها توانایی تکثیر نامحدود را می دهد. با این حال، وجود DNA باقیمانده از CCL ها می تواند خطرات بالقوه ای مانند تکثیر کنترل نشده سلول های انسانی که منجر به تشکیل تومور می شود، ایجاد کند. علاوه بر این، این قطعات DNA باقیمانده ممکن است حاوی ژنوم های ویروسی عفونی باشند که نگرانی هایی را در مورد خطر عفونت در کنار تومورزایی ایجاد می کند. در نتیجه، اقدامات کنترلی دقیق برای مدیریت DNA باقیمانده در محصولات بیولوژیکی و تضمین ایمنی آنها ضروری است. در این راستا UCF ما.ME™ UltraNuclease یک راه حل مطمئن برای تصفیه ویروس ارائه می دهد.

نمک نقش اساسی در کاهش تجمع پروتئین یا ویروس ایفا می کند و جداسازی DNA و RNA را از پروتئین ها و سایر اجزای سلولی تسهیل می کند. Salt Active UltraNuclease، که یک اندونوکلئاز غیر اختصاصی است، فعالیت بهینه را در غلظت های بالای نمک نشان می دهد. در شرایط پر نمک، آنزیم‌ها به DNA و RNA آزاد شده دسترسی بهتری پیدا می‌کنند و تخریب آن‌ها را افزایش می‌دهند. نوکلئازها با فعالیت زیاد در محیط‌های پر نمک در افزایش فرآیندهای تصفیه مؤثرتر هستند. Salt Active UltraNuclease را می توان برای کاهش ویسکوزیته در سوپرناتانت های سلولی و لیزات استفاده کرد و کارایی تصفیه را در شرایط نمک بالا افزایش داد. این آنزیم همچنین باقیمانده‌های اسید نوکلئیک میزبان را تا سطح پیکوگرام کاهش می‌دهد و در نتیجه عملکرد و ایمنی کاربردهای مختلف محصولات بیولوژیکی، از جمله تصفیه ویروس، ساخت واکسن، و تولید پروتئین‌ها و داروهای پلی‌ساکاریدی را افزایش می‌دهد.

2.2 خالص سازی پروتئین نوترکیب بیان شده در E. coli

پروتئین‌های خاصی که در E. coli بیان می‌شوند، تمایل به تجمع در اجسام گنجاندن دارند، که فرآیند خالص‌سازی را پیچیده می‌کند، زیرا اغلب با DNA میزبان در هم تنیده می‌شوند. سلول‌های باکتریایی پاره‌شده حاصل می‌توانند ویسکوزیته بالایی از خود نشان دهند و به طور قابل‌توجهی کارایی خالص‌سازی پروتئین را کاهش دهند. با این حال، با وارد کردن 10 تا 50 واحد بر میلی لیتر UCF.ME UltraNuclease به محلول باکتری در طول اختلال اولتراسونیک و انکوبه کردن نمونه در دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 30 دقیقه یا 4 درجه سانتیگراد در طول شب پس از اتمام اختلال، ویسکوزیته در محلول باکتریایی را می توان به طور موثر کاهش داد. این به نوبه خود، کارایی فرآیند تصفیه را به طور قابل ملاحظه ای افزایش می دهد. به طور خلاصه، می‌توانید برای تسهیل خالص‌سازی مؤثر پروتئین، به UCF.ME UltraNuclease ما اعتماد کنید.

2.3 جلوگیری از تجمع سلولی

در سال‌های اخیر، استفاده از سلول‌های تک هسته‌ای خون محیطی منجمد شده (PBMC) در سنجش ایمنی به طور چشمگیری افزایش یافته است. بزرگترین ویژگی سلول های PBMC این است که پس از احیا به راحتی جمع می شوند که به راحتی می تواند منجر به کیفیت پایین سلول و نتایج آزمایش غیر قابل اعتماد شود. هنگامی که سلول ها احیا می شوند، غلظت مناسب (25-50 U/mL) UCF.ME™ UltraNuclease به محیط کشت اضافه می شود و سلول ها به طور همزمان کشت می شوند که می تواند به طور موثری از تجمع سلولی جلوگیری کند. از این رو، می توانید از UCF.ME™ UltraNuclease ما نهایت استفاده را ببرید تا شانس یک نتیجه موفقیت آمیز را افزایش دهید.

3. مزایایی که نوکلئاز تمام توان باید داشته باشد چیست؟

3.1 طیف گسترده ای از برنامه های کاربردی

UCF.ME™ UltraNuclease می تواند اشکال مختلف DNA و RNA را تحت شرایط آزمایشی مختلف برش داده و تجزیه کند و می تواند برای حذف اسید نوکلئیک باقیمانده در محصولات بیولوژیکی مختلف استفاده شود.

3.2 خلوص بالا، فعالیت آنزیمی بالا

برای UCF.ME™ UltraNuclease ما، خلوص آنزیم آن بیشتر یا برابر با 99٪ (HPLC) و فعالیت آنزیمی آن بیشتر یا برابر با 1.5*106 U/mg است (با استفاده از روش کمی مطلق برای بستر عمومی).

3.3 سازگاری قوی

UCF.ME™ UltraNuclease پایداری بالایی در ذخیره سازی و یخ زدایی دارد. UCF.ME™ UltraNuclease را در دمای -20 درجه سانتیگراد، 4 درجه سانتیگراد و 37 درجه سانتیگراد ذخیره می کنیم تا روند فعالیت آنزیم را تشخیص دهیم. هنگامی که به مدت 2 هفته در دمای 37 درجه سانتیگراد قرار گرفت، هیچ تغییر قابل توجهی در فعالیت آنزیم مشاهده نشد.در ضمن، برای اطمینان از پایداری آنزیم، از ترکیب یخ خشک + کیسه یخ استفاده می کنیم. حمل و نقل UCF.ME™ UltraNuclease در محل شما. همچنین دارای تحمل قوی است و می تواند با انواع شرایط عملیاتی سازگار شود.

3.4 مطابق با فارمکوپه باشید

UCF.ME™ UltraNuclease در UCF.ME (کارخانه فوق العاده تمیز. آنزیم مولکولی) یک نوع آنزیم فوق تمیز است. آنزیم فوق تمیز چیست؟ این یک آنزیم مولکولی است که به استانداردهای کیفیت بدون HCD، HCR، HCP، DNASE FREE، FREE RNASE، بدون باقیمانده پروتئاز، بدون باقیمانده میکروبی، بدون پاتوژن، منشاء حیوانی، آلودگی آنتی بیوتیکی، اندوتوکسین فوق العاده کم باقیمانده، فعالیت آنزیم بالا، و غیره با قابلیت اطمینان مجدد به محصولات ما و غیره.

تولید 3.5 GMP

کل فرآیند تولید UltraNuclease در کارگاه تولید GMP تکمیل می شود و طرح بازرسی کیفیت به شدت توسط داروسازی روش، پاسخگویی به تقاضای مقیاس بزرگ از تحقیق و توسعه تا تولید.

UCF.ME™ شریک UltraNuclease —— کیت UltraNuclease ELISA
در مراحل عادی تصفیه، UCF.ME™ اولترا نوکلئاز به راحتی به عنوان یک ناخالصی پاک می شود.  برای تشخیص باقیمانده UCF.ME™ UltraNuclease، YEASEN کیت پشتیبانی کننده UltraNuclease ELISA را توسعه داده است که می تواند بقایای UCF.ME™ را به دقت تشخیص دهد. UltraNuclease در نمونه این کیت دارای خطی بودن، تکرارپذیری، نرخ بازیابی و ویژگی عالی است.

اولترا نوکلئاز کیت الایزا

محدوده خطی بین 0.047 و 3 ng/mL است و R2 بیشتر از 0.99 است. با تکرارپذیری خوب بین گروهی، غلظت ثابت UltraNuclease را به نمونه اضافه می کنیم و از 3 دسته مختلف کیت های ELISA برای تشخیص استفاده می کنیم. زمانی که غلظت نوکلئاز بین 3 تا 186/0 نانوگرم در میلی لیتر باشد و CV کمتر از 10 درصد باشد، نرخ بازیابی تشخیص بین 70 تا 110 درصد است. علاوه بر این، نرخ بازیابی نمونه شبیه‌سازی‌شده UltraNuclease با غلظت‌های مختلف همگی بین ۷۰ تا ۱۳۰ درصد است و بهتر از سایر برندها هستند. همچنین دارای ویژگی قوی است که ما اتصال غیر اختصاصی آنتی بادی UltraNuclease را به 8 نمونه رایج ارزیابی کردیم. نتایج گروه مداخله و گروه کنترل همپوشانی داشت و تداخلی مشاهده نشد.

پس از بایگانی DMF UltraNuclease، YEASEN DMFs از اولترانوکلئاز فعال نمک از FDA ایالات متحده آمریکا.

4. سوالات متداول

Q1: در کدام مرحله UltraNuclease اضافه شود؟

A: این بستگی به نمونه هایی دارد که با آنها سر و کار دارید. در تصفیه ویروس، به طور کلی پس از شفاف سازی ویروس اضافه می شود. در خالص سازی پروتئین E. coli، هنگامی که سلول ها لیز می شوند، می توان آن را اضافه کرد. در برخورد با تجمع سلولی، می توان آن را مستقیماً برای کشت همزمان با سلول ها به محیط کشت اضافه کرد.

Q2: اگر دمای واکنش نتواند به 37 درجه سانتیگراد برسد، چگونه از آن استفاده کنیم؟

الف: فعالیت آنزیمی UltraNuclease تحت تأثیر دما، زمان درمان و واحدهای فعالیت آنزیمی است. اگر دما نتواند به 37 درجه سانتیگراد برسد، می توان مقدار آنزیم را به طور مناسب اضافه کرد یا زمان انکوباسیون را افزایش داد.

Q3: آیا UltraNuclease با مهارکننده های پروتئاز سازگار است؟

الف: سازگار است، اما توجه داشته باشید که بسیاری از مهارکننده های پروتئاز حاوی EDTA هستند. هنگامی که EDTA شروع به بالاتر از 1 میلی مولار می کند، EDTA فعالیت برخی از نوکلئازها را مهار می کند.

Q4: چگونه UltraNuclease را حذف کنیم؟

الف: می توان آن را با روش هایی مانند TFF، دیالیز و ستون های کروماتوگرافی حذف کرد.

Q5: آیا می توان از کیت UltraNuclease ELISA برای تشخیص مارک های دیگر باقی مانده های نوکلئاز تمام توان استفاده کرد؟

الف: ما انجام این کار را توصیه نمی کنیم. کیت ELISA کاملاً بر اساس UltraNuclease ساخته شده است و می تواند به طور دقیق UltraNuclease را تعیین کند. نوکلئازهای Altipotent برندهای دیگر ممکن است از نظر توالی و فرآیند تولید با UltraNuclease متفاوت باشند و نتایج آزمایش ممکن است نادرست باشد.

5. محصولات مرتبط

محصولات ارائه شده توسط Yeasen به شرح زیر می باشد.

جدول 1 محصولات مرتبط

نام محصول	SKU	مشخصات
UCF.ME™ UltraNuclease GMP درجه	20157ES25/60/80/90	25KU/100KU/1MU/5MU
UCF.ME™ Salt Active UltraNuclease درجه GMP	20159ES25/60/80/90	25KU/100KU/1MU/5MU
کیت الایزا UltraNuclease	36701ES59	96T
نمک فعال کیت الایزا UltraNuclease	36703ES96	96T