شرح
توضیحات محصول
2×هیف کناس™ پلاس PCR Master Mix (با رنگ) یک محلول آماده برای استفاده 2× از پیش مخلوط حاوی Hieff Canace است.™ به علاوه DNA پلیمراز با وفاداری بالا، dNTPs، و یک سیستم بافر بهینه. این ترکیب شامل دو آنتی بادی مونوکلونال است که فعالیت پلیمراز و فعالیت اگزونوکلئاز 3'→5' را در دمای اتاق مهار می‌کنند و این امر باعث می‌شود که Hot Start PCR بسیار اختصاصی باشد. افزودن فاکتورهای ازدیاد طول امکان تقویت قطعه طولانی را با قطعات هدف تا 13 کیلوبایت فراهم می کند. این آنزیم فعالیت DNA پلیمراز 5'→3' و اگزونوکلئاز 3'→5' را نشان می دهد، با وفاداری 83 برابر بیشتر از Taq DNA پلیمراز و 9 برابر Pfu DNA پلیمراز معمولی. این برای تقویت الگوهای پیچیده، تولید محصولات PCR با انتهای ناقص مناسب است.
2×هیف کناس™ Plus PCR Master Mix (با رنگ) مزایایی مانند سادگی، حساسیت بالا، ویژگی قوی و پایداری عالی را ارائه می دهد. سیستم واکنش فقط به افزودن پرایمرها و قالب نیاز دارد و می توان از پروتکل PCR دو مرحله ای برای ساده کردن روند و صرفه جویی در زمان استفاده کرد. این محصول شامل رنگ ردیابی الکتروفورز است که امکان بارگذاری مستقیم محصولات PCR برای آنالیز ژل را فراهم می کند. علاوه بر این، حاوی یک عامل محافظ ویژه است که فعالیت پایدار را حتی پس از چرخه‌های انجماد و ذوب مکرر تضمین می‌کند.
مشخصات
| Cat.No. | 10154ES01 / 10154ES03 / 10154ES08 / 10154ES60 |
| اندازه | 100 میکرولیتر / 1 میلی لیتر / 5 × 1 میلی لیتر / 100 × 1 میلی لیتر |
ذخیره سازی
این محصول باید در دمای -25 تا 15 درجه سانتیگراد نگهداری شود 1 سال
دستورالعمل ها
1. سیستم های واکنش PCR توصیه شده
| اجزاء | حجم(μL) | نهایی تمرکز |
| 2× Hieff Canace™ به علاوه PCR Master Mix (با رنگ)* | 25 | 1× |
| الگو*** | x | - |
| به جلو پریمر(10 میکرومول/L)** | 2 | 0.4 میکرومول/L |
| آرهمیشه پریمر(10 میکرومول/L)** | 2 | 0.4 میکرومول/L |
| ddH2O | تا 50 | - |
*غلظت 1× نهایی مخلوط حاوی 1 U/50 میکرولیتر پلیمراز، 2 میلی مول در لیتر Mg است.2+و 200 میکرومول در لیتر dNTPs.
** غلظت نهایی توصیه شده پرایمرها در واکنش PCR 0.2-1 میکرومول در لیتر است و 0.4 میکرومول در لیتر ترجیح داده می شود..
***مقدارهای الگوی توصیه شده برای سیستم واکنش 25 میکرولیتری:
| نوع قالب | اندازه قطعه (1 کیلوبایت تا 10 کیلوبایت) |
| DNA ژنومی | 50 نانوگرم-200 نانوگرم |
| DNA پلاسمید یا ویروسی | 10 pg-20 ng |
| cDNA | 1-2.5 میکرولیتر (از 1/10 حجم کل PCR بیشتر نباشد) |
2. برنامه واکنش
1)پروتکل دو مرحله ای (ترجیحا):
| چرخه گام | تیامپر | زمان | چرخه ها |
| دناتوراسیون اولیه | 98 درجه سانتیگراد | 3 دقیقه | 1 |
| دناتوره سازی | 98℃ | 10 ثانیه | 30-35 |
| پسوند | 68℃ | 30 ثانیه/کیلوبایت | |
| افداخلی هاکستنشن | 72℃ | 5 دقیقه | 1 |
2)پروتکل سه مرحله ای (متعارف):
| چرخه گام | تیامپر | زمان | چرخه ها |
| دناتوراسیون اولیه* | 98 درجه سانتیگراد | 3 دقیقه | 1 |
| دناتوره سازی | 98℃ | 10 ثانیه | 30-35 |
| بازپخت ** | 60℃ | 20 ثانیه | |
| پسوند*** | 72℃ | 30 ثانیه در کیلوبایت | |
| افداخلی هاکستنشن | 72℃ | 5 دقیقه | 1 |
*دناتوراسیون اولیه: در دمای 98 درجه سانتی گراد به مدت 3 دقیقه (5-10 دقیقه برای الگوهای با GC بالا) توصیه می شود.
** بازپخت: در دمای 60 درجه سانتی گراد به مدت 20 ثانیه توصیه می شود (قابل تنظیم بین 10-30 ثانیه). بازپخت طولانی مدت ممکن است باعث ایجاد لکه روی ژل شود.
***پسوند: در دمای 72 درجه سانتیگراد برای 30 ثانیه در کیلوبایت (تا 60 ثانیه در کیلوبایت برای الگوهای پیچیده) توصیه می شود.
3)پروتکل بازپخت گرادیان (توصیه شده برای اهداف دشوار):
| چرخه گام | تیامپر | زمان | چرخه ها |
| دناتوراسیون اولیه | 98 درجه سانتیگراد | 3 دقیقه | 1 |
| دناتوره سازی | 98℃ | 10 ثانیه | 15 (کاهش 1 درجه سانتیگراد در هر چرخه) |
| آنیلینگ گرادیان | 70-55 درجه سانتیگراد | 20 ثانیه | |
| پسوند | 72℃ | 30 ثانیه در کیلوبایت | |
| دناتوره سازی | 98 درجه سانتی گراد | 10 ثانیه | 20 |
| آنیل کردن | 55 درجه سانتی گراد | 20 ثانیه | |
| پسوند | 72 درجه سانتی گراد | 30 ثانیه در کیلوبایت | |
| افداخلی هاکستنشن | 72℃ | 5 دقیقه | 1 |
4)ویژگی های پروتکل های مختلف PCR:
| نوع پروتکل | سرعت | خاص بودن | بازده PCR | نرخ تشخیص |
| دو مرحله ای | سریع ترین | بالا | متوسط | بالا |
| سه مرحله ای | متوسط | متوسط | بالاترین | متوسط |
| آنیلینگ گرادیان | آهسته | بالا | متوسط | بالا |
یادداشت ها
1.این محصول فقط برای استفاده تحقیقاتی است.
2. لطفا با کت های آزمایشگاهی و دستکش های یکبار مصرف کار کنید،برای امنیت شما
پرداخت و امنیت
اطلاعات پرداخت شما با اطمینان پردازش می شود. ما جزئیات کارت اعتباری را ذخیره نمی کنیم و به اطلاعات کارت اعتباری شما دسترسی نداریم.
تحقیق
شما همچنین ممکن است دوست داشته باشید
پرسش
این محصول فقط برای اهداف تحقیقاتی است و برای استفاده درمانی یا تشخیصی در انسان یا حیوانات در نظر گرفته نشده است. محصولات و محتوا توسط پتنت ها، علائم تجاری، و حق چاپ متعلق به Yeasen Biotechnology محافظت می شوند. نمادهای علامت تجاری نشان دهنده کشور مبدا هستند، نه لزوما ثبت در همه مناطق.
برخی از برنامه‌های کاربردی ممکن است به حقوق مالکیت معنوی شخص ثالث دیگری نیاز داشته باشند.
Yeasen به علم اخلاق اختصاص داده شده است و معتقد است که تحقیقات ما باید به سؤالات مهم و در عین حال اطمینان از ایمنی و استانداردهای اخلاقی بپردازد.